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文档简介

1、整理课件1整理课件2数字数字 PCR(digital PCR,dPCR) PCR(digital PCR,dPCR) 技术是近年技术是近年来迅速发展起来的一种定量分析技术。与传统来迅速发展起来的一种定量分析技术。与传统定量定量 PCR PCR 技术不同的是数字技术不同的是数字 PCR PCR 不依赖于扩不依赖于扩增曲线的循环阈值增曲线的循环阈值(CT(CT值值) )进行定量，不受扩增进行定量，不受扩增效率的影响，也不必采用看家基因和标准曲线，效率的影响，也不必采用看家基因和标准曲线，是对起始样的绝对定量。是对起始样的绝对定量。整理课件3主 要 内 容数字数字 PCR 的发展与原理的发展与原理数

2、字数字 PCR 的应用的应用312数字数字 PCR 的前景展望的前景展望整理课件4整理课件5整理课件6传统 PCR 或定量 PCR 反应都是在 96 /384 孔板中进行的，因此早期的数字 PCR 技术也采用 96 /384孔板作为反应单元。这远远不能满足数字 PCR对反应单元数的需求，于是开始制造微升和纳升级别的反应室，在提高灵敏度的同时减少了反应体系的总体积。1.微反应室/孔板数字 PCR整理课件72.微流控数字 PCR随着微流芯片技术的发展，数字 PCR 借助微流芯片，可以把样本准确并且快速的分成若干个独立的反应单元，各个单元之间互不影响，可以多步反应同时进行。提高反应通量的同时也降低了反应消耗成本。整理课件83.微滴数字 PCR微滴数字 PCR 借鉴了乳液 PCR，即将 DNA 模板与连接引物的磁性微球以极低的浓度(比如单拷贝) 包裹于油水两相形成的纳升至皮升级液滴中进行 PCR 扩增，扩增后的产物富集在磁性微球上，收集破乳后进行测序。通过油水两相间隔得到的以液滴为单位的 PCR 反应体系，比微孔板和 IFC 系统更容易实现小体积和高通量，而且系统简单，成本低，因此成为理想的数字 PCR 技术平台。【2】整理课件9整理课件10整理课件11整理课件12整理课件13整理课件14整理课件15整理课件16整理课件17整理课件18整理课件19整理课件20整理课

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