还原糖的鉴定

1、会计学1还原糖的鉴定还原糖的鉴定第1页/共35页第2页/共35页第3页/共35页斐林试剂可以检验生物组织中可溶性的还原糖存在与否斐林试剂可以检验生物组织中可溶性的还原糖存在与否实验原理：实验原理： 某些化学试剂能够使生物组织中某些化学试剂能够使生物组织中的有关化合物产生特定的的有关化合物产生特定的颜色反应颜色反应。第4页/共35页 还原糖的鉴定原理还原糖还原糖+ +斐林试剂斐林试剂砖红色沉淀砖红色沉淀斐林试剂斐林试剂(现配现用现配现用) 甲液：甲液：0.1g/ml的的NaOH溶液，溶液， 乙液：乙液：0.05g/ml的的CuSO4溶液溶液 第5页/共35页如果植物组织中积累的成分是淀粉如果植物

2、组织中积累的成分是淀粉和蔗糖，那就无法检测到还原性糖和蔗糖，那就无法检测到还原性糖。有些植物尽管含有较多的还原性。有些植物尽管含有较多的还原性糖，但如果本身含有叶绿素或其他糖，但如果本身含有叶绿素或其他色素，这些色素就会影响实验现象色素，这些色素就会影响实验现象起到遮盖作用。这些都不适宜做实起到遮盖作用。这些都不适宜做实验材料。验材料。苹果和梨是比苹果和梨是比较理想的实验较理想的实验材料。材料。第6页/共35页苹果、研钵、小刀苹果、研钵、小刀斐林试剂斐林试剂A液、斐林试剂液、斐林试剂B液、二氧化硅液、二氧化硅量筒、试管架、吸管、试量筒、试管架、吸管、试管夹、试管、滴管管夹、试管、滴管漏斗、纱布

3、漏斗、纱布火柴、酒精灯、三脚架、火柴、酒精灯、三脚架、石棉网、烧杯石棉网、烧杯第7页/共35页取一个洗净的苹果切下一块，去皮取一个洗净的苹果切下一块，去皮，然后切成小块，取一部分切成小，然后切成小块，取一部分切成小块的苹果放在研钵中，加入少许二块的苹果放在研钵中，加入少许二氧化硅（石英砂），然后研磨，将氧化硅（石英砂），然后研磨，将研钵中加入少量水继续研磨。研钵中加入少量水继续研磨。将玻璃漏斗插入试管中，在漏斗将玻璃漏斗插入试管中，在漏斗上垫一层纱布，将组织研磨液进上垫一层纱布，将组织研磨液进行过滤，得到苹果的组织样液。行过滤，得到苹果的组织样液。用量筒取两毫升组织样液，用量筒取两毫升组织样液

4、，再用量筒取两毫升新配制好再用量筒取两毫升新配制好的斐林试剂。的斐林试剂。第8页/共35页取一只试管，将量好的苹果组织取一只试管，将量好的苹果组织样液倒入试管中，然后将量好的样液倒入试管中，然后将量好的斐林试剂倒入试管中，震荡试管斐林试剂倒入试管中，震荡试管使溶液混合均匀，我们可以看到使溶液混合均匀，我们可以看到此时溶液呈蓝色。此时溶液呈蓝色。将这只试管放入盛有开水将这只试管放入盛有开水的大烧杯中，用酒精灯加的大烧杯中，用酒精灯加热煮沸。热煮沸。溶液的颜色开始是蓝色溶液的颜色开始是蓝色，然后慢慢变成砖红色，然后慢慢变成砖红色。第9页/共35页这个实验就证这个实验就证明了，苹果中明了，苹果中含有

5、还原性糖含有还原性糖的存在。的存在。溶液的颜色从蓝色变成砖红色。溶液的颜色从蓝色变成砖红色。苹果中含有还原性的糖。苹果中含有还原性的糖。第10页/共35页 第11页/共35页芝麻，脂肪含量丰富，但种子颗粒芝麻，脂肪含量丰富，但种子颗粒太小，不利于切片制作。太小，不利于切片制作。玉米，脂肪含量较少，种子颗粒也玉米，脂肪含量较少，种子颗粒也较小，因此也不适合做实验材料。较小，因此也不适合做实验材料。花生是比较理花生是比较理想的实验材料想的实验材料我们选用花生我们选用花生第12页/共35页显微镜、镊子、毛显微镜、镊子、毛笔、吸水纸、刀片笔、吸水纸、刀片、载玻片、盖玻片、载玻片、盖玻片、培养皿、培养皿

6、50% %的酒精的酒精、苏、苏丹丹、清水、清水第13页/共35页取一粒浸泡过的花生种子，去皮，分开两取一粒浸泡过的花生种子，去皮，分开两片子叶，将子叶切成薄片，然后用毛笔将片子叶，将子叶切成薄片，然后用毛笔将这些材料放入盛有清水的培养皿中。这些材料放入盛有清水的培养皿中。取一片载玻片，用纱布擦净，用毛取一片载玻片，用纱布擦净，用毛笔取一片最薄的材料，放在载玻片笔取一片最薄的材料，放在载玻片中央。中央。用滴管在花生种子薄片上滴几滴苏丹用滴管在花生种子薄片上滴几滴苏丹染液，染色染液，染色2至至3分钟，用吸水纸吸去花分钟，用吸水纸吸去花生种子薄片周围的染液。生种子薄片周围的染液。在薄片上滴在薄片上滴

7、1至至2滴体积分数为滴体积分数为50%的酒精，洗去附色，用吸水的酒精，洗去附色，用吸水纸洗去花生子叶周围的酒精。纸洗去花生子叶周围的酒精。第14页/共35页在薄片上滴一滴清水，盖上在薄片上滴一滴清水，盖上盖玻片，制成临时装片。盖玻片，制成临时装片。在低倍镜下寻找花生种子薄在低倍镜下寻找花生种子薄片的最薄处，将这部分移至片的最薄处，将这部分移至视野中央。视野中央。用显微镜观察花生种子用显微镜观察花生种子薄片。薄片。我们可以看到细胞中一个个我们可以看到细胞中一个个圆形的小颗粒，这就是脂肪圆形的小颗粒，这就是脂肪颗粒。颗粒。低倍镜下观察低倍镜下观察高倍镜下观察高倍镜下观察第15页/共35页显微镜下观

8、察到橘黄色的颗粒显微镜下观察到橘黄色的颗粒。花生种子细胞中含有脂肪花生种子细胞中含有脂肪。第16页/共35页第17页/共35页蛋白质蛋白质+双缩脲试剂双缩脲试剂紫色络合物紫色络合物豆浆、蛋清、牛奶都是很豆浆、蛋清、牛奶都是很好的实验材料。好的实验材料。本实验我们用蛋清做实验材料，在本实验我们用蛋清做实验材料，在用蛋清做实验材料时，要注意将蛋用蛋清做实验材料时，要注意将蛋清稀释，如果稀释不够，反应后的清稀释，如果稀释不够，反应后的产物会粘固在试管内壁上，使反应产物会粘固在试管内壁上，使反应不容易彻底。不容易彻底。双缩脲试剂双缩脲试剂A液：液：0.1g/ml NaOHB液：液：0.01g/mlCu

9、SO4先加A，再加B。第18页/共35页试管架、试管、吸管试管架、试管、吸管蛋清稀释液蛋清稀释液双缩脲试剂双缩脲试剂A液、液、双缩脲试剂双缩脲试剂B液、液、量筒量筒第19页/共35页用量筒量取两毫升的蛋清稀用量筒量取两毫升的蛋清稀释液，倒入试管内。释液，倒入试管内。向试管内注入双缩脲试剂向试管内注入双缩脲试剂A液液1ml，摇匀。，摇匀。再向试管中加入再向试管中加入4滴双缩脲滴双缩脲试剂试剂B液，摇匀。液，摇匀。第20页/共35页震荡均匀，此时可见试管内震荡均匀，此时可见试管内溶液呈紫色吗，这就表明蛋溶液呈紫色吗，这就表明蛋清液中含有蛋白质。清液中含有蛋白质。蛋清液呈紫色。蛋清液呈紫色。蛋清液中

10、含有蛋白质。蛋清液中含有蛋白质。第21页/共35页1 1、在鉴定可溶性还原糖的实验中，加入斐林试剂时必须、在鉴定可溶性还原糖的实验中，加入斐林试剂时必须要（要（ ）A A先加入斐林试剂甲液，后加入乙液先加入斐林试剂甲液，后加入乙液B B先加入斐林试剂乙液，后加入甲液先加入斐林试剂乙液，后加入甲液C C将斐林试剂的甲液和乙液混合均匀后再加将斐林试剂的甲液和乙液混合均匀后再加D D以上以上A A、B B、C C三种操作方法都正确三种操作方法都正确2 2、鉴定蛋白质样品时加双缩脲试剂的正确做法是、鉴定蛋白质样品时加双缩脲试剂的正确做法是（ ）A A先加先加A A液，混合后再加液，混合后再加B B液摇

11、匀观察液摇匀观察B B先加先加B B液，混合后再加液，混合后再加A A液摇匀观察液摇匀观察C CA A、B B液混合后加入，摇匀后观察液混合后加入，摇匀后观察D DA A、B B液同时加入样液，摇匀后观察液同时加入样液，摇匀后观察CA第22页/共35页 淀粉淀粉 + 碘碘蓝色蓝色第23页/共35页第24页/共35页斐林试剂斐林试剂 双缩脲试剂双缩脲试剂 甲液甲液乙液乙液A A液液B B液液成分成分 鉴定物质鉴定物质 添加顺序方添加顺序方法法 反应条件反应条件 反应现象反应现象 比较斐林试剂和双缩脲试剂比较斐林试剂和双缩脲试剂0.1g/mL0.1g/mL的的NaOHNaOH溶液溶液0.1g/mL

12、0.1g/mL的的NaOHNaOH溶液溶液0.01g0.01g/mL/mL的的CuSOCuSO4 4溶液溶液0.05g0.05g/mL/mL的的CuSOCuSO4 4溶液溶液还原性糖蛋白质甲液和乙液等量混合均匀甲液和乙液等量混合均匀后再加入后再加入加双缩脲试剂加双缩脲试剂A A液液1mL1mL，摇匀，摇匀再加双缩脲试剂再加双缩脲试剂B B液液4 4滴滴50-6550-65水浴加热水浴加热砖红色砖红色紫色紫色不需加热，摇匀即可不需加热，摇匀即可第25页/共35页需鉴定的有机物需鉴定的有机物用于鉴定的试剂用于鉴定的试剂反应产生的颜色反应产生的颜色还原糖还原糖斐林试剂砖红色沉淀蛋白质蛋白质双缩脲试剂

13、紫 色淀淀 粉粉碘 液蓝 色脂脂 肪肪苏丹染液苏丹染液橘黄色红 色第26页/共35页1.1.可用于鉴定生物组织中可溶性还原糖的试剂（可用于鉴定生物组织中可溶性还原糖的试剂（ ）A A斐林试剂斐林试剂 B B双缩脲试剂双缩脲试剂 C C苏丹苏丹染液染液 D D苏丹苏丹染液染液2.2.下列糖中能与斐林试剂反应产生砖红色沉淀的是下列糖中能与斐林试剂反应产生砖红色沉淀的是A A淀粉淀粉B B果糖果糖C C蔗糖蔗糖D D纤维素纤维素3.3.下列哪个实验用到显微镜（下列哪个实验用到显微镜（ ）A A可溶性还原糖的鉴定可溶性还原糖的鉴定 B B蛋白质的鉴定蛋白质的鉴定C C脂肪的鉴定脂肪的鉴定 D D淀粉的

14、鉴定淀粉的鉴定ACB第27页/共35页4.4.用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时，溶液颜色的变化用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时，溶液颜色的变化过程为（过程为（ ）A A无色一砖红色（沉淀）无色一砖红色（沉淀）B B浅蓝色一砖红色（沉淀）浅蓝色一砖红色（沉淀）C C浅蓝色一蓝色一砖红色（沉淀）浅蓝色一蓝色一砖红色（沉淀）D D浅蓝色一棕色一砖红色（沉淀）浅蓝色一棕色一砖红色（沉淀）5.5.下列物质中，能被苏丹下列物质中，能被苏丹IVIV染液染成红色的是（染液染成红色的是（ ）A A马铃薯块茎马铃薯块茎 B B浸软的蓖麻种子浸软的蓖麻种子C C蛋清液蛋清液 D D苹果苹果DB第28页/共35页检测生物组织

15、中的糖类、脂肪和蛋白质1.还原性糖的鉴定：还原性糖还原性糖的鉴定：还原性糖+斐林试剂斐林试剂 砖红色沉淀砖红色沉淀2.脂肪的鉴定：脂肪的鉴定： 苏丹苏丹 橘黄色橘黄色 脂肪脂肪+ 苏丹苏丹红红 色色3.蛋白质的鉴定：蛋白质蛋白质的鉴定：蛋白质+双缩脲试剂双缩脲试剂 紫色紫色第29页/共35页作业布置与名师对话： 随堂训练5、6 课时作业三第30页/共35页第31页/共35页斐林试剂可以检验生物组织中可溶性的还原糖存在与否斐林试剂可以检验生物组织中可溶性的还原糖存在与否实验原理：实验原理： 某些化学试剂能够使生物组织中某些化学试剂能够使生物组织中的有关化合物产生特定的的有关化合物产生特定的颜色反应颜色反应。第32页/共35页取一只试管，将量好的苹果组织取一只试管，将量好的苹果组织样液倒入试管中，然后将量好的样液倒入试管中，然后将量好的斐林试剂倒入试管中，震荡试管斐林试剂倒入试管中，震荡试管使溶液混合均匀，我们可以看到使溶液混合均匀，我们可以看到此时溶液呈蓝色。此时溶液呈蓝色。将这只试管放入盛有开水将这只试管放入盛有开水的大烧杯中，用酒精灯加的大烧杯中，用酒精灯加热煮沸