CIP作业指导书、无菌线无菌验证检验作业指导书

1、CIP作业指导书No作业项目作业内容说明文件及表单1各品项生产周期说明：高酸调味茶：冰红、冰绿、劲凉系列 中性产品：绿茶、乌龙、铁观音、大麦、茉莉系列 果汁饮品：橙汁、水晶/红葡萄、水蜜桃、菠萝、黑加仑、芒果等无线别 /品项热充线无菌线TPCAN矿矿物物质质水水线线调配系统高酸调味茶果汁/酸 梅 汤/枣汁中性产品果汁/高酸调味茶中性产品乳酸产品中性产品果汁/酸 梅汤/枣汁高酸调味茶高酸调味茶果汁/酸 梅 汤/枣汁生产周期46h34h24h72h48h48h24h32h42h46h34h7 7天天和生产线同步1.1.作业名称：作业名称：CIPCIP作业作业2生产线各阶段清洗方式说明：1、PET热

2、充/ TP/CAN在碱洗或全程洗时需加入碱添加剂，以增加碱活 性2、全程洗流程：水冲-碱循环-水冲-酸循环-水冲3、碱洗流程：水冲-碱循环-水冲4 4、杀菌水洗流程：水冲、杀菌水洗流程：水冲- -杀菌剂循环杀菌剂循环- -水冲水冲5 5、酸洗流程：水冲、酸洗流程：水冲- -酸循环酸循环- -水冲水冲- -杀菌剂循环杀菌剂循环- -水冲水冲6 6、水线加强洗流程：水冲、水线加强洗流程：水冲- -碱循环碱循环- -水冲水冲- -酸循环酸循环- -水冲水冲- -杀菌剂循环杀菌剂循环- -水冲水冲7、热充加强洗流程：水冲-碱循环-水冲-碱循环-水冲-酸循环-水冲8 8、设备大修：淡季保养、平时重大维修

3、（管路焊接、灌装阀拆检等）、设备大修：淡季保养、平时重大维修（管路焊接、灌装阀拆检等）CIP作业标准-无菌线CIP作业标准-PET热充/TP/CANCIP作业标准-矿物质水线CIP作业标准-调配No作业项目作业内容说明文件及表单各线各阶段清洗方式CIP方式连续性生产连续性生产停产后再生产停产后再生产每个周期每个周期每间隔每间隔4 4个个周期或换周期或换产1414天天3-143-14天天3 3天天设备大修设备大修后后PET热充/CAN碱洗全程洗全程洗碱洗水洗热充加强洗TP全程洗全程洗全程洗碱洗水洗热充加强洗矿物质矿物质水线水线酸洗酸洗水线加强水线加强洗洗（每月）（每月）水线水线加强加强洗洗酸洗酸

4、洗杀杀菌菌水水洗洗水线加水线加强洗强洗调配碱洗全程洗全程洗碱洗水洗热充加强洗无菌线各线各工段清洗工艺、标准不一，详见CIP作业标准-无菌线3UHT介质端清洗说明：使用可移动式单机CIP系统来清洗UHT充填冷却段及充填回流冷却段的热交换管，去除热交管内管外侧附着物；清洗频率： 3-6 月/次CIP作业标准-UHT介质端4 4CIPCIP效果判定效果判定CIPCIP合格的条件合格的条件: :最终水洗的进、出水要求最终水洗的进、出水要求 1.1.感观相同感观相同; ;2.2.矿物质水线电导率差矿物质水线电导率差4.5s/cm4.5s/cm；其余线电导率差；其余线电导率差15s/cm15s/cm。（每

5、。（每CIPCIP都需确认）都需确认）3 3、 CIPCIP后拆检后拆检UHTUHT管路、部分充填头用棉签涂抹，无黑色异管路、部分充填头用棉签涂抹，无黑色异物（此项目每月确认一次）物（此项目每月确认一次）无5过滤器清洗说明1.清洗频率：调配桶终端过滤器每4h一次；生产线三级过滤器每CIP一次2.清洗方式：手工清洗（调配区域的过滤器用5ppm-10ppm的二氧化氯溶液浸泡10min-20min，用RO水冲洗至无异味，晾干备用）无No作业项目作业内容说明文件及表单6 6水处理活性炭水处理活性炭消毒说明消毒说明1.1.消毒方式：排净活性炭过滤器内的水，用蒸汽给活性炭消毒方式：排净活性炭过滤器内的水，

6、用蒸汽给活性炭升温，待罐体升到升温，待罐体升到9090时维持时维持2h2h，然后自然冷却到常温，然后自然冷却到常温再使用；如果无蒸汽供应可以选择过氧乙酸杀菌，用再使用；如果无蒸汽供应可以选择过氧乙酸杀菌，用500-1000 ppm500-1000 ppm的过氧乙酸溶液对活性炭浸泡的过氧乙酸溶液对活性炭浸泡1-3 h1-3 h，注意，注意必须正冲至无过氧乙酸残留必须正冲至无过氧乙酸残留2.2.消毒频率：消毒频率：1-31-3个月每次个月每次无7异常处理1.最终冲洗水水质不满足上述要求时，用RO水一直冲洗至合格为止2.CIP检测浓度不符合标准则调整浓度至要求范围并重新计时3.温度不满足要求时调整温

7、度至要求范围再开始重新计时4.管路拆检若发现有污垢需重新进行CIP，及时汇报品保中心并联系药剂厂商协助解决无2.2.注意事项：注意事项： 2.1 2003年两条老无菌线只生产高酸调味茶，周期为48h；新上无菌线各品项生产周期按照上面标准执行，其余无菌线各品项周期以各阶段生产周期延长实验所确认的时间为准。 2.2 CIP时间为清洗有效时间，不包括各种调整（温度、浓度）及系统设备等待的辅助时间。 2.3 CIP清洗流速要求：80mm以下的管径，流速必须为1.5m/s以上；80mm以上的管径，流速必须为2.5m/s以上；或按照流量要求：CIP流量为生产流量的1.2-1.5倍。 2.4生产中调配桶、萃

8、取桶应定期用RO水进行冲洗，高酸产品至少每4桶冲洗一次，低酸产品每桶都需冲洗。 2.5 CIP中心酸碱桶出口应配备过滤网，孔径80目，耐腐蚀，每2周检查过滤网状况。本制度中，凡涉及与国家政策法规相抵触的，均以相关政策法规为准。本制度中，凡涉及与国家政策法规相抵触的，均以相关政策法规为准。3.3.相关文件及表单相关文件及表单 文件及表单文件及表单 文件编号文件编号3.1CIP作业标准-无菌线 W-SC-5040-0044-013.2CIP作业标准-PET热充/TP/CAN W-SC-5040-0044-023.3CIP作业标准-矿物质水线 W-SC-5040-0044-033.4CIP作业标准-

9、调配 W-SC-5040-0044-043.5CIP作业标准-UHT介质端 W-SC-5040-0044-053.6CIP作业标准-药剂检测 W-SC-5040-0044-06CIP作业标准作业标准 - 无菌线无菌线No线别区域执行方式正常生产周期结束后未到周期，生产中失去无菌设备保养维修后106SIG无菌线UHTCIP 3CIP 4CIP 6无菌桶CIP 3CIP 4CIP 6充填系统CIP 3CIP 4CIP 6207krones无菌线UHT和无菌桶CIP 3CIP 4CIP 6充填、无菌水及洗瓶系统CIP 5（隔两个周期做一次CIP 13）CIP 4CIP 6307KHS无菌线UHTCI

10、P 8CIP 4CIP 6无菌桶CIP 3CIP 4CIP 6充填系统CIP 3CIP 4CIP 6无菌水系统CIP 9（1月/次）/407procomac无菌线UHTCIP 10CIP 4CIP 6无菌桶CIP 12CIP 12CIP 6充填系统CIP 11CIP 11CIP 6无菌水系统CIP 9（1月/次）/503SIG无菌线UHTCIP 14CIP 4CIP 6无菌桶CIP 14CIP 4CIP 6充填系统CIP 14CIP 4CIP 6610sidel无菌线UHTCIP 3CIP 4CIP 6无菌罐CIP 3CIP 4CIP 6充填CIP 5（隔两个周期做一次CIP 3）CIP 4C

11、IP 6过氧乙酸系统CIP 5（1月/次）/CIP 14无菌水系统CIP 9（1月/次）/CIP 141.各线各区域CIP执行方式2.各CIP的详细步骤及标准NoCIP种类流程水碱水碱水酸水1CIP 3浓度（%）/1.8-2.2/1.2-1.8/温度（）常温70-80常温/50-60常温时间（s）6001800600/12006002CIP 4浓度（%）/1.8-2.2/温度（）常温70-80常温/时间（s）6001200600/3CIP 5浓度（%）/1.8-2.2/温度（）常温70-80常温/时间（s）6001800600/4CIP 6浓度（%）/1.8-2.2/1.8-2.2/1.2-1

12、.8/温度（）常温70-80常温70-80常温50-60常温时间（s）6002400600300060024006002次5CIP 8浓度（%）/1.8-2.2/1.2-1.8/温度（）常温70-80常温/50-60常温时间（s）6003600600/12009006CIP 9浓度（%）/1.2-1.8/温度（）/常温50-60常温时间（s）/60018009007CIP 10浓度（%）/1.8-2.2/1.2-1.8/温度（）6070-8060/50-6060时间（s）6001800600/1200600NoCIP种类流程水碱水碱水酸水8CIP 11浓度（%）/1.8-2.2/1.2-1.8

13、/温度（）6070-8060/50-6060时间（s）6001200600/9006009CIP 12浓度（%）/1.8-2.2/1.2-1.8/温度（）常温70-80常温/50-60常温时间（s）6001200900/90090010CIP 13浓度（%）/1.8-2.2/1.2-1.8/温度（）常温70-80常温/50-60常温时间（s）6001800（洗瓶1200）600/1200（洗瓶600）60011CIP 14浓度（%）/1.8-2.2/1.2-1.8/温度（）6070-8060/50-6040时间（s）6001800600/18006002次CIP作业标准作业标准 - PET热充

14、热充/TP/CAN适用线别清洗方式品牌作业标准PET热充、TP、CAN碱洗泰华施艺康流程水洗碱洗水洗浓度（%）质量百分比RO水力洁辉SU560RO水1.0-1.80.1-0.4温度（）常温70-80常温时间（s）6002100900流程水洗碱洗水洗浓度（%）质量百分比RO水AC-110普氯清RO水1.5-2.50.1-0.5温度（）常温70-80常温时间（s）60021001200PET热充、TP、CAN全程泰华施艺康适用线别清洗方式品牌作业标准流程水洗碱洗水洗酸洗水洗浓度（%）质量百分比RO水力洁辉（1.0-1.8）RO水派垢（0.8-1.0）RO水SU560（0.1-0.4）温度（）常温7

15、0-80常温50-60常温时间（s）60021006001800900流程水洗碱洗水洗酸洗水洗浓度（%）质量百分比RO水AC-110（1.5-2.5）RO水AC-310（1.0-1.5）RO水普氯清（0.1-0.5）温度（）常温70-80常温50-60常温时间（s）60021006001800900适用线别清洗方式品牌作业标准PET热充、TP、CAN水洗泰华施艺康流程水洗碱洗水洗碱洗水洗酸洗水洗浓度（%）质量百分比RO水力洁辉（1.0-1.8）RO水力洁辉（1.0-1.8）RO水派垢（0.8-1.0）RO水SU560（0.1-0.4）SU560（0.1-0.4）温度（）常温70-80常温70-

16、80常温50-60常温时间（s）600120060018006001800900流程水洗碱洗水洗碱洗水洗酸洗水洗浓度（%）质量百分比RO水AC-110（1.5-2.5）RO水AC-110（1.5-2.5）RO水AC-310（1.0-1.5）RO水普氯清（0.1-0.5）普氯清（0.1-0.5）温度（）常温70-80常温70-80常温50-60常温时间（s）600120060018006001800900CIP作业标准作业标准 - 矿物质水矿物质水适用线别清洗方式品牌作业标准矿物质水线杀菌杀菌水洗水洗艺康泰华施流程水冲洗杀菌水冲洗浓度(ppm)RO水臭氧水（0.6-1.0）RO水温度（）常温时间

17、（s）100-300 600循环300 流程水冲洗杀菌水冲洗浓度(ppm)RO水臭氧水（0.6-1.0）RO水温度（）常温时间（s）100-300 600循环300 适用线别清洗方式品牌作业标准矿物质水线酸洗酸洗艺康泰华施流程水冲洗酸洗水冲洗杀菌水冲洗浓度(%)RO水皓丽（1.0-1.5）RO水OA消毒液（0.13-0.20）RO水温度（）常温时间（s）2001800循环300600循环300 流程水冲洗酸洗水冲洗杀菌水冲洗浓度(%)RO水派垢（0.8-1.0）RO水泰华净（0.20-0.30）RO水温度（）常温时间（s）2001800循环300600循环300 适用线别清洗方式品牌作业标准矿

18、物质水线加加强强洗洗艺康泰华施流程水冲洗碱洗水冲洗酸洗水冲洗杀菌水冲洗浓度(%)RO水美普RO水皓丽RO水OA消毒液RO水1.0-1.51.0-1.50.13-0.20温度（）常温时间（s）20018003001800300600300流程水冲洗碱洗水冲洗酸洗水冲洗杀菌水冲洗浓度(%)RO水力洁辉RO水派垢RO水泰华净RO水0.8-1.00.8-1.00.20-0.30温度（）常温时间（s）20018003001800300600300CIP作业标准-调配适用线别清洗方式品牌作业标准调配碱洗泰华施艺康区域流程水洗碱洗水洗浓度(%)RO水力洁辉RO水1.0-1.5温度()70-80溶糖桶时间(s

19、)480600720萃取桶果汁还原桶调配桶900高速搅拌桶600区域流程水洗碱洗水洗浓度(%)RO水AC-110RO水1.0-1.5温度()70-80溶糖桶时间(s)480600720萃取桶果汁还原桶调配桶900高速搅拌桶600适用线别清洗方式品牌作业标准调配全程泰华施艺康区域流程水洗碱洗水洗酸洗水洗浓度(%)RO水力洁辉RO水派垢RO水1.0-1.50.6-1.0温度()70-8050-60溶糖桶时间(s)480600480600720萃取桶果汁还原桶调配桶900高速搅拌桶600区域流程水洗碱洗水洗酸洗水洗浓度(%)RO水AC-110RO水AC-310RO水1.0-1.50.5-1.0温度(

20、)70-8050-60溶糖桶时间(s)480600480600720萃取桶果汁还原桶调配桶900高速搅拌桶600适用线别清洗方式品牌作业标准调配加强洗泰华施艺康区域流程水洗碱洗水洗碱洗水洗酸洗水洗浓度(%)RO水力洁辉RO水力洁辉RO水派垢RO水1.0-1.51.0-1.50.6-1.0温度()70-8050-60溶糖桶时间(s)480600480600480600720萃取桶果汁还原桶调配桶900高速搅拌桶600区域流程水洗碱洗水洗碱洗水洗酸洗水洗浓度(%)RO水AC-110RO水AC-110RO水AC-310RO水1.0-1.51.0-1.50.5-1.0温度()70-8050-60溶糖桶

21、时间(s)480600480600480600720萃取桶果汁还原桶调配桶900高速搅拌桶600CIP作业标准-UHT介质端适用线别作业标准PET热充线 流程水洗除垢剂水洗除垢剂水洗时间3-5 min60-90 min3-5 min90-180 min10-30 min浓度10%-20%10%-20%温度常温60常温60常温说明：1.以上清洗时间和浓度具体值视结垢程度来定。2.因各工厂配备清洗小车无换热系统，除垢剂温度可以选择常温；若为提高清洗效果工厂可以 选择通过UHT内管加热来给介质端加热，但温度不要高于60。3.除垢剂选择必须对不锈钢无腐蚀性。CIP作业标准-药剂检测药剂名称检测方法Pr

22、incipal（普氯清）试剂：酚酞指示剂、0.1mol/L(N)HCl标准溶液、1N硫代硫酸钠步骤：1、取50mL使用液 2、加入2mL 1N硫代硫酸钠 3、加5滴酚酞指示剂（最好用pH计判断终点，pH=8.3为终点） 4、用0.1mol/L(N)HCl标准溶液滴定至红色变为无色，记录所耗HCl溶液毫升体积数V计算方法：使用液浓度%（wt/v）=0.761 N V % （N为HCl的标定浓度） MIP（美普）试剂：酚酞指示剂、0.5mol/L(N)HCl标准溶液步骤：1、取50mL使用液 2、加3-5滴酚酞指示剂（最好用pH计判断终点，pH=8.3为终点） 3、用0.5mol/L(N)HCl标

23、准溶液滴定至粉红色变为无色，记录所耗HCl溶液毫升体积数V计算方法：使用液浓度%（wt/v）=0.2516 N V % （N为HCl的标定浓度）Horolith FL（皓丽）试剂：酚酞指示剂、1.0mol/L(N)NaOH标准溶液步骤：1、取50mL使用液 2、加3-5滴酚酞指示剂（最好用pH计判断终点，pH=8.3为终点） 3、用1.0mol/L(N) NaOH标准溶液滴定,每加一滴摇匀，溶液由无色变为粉红色即为终点，记录所 耗NaOH溶液毫升体积数V计算方法：使用液浓度%（wt/v）=0.2244 N V % （N为NaOH的标定浓度）AC-110试剂：酚酞指示剂、0.5mol/L(N)H

24、Cl标准溶液步骤：1、取10mL使用液 2、加3-5滴酚酞指示剂（最好用pH计判断终点，pH=8.3为终点） 3、用0.5mol/L(N)HCl标准溶液滴定至粉红色变为无色，记录所耗HCl溶液毫升体积数V计算方法：使用液浓度%（wt/v）=0.855 N V % （N为HCl的标定浓度）AC-310试剂：酚酞指示剂、1.0mol/L(N)NaOH标准溶液步骤：1、取10mL使用液 2、加3-5滴酚酞指示剂（最好用pH计判断终点，pH=8.3为终点） 3、用1.0mol/L(N) NaOH标准溶液滴定,每加一滴摇匀，溶液由无色变为红色，记录所耗NaOH 溶液毫升体积数V计算方法：使用液浓度%（w

25、t/v）=1.196 N V % （N为NaOH的标定浓度）OA150试剂：6mol/L硫酸、0.1N高锰酸钾溶液、2.5mol/L碘化钾溶液、0.01mol/L的硫代硫酸钠溶液、酚酞指示剂步骤：1、移取20mL使用液至250mL锥形瓶 2、加80mLRO水，5mL 6mol/L硫酸 3、用0.1 N高锰酸钾溶液滴定至溶液刚好呈粉红色，注意不能滴过头 4、立即加入10mL2.5mol/L碘化钾，溶液为棕黄色，快速用0.01mol/L的硫代硫酸钠溶液滴定，待溶液颜色滴定至微黄时，加入1-2 mL淀粉指示剂，继续快速滴定，直至溶液为无色计算公式：过氧乙酸/ppm=硫代硫酸钠的毫升数 硫代硫酸钠的当

26、量浓度 38 50药剂名称检测方法无菌线无菌验证作业指导书无菌线无菌验证作业指导书S0设备检查S1烟雾测试和尘埃粒子测试S2染色试验No作业步骤作业说明文件及 表单核决权限11.产品UHT及无菌水UHT、无菌罐和一体机的SIP/生产程序的验证，包括实际温度（温度试纸）、时间的检测，以及最低温度的预警程序，到达下限系统是否能够自动报警并停机2.空瓶杀菌机喷嘴喷射压力、洗瓶机无菌水喷射压力自动检测效果及压力预警程序3.各蒸汽障的温度预警程序，低于最低值系统是否失去无菌，即是否需要重新建立无菌系统4.杀菌剂的浓度、温度、流量预警程序，低于下限系统是否自动停机5.检查所有关键控制点参数6.检查CIP/

27、COP/SIP/SOP运行程序、浓度检测、效果评估无菌线无菌验证验收标准制造处主管、品管处主管21.安装高效过滤器后，用尘埃粒子计数器对每一块过滤器及过滤器和设备的连接处进行检漏2.在生产模式下，用烟雾发生器在压力最高区域发散烟雾，观察烟雾流动方向；正压罩各区压力控制按照供应商提供说明书上压力设定值的下限无菌线无菌验证验收标准品管处主管31.溶液的配制：52g可溶性淀粉，2g胭脂红(日落黄)色素，2L蒸馏水，混合煮沸后冷却备用。2、 用喷壶将配制好的溶液喷洒在正压罩、洗瓶、充填、封盖区域的任意位置。3、 喷洒后静置30min左右（具体时间以溶液已粘附在设备面为准）。4、 COP/SOP后观察设

28、备表面是否有染色剂残留无菌线无菌验证验收标准品管处主管S4正压罩环境预测试41.系统在正常的CIP/SIP后，用无菌水取样器对无菌水总取样口以及各使用点终端取样口取样，并进行微生物分析，各点无菌水取样量至少为1L，取样后对样品进行微生物分析（微生物检测采用膜过滤法）2.系统在正常的CIP/SIP后，用无菌空气取样器对各点无菌空气/氮气取样，时间至少为30min，取样后样品移至微生物操作台，将膜片直接取出，放入事前准备好的培养皿进行培养。无菌线无菌验证验收标准品管处主管5 经过正常的COP/CIP/SOP/SIP后，对空间进行落菌、浮游菌的采集、涂抹、尘埃粒子的检测。1.落菌：在灌装/封盖/洗瓶

29、区域共放置10个培养皿，1h后用操作手套取样2.浮游菌：每个区域1个点，抽气量1000L；3.涂抹：用操作手套在灌装/封盖/洗瓶区域共涂抹10个点，每个棉签涂抹面积10cm2 （如涂抹充填头、洗瓶头或杀菌喷嘴每个棉签5个喷嘴或充填/洗瓶头）4.尘埃粒子：每个区域1个点无菌线无菌验证验收标准品管处主管S3辅助系统测试No作业步骤作业说明文件及 表单核决权限S5贴片试验61.准备钢片50片，钢片粗糙度的选择尽量接近设备表面的粗糙度，钢片尺寸3cm5cm2.将枯草芽孢杆菌（Bacillus Atrophaeus ATCC9372）接种于钢片上，尽量接种在钢片中间位置：105和106各接种25片3.钢

30、片正常风干后，准备进行测试，先进行低浓度试验后，再进行高浓度试验。4.基于无菌室/洁净室的尺寸,在洗瓶、充填、封盖区域确定20个对于系统灭菌重要的位置,即那些可能导致瓶盖、铝片、瓶子和产品污染的位置（可参考染色试验的结果）,和在清洁和杀菌时绝对有必要灭菌的位置,例如:冲洗阀、灌注阀、下盖槽和机星轮等装置的表面. 5.在一张灌装无菌区的图纸上将上述位置标出并标号.并将钢片编号和图纸对应，然后进行钢片的悬挂。6.悬挂钢片前，在25片钢片中随机抽取5片钢片进行阳性对照，其方法为：将钢片取回后，分别放入5个已灭菌好的装有100mL无菌水的盒子里进行充分振荡，并进行梯度稀释，至少稀释5个梯度，取浓度最低

31、的两个梯度的样品，各取1mL进行倒平板，每个梯度每个样品做3个平行样，进行培养计数，减掉最大值、最小值然后计算出钢片的平均初始带菌量 。无菌线无菌验证验收标准品保中心 、生产技术部No作业步骤作业说明文件及表单核决权限S5贴片试验67. 钢片悬挂好后，根据供应商所提供说明书清洗灭菌条件的下限对空间设备进行一次COP/SOP8. 把所有钢片依次放入已编号已灭菌且装有无菌水的盒子里，到实验室充分振荡后进行膜过滤，培养48h后记录每片钢片残留的菌量。9. 106的实验同105一样 验证判定：用阳性对照检测的含菌量与杀菌后钢片残留的菌量进行对照，从而判定系统的杀菌能力（衰减计数法）LOG(Rave)=

32、LOG(Rc/Nsample)LOG(Sc/ Ntest)Rc: 阳性对照样带菌总数Nsample: 阳性对照样数量Sc : 测试样残留带菌总数LOG(Rave)：平均杀菌能力Ntest :测试样数量LOG(Rmin)LOG(Rc/Nsample)LOG(Sc)Sc : 测试样的残留带菌数最大样品的菌落数LOG(Rmin)：最低杀菌能力No作业步骤作业说明文件及表单核决权限S6瓶内、外挑战测试7瓶内挑战测试：1.准备在该线生产的空瓶260只以上2.用枯草芽孢杆菌（Bacillus Atrophaeus ATCC9372）接种空瓶：105和106各130瓶以上， 接种位置按照不同瓶型来定，尽量接

33、种在瓶内凹陷不易杀菌的地方，在无菌线生产的所有瓶型都需做此验证3.空瓶正常风干后，准备进行测试，先做低浓度后，再做高浓度，系统必须先做好COP/CIP/SOP/SIP，且无菌罐中准备好无菌水4.测试前105和106的空瓶各随机抽取10个空瓶，到实验室进行阳性对照，其方法：到实验室将空瓶灌装100mL无菌水并充分振荡清洗，然后进行梯度稀释，至少稀释5个梯度（后面具体操作可参考钢片的做法），得出空瓶的初始带菌量5.将120个105空瓶手动放入输送带进行杀菌（根据供应商所提供说明书用清洗灭菌条件的下限）、洗瓶、充填（充填无菌水100mL左右）、封盖，106的空瓶重复以上步骤。6.将灌装好的产品在实验

34、室充分振荡后，依次进行膜过滤，培养48h后得出空瓶杀菌后残留菌量无菌线无菌验证验收标准品保中心、生产技术部No作业步骤作业说明文件及表单核决权限7瓶外挑战测试：1.准备在该线生产的空瓶130只以上2.将枯草芽孢杆菌（Bacillus Atrophaeus ATCC9372）接种到空瓶中：104和105各65瓶以上，接种位置按照不同瓶型来定，尽量接种在瓶外凹陷不易杀菌的地方，接种后请用记号笔作好标致，在无菌线生产的所有瓶型都需做此验证3.空瓶正常风干后，手动挂到输送带准备测试，测试前系统需已做COP/CIP/SOP/SIP4.测试前随机抽取104空瓶5个，到实验室进行阳性对照，其方法：到实验室将

35、空瓶接种处剪开，放入已灭菌好的100mL无菌水的盒子中充分振荡清洗，然后进行梯度稀释，至少稀释4个梯度（后面具体操作可参考钢片的做法），得出空瓶外部初始带菌量5.将60个104空瓶经过正常的杀菌程序后（根据供应商所提供说明书用清洗灭菌条件的下限），充填出口放置一次性无菌取样袋。取出空瓶后，到实验室将接种标志点剪出，放入已灭菌好含有无菌水的盒子中充分振荡，清洗后膜过滤，或用已灭菌的棉签来涂抹接种标志点，将棉签放入放入已灭菌含有无菌水的盒子中充分振荡，清洗后膜过滤，从而得出瓶外杀菌后菌残留量，105的空瓶重复以上步骤瓶内外的验证判定方法和贴片试验的判定方法相同No作业步骤作业说明文件及表单核决权限

36、8盖内挑战测试1.准备在该线生产的瓶盖130只以上(每种盖型都需测试，这里的盖型不依产品别分，仅指28mm、38mm、1881瓶口的盖子以及后续开发的特殊结构的盖型)2.用枯草芽孢杆菌（Bacillus Atrophaeus ATCC9372）接种瓶盖：105和106各65个以上3.瓶盖正常风干后，准备进行测试，先做105后再做106，系统必须先做好COP/CIP/SOP/SIP ，无菌罐中存有无菌水4.测试前105和106的瓶盖各随机抽取5个瓶盖，到实验室进行阳性对照，其方法：到实验室将瓶盖分别放入装有100mL的无菌水中，进行充分振荡清洗，然后进行梯度稀释，至少稀释5个梯度（后面具体操作可

37、参考钢片的做法），得出盖内初始带菌量5.将60个105瓶盖手动放入盖整列机，进行杀菌（根据供应商所提供说明书用清洗灭菌条件的下限）、冲洗、吹干、封盖，106的瓶盖重复以上步骤，建议接种盖子和未接种盖子用两种颜色盖子作区分。6.将封盖后的产品（100mL无菌水）在实验室充分振荡后，进行膜过滤，旋开的瓶盖（指盖螺纹处接种的盖子）也放入滤杯中清洗，培养48h后得出瓶盖杀菌后残留菌量7.106的瓶盖重复以上步骤无菌线无菌验证验收标准品保中心、生产技术部No作业步骤作业说明文件及表单核决权限S7盖内、外挑战测试8盖外挑战测试1.准备在该线生产的盖子70只以上2.用枯草芽孢杆菌（Bacillus Atro

38、phaeus ATCC9372）接种瓶盖：104和105各35个以上，接种位置：盖外部不易杀菌点，接种后请用记号笔作好标致3.瓶盖正常风干后，手工放入盖准备测试（接种盖和未接种盖颜色需做区分），测试前系统需已做COP/CIP/SOP/SIP4.测试前随机抽取104瓶盖5个，到实验室进行阳性对照，其方法：到实验室将盖子直接放入已灭菌好的100mL无菌水的盒子中充分振荡清洗，然后进行梯度稀释，至少稀释4个梯度（后面具体操作可参考钢片的做法），得出盖外初始带菌量5.将30个104瓶盖手动放入盖整列机，瓶盖经过正常的杀菌程序（根据供应商所提供说明书用清洗灭菌条件的下限）杀菌、清洗后，在充填出口处用一次

39、性无菌取样袋取样，然后到实验室将瓶盖旋开，直接放入已灭菌好含有无菌水的盒子中，充分振荡清洗后膜过滤（注意不要碰到接种位置），或用已灭菌的棉签来涂抹接种标志点，将棉签放入放入已灭菌好含有无菌水的盒子中，充分振荡清洗后膜过滤；或用一次性无菌取样袋，直接在封盖前的下盖轨道处单个取样，然后到实验室将盖取出，直接放入已灭菌好含有无菌水的盒子中，充分振荡清洗后膜过滤，也可以将无菌水直接倒入无菌取样袋中，进行清洗后进行膜过滤，从而得出盖外杀菌后菌残留量6.105的瓶盖重复以上步骤盖内外的验证判定方法和S5贴片试验的判定方法相同 No作业步骤作业说明文件及表单核决权限S8LG培养基预测试S9 产品测试S10

40、LG培养基测试91.参考LG培养基配制标准调配LG培养基，根据需要调配相应的吨数，经过UHT 138*32s杀菌后存放于无菌灌中2.系统在正常的COP/CIP/SOP/SIP后准备进行培养基灌装（以标准生产条件、最高生产速度）开机灌装5000瓶（半瓶）、第24h再灌装5000瓶（半瓶）、第48h再灌装5000瓶（半瓶）；合计15000瓶；期间系统维持待机状态，每4h左右进行一次短SOP3.产品需放入30-35的环境中进行保温，保温的第7天和第14天进行打检，14天后打检产品无问题可放行无菌线无菌验证验收标准LG培养基配制标准品管处主管101.生产线经过正常的COP/CIP/SOP/SIP后准备

41、生产，产品（高酸）正常生产，分3批灌装，每批10万瓶，每个批次间需重新CIP/SIP2.第一批次产品需全检，第二批次和第三批次产品抽检即可，抽检比例10%3.成品微检、成品保温、常温取样30min/次；生产中无菌水、无菌空气/氮气需取样；生产结束涂抹、落菌、浮游菌检测（具体方法同S1、S3）4.需对产品进行双氧水残留测试5.产品需放入30-35的环境中进行保温，保温的第7天和第14天进行打检，14天后打检产品无问题可放行无菌线无菌验证验收标准品保中心生产技术部111.参考LG培养基配制标准调配LG培养基，根据需要调配相应的吨数，经过UHT 138*32s杀菌后存放于无菌灌中2.系统在正常的CO

42、P/CIP/SOP/SIP后准备进行培养基灌装，开机灌装5000瓶；第24h灌装5000瓶；第48h灌装8000瓶；第72h灌装10000瓶，依次打开洗瓶、充填、封盖这三个区域的窗户1min，每次只能打开某区域的一扇窗户，然后进行短SOP后进行LG培养基灌装，灌装2000瓶，总计3万瓶，以上产品全部为半瓶灌装，待机时每隔4h左右进行一次短SOP3.培养基灌装后放入30-35的环境中保温，3天后将全部产品倒置，7天后进行全检，若没问题14天再进行全检无菌线无菌验证验收标准LG培养基配制标准品保中心生产技术部No作业步骤作业说明文件及表单核决权限2.2.注意事项：注意事项：2.1无菌线各阶段验证方

43、案 步骤及内容状态新装生产线生产线的迁移新瓶型新盖型年度保养/大修S0设备检查S1烟雾测试和尘埃粒子测试S2染色试验S3辅助系统测试S4正压罩环境预测试S5贴片试验S6瓶内、外挑战测试S7盖内、外挑战测试S8 LG培养基预测试 S9 产品测试S10 LG培养基测试2.2 各步骤判定标准详见无菌线无菌验证验收标准2.3 目前新线验证合同按六步走，其中test1指：S0、S1、S2；test2指：S3、S4;test3指：S5、S6、S7；test4指：S8；test5指：S9；test6指：S10; 此作业指导书重点强调各步骤的作业方法，若一些细节部分验证合同有差异则以验证合同为准，如一些线别无

44、中间SOP、无破坏性实验等则不予考虑； 03SIG无菌线不适合此作业指导书2.4 钢片、空瓶、盖的挑战测试中所接种菌量105、106都是指风干后钢片、瓶、盖上的带菌量，所以接种时需注意考虑到风干的损失（一般接种至风干枯草芽孢菌量损失一个梯度左右）。2.5 在钢片、瓶、盖的挑战测试中所有样品的膜过滤菌落计数只计枯草芽孢杆菌，其他杂菌一律不做考虑，请操作中尽量小心，避免太多的杂菌带入。2.6 贴片试验、瓶、盖的挑战试验中涉及到枯草芽孢杆菌接种，请注意：接种不要直接在实验室，尽量选择单独的屋子（垃圾场、污水处理处等选一间）避免污染，接种的屋子里尽量保持干燥（可以在屋子里放一些石灰）；在现场（风轨、盖

45、槽等）以及实验室做完试验后请立即消毒，避免污染；计数后含有枯草芽孢的平皿需121*30min灭菌后再作处理。2.7 钢片试验、瓶、盖的挑战测试以及微生物培养基验证的所有运行参数需做详细记录，包括瓶、盖杀菌剂的浓度杀菌时间、中间SOP间隔时间、浓度等，若培养基测试通过此参数即作为日后量产的一个参考标准。 3.3.相关文件及表单相关文件及表单 文件及表单文件及表单 文件编号文件编号3.1无菌线无菌验证验收标准 W-SC-5040-0032-013.2LG培养基配置标准 W-SC-5040-0032-02无菌线无菌验证验收标准无菌线无菌验证验收标准No步骤目 的标 准1S0前提条件对设备一些关键参数

46、及报警联动装置进行确认，为后续验证做好准备所需检测点的预报警及其联动装置正常；各CCP点参数先以设备厂商提供的为准2S1 烟雾测试和尘埃粒子测试验证正压罩各区域压力分布状况以及新安装高效过滤器的效果流向：充填区向封盖区流； 充填区向洗瓶区流； 洗瓶区向杀菌区流动尘埃粒子测漏无渗漏现象3S2染色试验本测试为评估COP/SOP效能所用，验证系统对正压罩内设备表面的清洗效果，从而确认COP/SOP是否存在清洗死角，及时调整喷嘴位置，也为贴片试验做好准备COP/SOP后干净、无可见的残留4S3辅助系统测试对系统的介质状况进行初步判定，从而验证系统在正常的CIP/SIP后能否制备出无菌的介质，为后续验证

47、做好准备 无菌水1cfu/1000mL 无菌空气1cfu/30min 无菌氮气1cfu/30min5S4正压罩环境预测试验证系统经过正常的COP/CIP/SOP/SIP后正压罩空间是否能达到无菌状态 落菌：1cfu/皿/30min； 浮游菌：1cfu/皿/1000L； 涂抹：1cfu/棉签； 尘埃粒子：充填、封盖、洗瓶达到100级 杀菌区达到1000级6S5贴片测试本测试为评估SOP效能所用, 验证系统对正压罩内设备表面的杀菌效果，从而确认正压罩无菌环境的建立状况以及是否存在灭菌死角SOP杀菌能力RAVE5log 且 R MIN3.0log No步骤目 的标 准7S6瓶内外挑战测试本测试是为验

48、证瓶杀菌系统对瓶内、外杀菌的能力瓶内杀菌能力RAVE5log且 RMIN3.0 log 瓶外杀菌能力RAVE4log且 RMIN2.0log 8S7盖内外挑战测试本测试是为验证盖杀菌系统对瓶盖内外的杀菌能力盖内杀菌能力RAVE5log且 RMIN3.0log 盖外杀菌能力RAVE4log且 RMIN2.0log 9S8 LG培养基预测试 系统无菌能力预测试，为后续产品测试作准备结果仅供参考，无标准10S9 产品测试提升机械效率为培养基测试作准备a、 变质率 1:100000b、 无菌水：1cfu/1000mL 无菌空气 1cfu/30min 无菌氮气 1cfu/30minc、 落菌 1cfu/

49、皿/30min； 浮游菌： 1cfu/皿/1000L； 涂抹： 1cfu/棉签； 尘埃粒子：充填、封盖、洗瓶达到100级 杀菌区达到1000级，风机检漏为0d、成品 菌落总数1cfu/mL 霉菌/酵母 1cfu/mL 大肠菌不得检出e、双氧水残留 0.5ppm11S10培养基测试 a、验证设备年度保养后的无菌状况，是否具备生产中性产品的能力b、判定新安装无菌线是否具备可持续生产的能力 c、验证系统运行中无菌环境被破坏后，经过SOP后系统是否能继续维持生产状态 变质率1：10000LG培养基配制标准培养基配制标准1. 调配配方（10000L） 葡萄糖(生物级) 200kg 酵母提取物(生物级)

50、35kg 蛋白胨(生物级) 20kg 硫酸铵(食品级) 20kg 磷酸二氢钾(食品级) 10kg 硫酸镁(食品级) 10kg RO水 约9500kg 碳酸氢钠(食品级) 适量2. 调配步骤2.1向调配桶中加入5000L纯净水2.2将20kg蛋白胨用800L60的纯净水在高搅桶中预混（搅拌5分钟直至蛋白胨彻底溶解），通过滤网(25m)加入调配桶中。2.3向高搅桶中加入1000L常温纯净水，开启搅拌器将其余组分按下列次序加入： 酵母提取物 35kg 葡萄糖 200kg 磷酸二氢钾 10kg 硫酸铵 20kg 硫酸镁 10kg2.4搅拌10min直至所有组分彻底溶解后打入调配桶中2.5调配桶搅拌10

51、min，用碳酸氢钠调至所需PH并补加水至10000L2.6取样检测，要求：感官清澈，透明，无异物；pH值(6.10.2)；温度（30）。2.7 LG培养基杀菌条件：138*32s3注意事项3.1 配制前应根据RO水的pH来测试估算碳酸氢钠的添加量，RO水的pH控制在5.8-6.5之间。3.2若培养基所需用量不为10000L,按此调配配方比例调整。3.3培养基贮存时间:2h,贮存时温度30无菌线制程、检验作业指导书无菌线制程、检验作业指导书吹瓶空瓶杀菌No作业步骤作业内容说明作业频率文件及表单11、 空瓶外观检测（目测：瓶口擦伤、瓶颈卡破、歪脖、成型是否良好以及瓶身是否有油污、黑点、气泡）2、

52、瓶胚/空瓶自动检测装置验证（自制不良品来验证打检装置是否良好）3、 空瓶物性（实验室检验：空瓶壁厚、容量、顶压、高度、最大直径、瓶口内径、螺纹外径的详细检测数据）1、1次/2h2、1次/12h3、1次/周无菌线品质管控标准21.瓶内杀菌药剂温度、浓度（温度：观察面板显示；浓度： PAA滴定法/H2O2比重法）2.瓶外杀菌药剂温度、浓度（温度：观察面板显示；浓度： PAA滴定法/H2O2比重法）3.杀菌喷嘴喷射总压力及喷射状态（喷射总压力通过压力表查询；喷射状态目测）4.各杀菌喷嘴压力自动检测装置效果确认（各喷嘴压力自动检测状况通过操作面板查询）5.瓶内、外H2O2气化温度（操作面板目测）6.瓶

53、内喷蒸汽压力（操作面板目测）7.杀菌药剂浓度自动检测装置效果确认（滴定法对浓度自动检测装置验证）8.瓶杀菌后瓶内温度自动检测装置使用状况（红外线自动检测仪）9.外喷流量（操作面板目测）10、杀菌前空瓶初始带菌量（实验室无菌水冲洗进行膜过滤，每次5个）1、1次/h2、1次/h3、1次/h4、1次/4h5、1次/h6、1次/h7、1次/4h8、1次/12h9、1次/h10、1次/CIP无菌线品质管控标准空瓶清洗/风干无菌水和无菌空气制备31、 空瓶风干无菌空气加热温度及无菌空气压力（操作面板目测）2、 空瓶冲洗压力及喷嘴喷射状况（压力通过查询无菌水罐压力或无菌水背压；喷嘴喷射状况目测）3、 各洗瓶

54、喷嘴压力自动检测装置效果确认（操作面板查询）4、 洗瓶时无菌空气压力（操作面板目测）5、 洗瓶系统SIP温度、时间或PAA浓度、时间（目测操作系统设置；PAA浓度通过滴定法）6、 蒸汽障温度（操作面板目测）7、 洗瓶后双氧水残留（双氧水测试试纸）8、 空瓶清洗/风干后微生物状况（实验室无菌水冲洗进行膜过滤，每次5个）1、1次/h2、1次/h3、1次/4h4、1次/h5、1次/SIP6、1次/h7、1次/CIP8、1次/CIP无菌线品质管控标准41、 无菌水系统CIP/SIP效果确认（CIP药剂温度、浓度、流量、清洗时间、最终冲洗水确认；SIP温度、时间确认）2、 无菌空气系统SIP确认（SIP

55、温度、时间通过操作面板查询）3、 无菌水杀菌温度、流量、冷却温度确认（操作面板目测）4、 产品回流压力/无菌水罐压力（操作面板目测）5、 各使用点无菌水微生物状况（取样1L以上实验室膜过滤）6、 各使用点无菌空气微生物状况（无菌空气取样器取样30min到实验室将滤膜取出培养）1、1次/CIP2、1次/CIP3、1次/h4、1次/h5、1次/CIP6、1次/CIP无菌线品质管控标准No作业步骤作业内容说明作业频率文件及表单盖杀菌、清洗产品UHT/无菌罐暂存充填51.瓶盖初始带菌量（无菌取样袋取样后实验室无菌水清洗膜过滤，每次25个盖，5个盖1组，分5组测试）2.盖杀菌药剂浓度、温度（温度观察面板

56、显示，浓度： PAA滴定/H2O2比重法）3.盖杀菌剂浓度自动检测装置效果确认（滴定法对浓度自动检测装置验证）4.盖槽杀菌药剂液位（操作面板目测）5.杀菌喷嘴/冲洗喷嘴 喷射状态（目测）6.盖无菌水冲洗流量/压力（操作面板目测）7.盖无菌空气吹干压力（操作面板目测）8、 H2O2汽化温度、风干温度（操作面板目测）9、盖杀菌清洗后微生物状况（无菌取样瓶/袋在下盖轨道取样后到实验室无菌水清洗膜过滤，每次5个盖）1、1次/CIP2、1次/h3、1次/4h4、1次/h5、1次/h6、1次/h7、1次/h8、1次/h9、1次/CIP无菌线品质管控标准61、 系统CIP/SIP效果确认（CIP药剂温度、浓

57、度、流量、清洗时间、最终冲洗水确认；SIP温度、时间确认）2、 产品杀菌温度、临界温度、流量、冷却温度、管路压差的确认（操作面板目测）3、 产品杀菌接管方式的确认（目测）4、 产品均质压力、脱气真空度（目测）5、 无菌罐压力(操作面板目测)6、 各点蒸汽障温度(操作面板目测)1、1次/CIP2、1次/h3、1次/CIP4、1次/h5、1次/h6、1次/h无菌线品质管控标准71、 系统CIP/SIP效果确认（CIP药剂温度、浓度、流量、清洗时间、最终冲洗水确认；SIP温度、时间确认）2、 产品充填量检测（电子称称量）3、 产品充填温度及充填液位（操作面板目测）4、 小无菌罐/环缸压力（操作面板目

58、测）5、 各点蒸汽障温度（操作面板目测）6、 产品理化指标确认（风味、糖度、pH、酸度检测）7、 产品微生物状况确认（膜过滤法）1、1次/CIP2、1次/12h3、1次/h4、1次/h5、1次/h6、1瓶/h7、酸性产品1瓶/h；中性产品1瓶/30min无菌线品质管控标准封盖正压罩环境外观控制81.产品扭矩检测（扭力仪检测）2.产品封盖角度检测（角度规检测）3.高歪盖率及高歪盖打检机使用状况确认（目测）4.瓶口残留（菲林试剂法）5.封盖头加热保护障温度（操作面板目测）6.产品充氮后内压控制（压力测试仪）7.封盖出口后编码器使用状况（低速观察是否对应）1、1次/4h2、1次/12h3、1次/h4

59、、1次/周5、1次/h6、1次/h7、1次/12h无菌线品质管控标准91.各区域压力（操作面板目测）2.各区域尘埃粒子（尘埃粒子计数器）3.COP药剂浓度、最终冲洗水确认（浓度滴定；冲洗水电导率检测/PAA滴定）4.水封药剂浓度（浓度滴定）5.气囊压力（操作面板目测）6.开机SOP及中间短SOP浓度确认（PAA滴定）7.正压罩各区涂抹、落菌、浮游菌状况（落菌：每个区域2个点，时间30min；浮游菌：每个区域1个点，抽气量1000L；涂抹：每个区域5个点，每个棉签涂抹面积1dm2如涂抹充填头、洗瓶头或杀菌喷嘴每个棉签5个喷嘴或充填/洗瓶头；）8.正压房温湿度（查看温湿度计）1、1次/h2、1次/

60、CIP3、1次/CIP4、1次/2h5、1次/h6、1次/CIP；中间短SOP频率依各机台设定来定7、1次/h8、1次/12h无菌线品质管控标准101.产品喷码效果及内容确认（目测）2.产品套标效果确认（目测）3.封箱拉力及封箱效果（拉力计检测；封箱效果目测）4.称重机打检效果验证（标准样验证）5.大字喷码效果及内容确认（目测）6.码垛层数及效果确认（目测）1、1次/h2、1次/h3、1次/h4、1次/h5、1次/h6、1次/4h无菌线品质管控标准2.2.注意事项：注意事项：2.1 标有的项目为检验科作业内容，其余为现场制程作业内容2.2 以上内容基本涵盖集团所有无菌线管控点，有部分监控点个别