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文档简介
1、肝功能试验的分类肝功能试验的分类 根据代谢功能分类: 1. 与胆红素代谢有关的试验:总胆红素测定(TBIL),结合胆红素测定(DBIL)。 2. 与蛋白质代谢有关的试验:总蛋白测定(TP),清蛋白测定(Alb),A/G比值。 3. 与胆汁酸代谢有关的试验:总胆汁酸测定,各种胆汁酸测定。 4. 血清酶学试验:丙氨酸氨基转移酶(ALT),天冬氨酸氨基转移酶(AST),-谷氨酰转肽酶(GGT),碱性磷酸酶(ALP)。临床肝功能试验组合肝功三项(ALT、TP、ALB、GLOB、A/G)肝功五项(肝功三项、AST、-GT、AST/ALT)肝功七项(肝功五项、ALP、LDH)一、血清丙氨酸氨基转移酶(AL
2、T)测定(2、4-二硝基苯肼法)1、试剂配制1份4N 氢氧化钠和9份蒸馏水混合均匀,即可使用2、操作方法试剂空白管试剂空白管标准管标准管样品管样品管基质液(L) 250250250标准液(L) -50-样品(L)-50蒸馏水(L) 50-混合37水浴30分钟,然后各管加显色剂250 L, 37水浴20分钟取出,各管加稀释氢氧化钠2.5ml,室温放置3分钟上机测定.标准值:100U/L波长510纳米,试剂空白调零,按公式计算结果.参考范围:0-50U/L样本要求:最适样本为当日空腹采集的无溶血、无乳糜的血清或血浆及时测定。谷草转氨酶测定(GOT)实验原理:实验原理:GOT作用于底物天门冬氨酸和作
3、用于底物天门冬氨酸和-酮戊酮戊二酸反应生成草酰乙酸和谷氨酸,草酰乙二酸反应生成草酰乙酸和谷氨酸,草酰乙 酸转化酸转化成丙酮酸与成丙酮酸与2,4二硝基苯肼在碱性环境中形成红二硝基苯肼在碱性环境中形成红色的苯腙,在色的苯腙,在510NM波波 长测定吸光度值,计算其长测定吸光度值,计算其活性。活性。1、试剂配制试剂配制1份份4N 氢氧化钠和氢氧化钠和9份蒸馏水混合均匀,即可使用份蒸馏水混合均匀,即可使用操作混合混合37水浴水浴30分钟,然后各管加显色剂分钟,然后各管加显色剂250 L, 37水浴水浴20分钟取出,各管加稀释氢氧化钠分钟取出,各管加稀释氢氧化钠2.5ml,室温放置室温放置3分钟上机测定
4、分钟上机测定.标准值:100U/L波长510纳米,试剂空白调零,按公式计算结果.参考范围:6-40U/L样本要求:最适样本为当日空腹采集的无溶血、无乳糜的血清或血浆及时测定。 二、血清总蛋白测定(双缩脲法)加 入 物(mL) 测定管(U) 标准管(S) 空白管(B) 待 测 血 清 0.1 - - 蛋白标准液 - 0.1 - 蒸馏水 - - 0.1 双缩脲试剂 4.0 4.0 4.0 混匀,置 3710min(2530min).以”B”管校”0”, =540nm 比色,读取吸光度 A 值计 三、血清清蛋白测定(三、血清清蛋白测定(BCG 法)法) 操作步骤操作步骤: 加 入 物(mL) 测定管
5、(U) 标准管(S) 空白管(B) 待测血清 0.02 - - 清蛋白标准液(40g/L) - 0.02 - 蒸馏水 - - 0.02 BCG 试剂 4.0 4.0 4.0 充分混匀,置温室 10min,,以 B 管校(0),=630nm 比色,读取吸光度 A 值计算. 四、总胆红素测定(T-BIL)实验原理对氨基苯磺酸对氨基苯磺酸 亚硝酸钠亚硝酸钠 氯化重氮苯磺酸氯化重氮苯磺酸 NaCl 2H2O 胆红素胆红素 氯化重氮苯磺酸氯化重氮苯磺酸 紫红色的偶氮化合物紫红色的偶氮化合物 加速剂为二甲基亚砜,使游离的胆红素分子内的次级键断加速剂为二甲基亚砜,使游离的胆红素分子内的次级键断裂,极性上升,
6、与重氮试剂反应。裂,极性上升,与重氮试剂反应。 =578nm实验1、样本要求:最适样本为当日空腹采集的无溶血、无乳糜的血清或血浆,避光保存,及时测定。2、工作试剂的配制:取R1 10ml和R2 0.2ml混合均匀即为工作试剂.实验测定3、按下表操作:加入物(ml) U S B血清 0.1 标准液 直接吸入* 工作液 1.5 - 1.5 混匀,置37 水浴6min,比色(=578nm)读取各管A值。直接吸入*:吸入的量即为半自动生化分析仪设定的吸入量,在分光光度计测定时则为此反应的总体积量。计算结果与临床意义计计 算:算: 血清总胆(mol/l)=AU/AS20结果报告:结果报告:略实验参考值:实验参考值: 218mol/l临床意义:临床意义: 血清胆红素测定对诊断黄疸和黄疸的鉴别诊断有非常重要的意义。临床意义 1. 帮助了解肝细胞有无实质性损害及损害的程
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