液质联用仪 AB 4500 usertraining

1、TripleQuad 4500 Operator Training4500 用户培训TripleQuad 4500 Operator TrainingTripleQuad 4500 Operator Training用液相或注射泵将样品注 入质谱.1. 样品注入样品注入样品在离子源内电离,带电离子在接口内进行去溶剂,聚集,冷却进入质量分析器2. 离子化离子化四极杆用于传输离子或选择母离子和子离子,.离子通过聚焦和传输进入下一组四极杆3. 质量分析器质量分析器四极杆四极杆检测器记录离子的信号. 然后将信号传输到电脑绘制成色谱图. 4. 离子检测和数据分析离子检测和数据分析Q0Q1Q3DFCEMO

2、RSKEXIT Q2 (LINAC)5.真空系统真空系统TripleQuad 4500 Operator Training 连续注射连续注射 样品放在注射器中或静态的针内 用注射泵或电场引力, 样品流连续并恒定地流入离子源喷口通常用于安装时调谐通常用于安装时调谐, 质量校正质量校正 和标准样品质谱方法的优化和标准样品质谱方法的优化 流动注射分析流动注射分析 用手动进样器和液相泵,注入样品,由流动相带入离子源喷口通常安装通常安装5ul的定量环的定量环 液质联用液质联用 用液相的泵,流速从 nL/min 到 mL/min 样品可能是纯品或者是混合物 流动相带着样品经过色谱柱分离后进入质谱的离子源T

3、ripleQuad 4500 Operator Training辅助气加热头TIS or APCI 离子探头液体进入口垂直精密调节旋钮水平精密调节旋钮两通或三通离子源排气口喷雾针出口APCI电晕针TripleQuad 4500 Operator TrainingTurbo VTM 离子源TripleQuad 4500 Operator TrainingTurboV 离子探头离子探头在使用时调节喷雾针出套管1-3mmTripleQuad 4500 Operator Training从进样口进来的样品液体被雾化气吹成雾滴，加于喷嘴上的高压电使雾滴带电，带电雾滴去溶剂后生成样品离子。辅助加热气(GS

4、2)可加快去溶剂的速度，可用于比较大的液体流量。 TripleQuad 4500 Operator TrainingAPCI 三步离子化的过程:电晕针放电使离子源内的 N2 或 O2 带电N2 或 O2 转移电荷到气态溶剂分子上1. 带电的气态溶剂分子转移电荷到气态样品上TripleQuad 4500 Operator TrainingTurbo VTM 离子源的APCI API3200, 4000,5000和4500的离子源体是TIS 和APCI共用的,TIS和APCI的互换不用工具,只用手就可以完成.放电针位置调节钮,单手操作即可 放电针一直在离子源体内TripleQuad 4500 Op

5、erator TrainingInterfaceAPI 40004500TripleQuad 4500 Operator TrainingOrificeQjet Orifice和QJetTripleQuad 4500 Operator TrainingTripleQuad 4500 Operator Training不稳定的离子不稳定的离子稳定的离子稳定的离子离子源离子源检测器检测器直流和交流控制电信号直流和交流控制电信号TripleQuad 4500 Operator Training 在四极杆上加有三种电压在四极杆上加有三种电压 RF 固定频率的交流电固定频率的交流电 (1MHz on A

6、PI 2000;816 Khz on API 4000; 1.2288Mhz on API 5000) Filtering DC (FDC) 在每组杆之间的电压差在每组杆之间的电压差. 用于选择离子用于选择离子 决定分辨率决定分辨率. Rod Offset Voltage (ROV) 低的直流电定义了离子轴向飞行的动力低的直流电定义了离子轴向飞行的动力. “RF Only” 的意义的意义: 没有没有FDC; 只有只有RF, & Rod Offset 只是传输离子只是传输离子,没有分辨率没有分辨率TripleQuad 4500 Operator Training180 phase shi

7、ft电信号电信号180度度相移相移= ions离子簇离子簇1. 离子簇被吸引到离子簇被吸引到 “B” 极极.2. RF 电压极性反转电压极性反转, 所有的离子簇被吸引所有的离子簇被吸引到到 A 极极. 3. RF 电压极性反转电压极性反转, 所有的离子簇被吸引所有的离子簇被吸引到到 B 极极. 4. RF 电压极性反转电压极性反转, 所有的离子簇被吸引所有的离子簇被吸引到到 A 极极. . BABARFRFRFRF180 phase shift电信号电信号180度相移度相移180 phase shift电信号电信号180度相移度相移End View后视后视图图BABA四极杆工作原理之RF ON

8、LYABBARF only-A rods & B rodsare 180 out of phase只加交流信号只加交流信号-A杆与杆与B杆信号杆信号强度相同强度相同,相位差相位差180度度*Q0, Q2 ,ST,ST2,ST3 一直工作于一直工作于 RF only. *选用选用Q1单级工作时单级工作时Q3工作于工作于 RF only *选用选用Q3单级工作时单级工作时Q1工作于工作于 RF only TripleQuad 4500 Operator TrainingABBA To Detector去检测器去检测器AABB离子簇在离子通道的运动模式 A极和B极上的RF交流电压及ROV直流

9、偏置电压使离子簇以螺旋运动的方式前进 RF only-A rods & B rodsare 180 out of phase只加交流信号只加交流信号-A杆与杆与B杆上杆上加的电压强度相同加的电压强度相同,相位差相位差180度度TripleQuad 4500 Operator TrainingTripleQuad 4500 Operator Training四极杆原理之FDCTripleQuad 4500 Operator Training四极杆工作原理之ROV(IE) 离子能量(IE) 影响分辨率和峰形 降低IE = 分辨率变好,灵敏度降低 提高IE = 分辨率变差,灵敏度提高 Q1离

10、子能量= n(Q0 - RO1);n电荷数 Q1 IE1 =Q0-RO1= 0.5-2eV Q3离子能量= n(RO2 - RO3); n电荷数 Q3 IE3 =RO2-RO3= (1-6eV)TripleQuad 4500 Operator TrainingQ1 的离子能量(IE1)IE =0.5 V 分辨率好而灵敏度差IE = 2.0 V分辨率差而灵敏度好.TripleQuad 4500 Operator Training分辨率的定义 FWHH:半峰高处的峰宽半峰高处的峰宽 AB分辨率的定义 Unit = 0.7 (0.1 amu FWHH) High = 0.5 (0.1 amu FWH

11、H) Low = 1.1 (0.1 amu FWHH) Open= 3-5 amu 在调节完分辨率后需要做质量校正在调节完分辨率后需要做质量校正TripleQuad 4500 Operator Training四极杆原理之灵敏度和分辨率 灵敏度和分辨率是相互影响,相互制约的. 分辨率差则灵敏度高 分辨率好则灵敏度低Low 低分辩,半峰宽: 1.5-2 amu Unit 单位分辩,半峰宽:0.7 amu High 高分辩,半峰宽:0.5 amu TripleQuad 4500 Operator Training 离子检测器 (Channel Electron Multiplier) Triple

12、Quad 4500 Operator Training检测器电压的调节如果检测器电压增加100V,信号至少增加2030%.则需要增加检测器电压,右图情况下:用2500vTripleQuad 4500 Operator Training扫描方式TripleQuad 4500 Operator TrainingQ1 单级扫描模式 Q1质量扫描 (Q1 Scan): Q1 作为单级质量分析器 Q1 scan 主要用于确定母离子的m/z(质荷比) 单个宽范围质量扫描 多个小范围质量扫描 Q1 多离子信号监测 (Q1 Multiple Ion ) 对感兴趣的多个离子进行信号监测 用于单级定量 在两种 Q

13、1 工作模式下, Q3 处于 RF-only 模式 Q3 只传输所有的Q1出来的离子到检测器TripleQuad 4500 Operator TrainingQ3 单级扫描模式 Q3质量扫描 (Q3 Scan): Q3 可用来做单级质量分析器 单个宽范围质量扫描 多个小范围质量扫描 Q3 scan 不用于确定母离子的m/z(质荷比),仅用于做Q3质量校准 Q3 多离子信号监测 (Q3 Multiple Ion ) 对感兴趣的多个离子进行信号监测 在两种 Q3 工作模式下, Q1 处于 RF-only 模式 Q1 只传输所有的离子到Q2,Q3 TripleQuad 4500 Operator T

14、rainingQ1 ScanQ3ScanQ1 质量分析器 Q2 RF Only Q3 RF Only9235321221300 15009235321221300 1500Q1 和 Q3 Scan 质谱图 Q1 RF Only Q2 RF Only Q3 质量分析器 质谱图强度强度质荷比amu质荷比amuTripleQuad 4500 Operator Training Q1 质量分析器 Q2 RF Only Q3 RF OnlyQ1 MIQ3MIQ1 和 Q3 Multiple Ion Mode信号图信号图Q1 RF Only Q2 RF Only Q3 质量分析器强度强度时间时间Tripl

15、eQuad 4500 Operator TrainingTripleQuad 4500 Operator TrainingMS/MS 二级质谱联用的扫描方式 MS/MS二级质谱联用的扫描方式 Product Ion产物离子扫描产物离子扫描 分析母离子的碎片离子信息 Precursor Ion母离子扫描母离子扫描 分析产生特定子离子的母离子的信息 Neutral Loss中性丢失扫描扫描 分析产生特定中性丢失碎片的母离子的信息 MRM (Multiple Reaction Monitoring)多反应离子监测多反应离子监测 对多对母离子/子离子信号进行监测 用于定量,具有高灵敏度和高选择性 在所有的 MS/MS 模式中,Q1 Q3 处于质量分析器模式 Q3 能够扫描，或者固定在某几个质量数 Q2 产生的离子进入 Q3TripleQuad 4500 Operator Training产物离子扫描产物离子扫描Product Ion ScanCAD gas923 Q1 选定母离子 Q2 与气体碰撞产生碎片 Q3 扫描子离子226497502质荷比amu502497226母离子与气体碰撞产生碎片质谱图强度200800TripleQuad 4500 Operator Training母离子扫描母离子扫描Precursor Ion Scan1289923