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文档简介

1、会计学1母液的配制母液的配制培养基类型:培养基类型:MS培养基培养基、B5培养基、培养基、N6培养基培养基 MS培养基是由培养基是由Marashige和和Skoog为培养烟草组为培养烟草组织而设计的,是应用最为广泛的培养基。织而设计的,是应用最为广泛的培养基。 根据培养材料的种类、有针对性地选择根据培养材料的种类、有针对性地选择适宜的培养基,没有任何一种培养基可适合适宜的培养基,没有任何一种培养基可适合所有情况下的组织培养。所有情况下的组织培养。第1页/共23页 培养基制备是植物组织培养的基本工作。培养基含培养基制备是植物组织培养的基本工作。培养基含有很多化学成分,而且数量多少不等,性质各有差

2、异有很多化学成分,而且数量多少不等,性质各有差异。 特别是微量元素、维生素等微量成分,因用量少,不仅特别是微量元素、维生素等微量成分,因用量少,不仅称量麻烦,还容易出现误差,称量麻烦,还容易出现误差,所以配制母液是科学和方便所以配制母液是科学和方便的方法。的方法。使用母液不但可以保证培养基个物质成分的准确使用母液不但可以保证培养基个物质成分的准确性及配制的方便性,且便于低温保藏,从而提高工作效率。性及配制的方便性,且便于低温保藏,从而提高工作效率。第2页/共23页第3页/共23页 熟悉MS培养基的组成,掌握贮备液(母液)的配制方法。第4页/共23页二、实验原理:二、实验原理: 配制培养基时,为

3、了使用方便和用量准确,通配制培养基时,为了使用方便和用量准确,通常采用母液法进行配制,即将所选培养基配方中各常采用母液法进行配制,即将所选培养基配方中各试剂的用量,扩大若干倍后再准确称量,分别先配试剂的用量,扩大若干倍后再准确称量,分别先配制成一系列的母液置于冰箱中保存,使用时按比例制成一系列的母液置于冰箱中保存,使用时按比例吸取母液进行稀释配制即可。吸取母液进行稀释配制即可。 以以MS培养基为例,所需配制的母液可分为:培养基为例,所需配制的母液可分为:MS大量元素母液、大量元素母液、MS微量元素母液、微量元素母液、MS铁盐母铁盐母液和液和MS有机化合物母液等。另外,还要配制生长有机化合物母液

4、等。另外,还要配制生长物质母液,在不同类型的培养基中使用。物质母液,在不同类型的培养基中使用。第5页/共23页三、实验器具与药品三、实验器具与药品 电子分析天平、托盘天平、烧杯(电子分析天平、托盘天平、烧杯(50ml, 100ml, 500ml, 1000ml)、量筒()、量筒(1000ml,100ml, 25ml)、)、容量瓶(容量瓶(1000ml,500ml,100ml)、药勺、称量纸、)、药勺、称量纸、玻璃棒、滴管、电炉、冰箱。玻璃棒、滴管、电炉、冰箱。第6页/共23页按照扩大按照扩大倍数称量倍数称量 母液分装母液分装确定培养确定培养基基 溶溶 解解 定定 容容 贴标签贴标签保存于冰保存

5、于冰箱箱 按顺序混合按顺序混合第7页/共23页五、实验方法及步骤五、实验方法及步骤1.大量元素母液的配制大量元素母液的配制 即含即含N、P、K、Ca、Mg、S六种元素的混合溶液六种元素的混合溶液,一般配成浓度为,一般配成浓度为10倍或倍或20倍的母液。倍的母液。药品名称规定用量mg /L 扩大倍数称取量mg 母液定容体积 ml KNO3190010190001000 NH4NO316501016500MgSO47H2O370103700KH2PO4170101700CaCl22H2O440104400第8页/共23页第9页/共23页 (3)CaCl22H2O要在最后单独加入(因为氯化钙易与磷要

6、在最后单独加入(因为氯化钙易与磷 酸二氢钾形成磷酸三钙、磷酸钙之类不溶于水的沉淀)。酸二氢钾形成磷酸三钙、磷酸钙之类不溶于水的沉淀)。(4)然后,倒入细口磨砂试剂瓶中,贴上标签,注明配制)然后,倒入细口磨砂试剂瓶中,贴上标签,注明配制 日期、扩大倍数、配制人姓名、置于日期、扩大倍数、配制人姓名、置于4冰箱保存备用。冰箱保存备用。第10页/共23页第11页/共23页药品名称规定用量ml/L 扩大倍数称取量mg 母液定容体积 ml MnSO44H2O22.31000 223001000 ZnSO47H2O8.61000 8600H3BO36.21000 6200KI0.83 1000 830Na2

7、MoO42H2O 0.251000 250CuSO45H2O 0.0251000 25CoCl26H2O0.0251000 252、微量元素母液的配制、微量元素母液的配制第12页/共23页第13页/共23页药品名称规定用量mg /L 扩大倍数称取量mg 母液定容体积 ml FeSO4.7H2O 27.8 100 1390500 Na2-EDTA37.310018653、MS铁盐母液的配制铁盐母液的配制铁盐母液的配制方法是:铁盐母液的配制方法是: 用电子天平称取硫酸亚(用电子天平称取硫酸亚(FeSO4.7H2O)和乙二胺四乙酸)和乙二胺四乙酸二钠(二钠(Na2-EDTA),分别用蒸馏水加热溶解,

8、煮沸,使之),分别用蒸馏水加热溶解,煮沸,使之全部溶解,溶解后混合后继续煮沸几分钟(全部溶解,溶解后混合后继续煮沸几分钟(约加热约加热5min5min至溶至溶液呈金黄色液呈金黄色) ),冷却后定容至冷却后定容至500ml的容量瓶中,倒入棕色的容量瓶中,倒入棕色磨口试剂瓶中,经室温放置一段时间令其充分反应后,贴上磨口试剂瓶中,经室温放置一段时间令其充分反应后,贴上标签,注明配制日期、扩大倍数、配制人姓名、置于标签,注明配制日期、扩大倍数、配制人姓名、置于4冰冰箱保存备用。箱保存备用。第14页/共23页第15页/共23页第16页/共23页药品名称规定用量mg/L 扩大倍数称取量mg 母液定容体积

9、ml 烟酸(维生素烟酸(维生素B5) 5100 50100盐酸吡哆醇盐酸吡哆醇(维生素维生素B6) 510050盐酸硫胺素盐酸硫胺素(维生素维生素B1)5100 50甘氨酸甘氨酸20100 200(1)维生素母液的配制)维生素母液的配制 按培养基配方用量的按培养基配方用量的100倍,用电子分析天倍,用电子分析天平分别称取后放入平分别称取后放入l烧杯中,加蒸馏水直接溶解烧杯中,加蒸馏水直接溶解,然后混合定容于,然后混合定容于100ml容量瓶中,转移到储液容量瓶中,转移到储液瓶中保存于瓶中保存于4冰箱。冰箱。第17页/共23页药品名称规定用量ml/L 扩大倍数称取量mg 母液定容体积 ml 肌醇肌醇100100 1000100(2)肌醇母液的配制)肌醇母液的配制 按培养基配方用量的按培养基配方用量的100倍,用电子分析天倍,用电子分析天平分别称取后放入平分别称取后放入l烧杯中,加蒸馏水直接溶解烧杯中,加蒸馏水直

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