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文档简介
1、生菜中色素提取分离和含量测定实验目的实验目的实验器材实验器材实验材料及仪器药品1.层析液配方:石油醚20ml +丙酮2ml +苯1ml2.天平 研钵 烧杯 量筒 滤纸 表面皿 剪刀 95%乙醇 漏斗 滴管 尼龙布 毛细管 1.学会叶绿素的提取分离和含量的测定2.了解叶绿素的性质实验原理实验原理 绿叶中的叶绿体含有叶绿素,叶绿素可以溶于有机溶剂乙醇,丙酮等,所以可将色素提取出来,纸层析法是分离色素最简单的方法,他的原理是利用混合色素各个物理,化学性质的差别,以不同的程度分布于固定相和流动相中。由于他们的移动速度不同,从而达到移动的目的。实验步骤实验步骤1.称取2g的新鲜生菜绿叶,剪碎,放在研钵中
2、,加5ml乙醇,加入少许的石英砂一起研磨成浆,用尼龙布过滤后,该滤液即为叶绿素提取液。2.取一块预先干燥处理过的定性滤纸,将它剪成长约10cm,宽约1cm的滤纸条。将滤纸条的一段剪去两角,在此端距顶端1cm处用铅笔画一条细线,线要直,要匀,要细。3.画滤液细线 用毛细管取少量滤液,沿铅笔线均匀画细线。滤液干后,重复划线一两次。4.分离光和色素,向烧杯中倒入3ml层析液,将滤纸条尖端朝下,斜靠内壁,插入层析液,盖上表面皿5.仅过几分钟后,观察色素带的情况,最上层的是胡萝卜素,其次是叶黄素,再次是叶绿素a,最后是叶绿素b 注意事项注意事项1.画铅笔线时,线要细 直 匀 2.分离光合色素时,滤液细线
3、不要浸入液面以下,接触到层析液,这是因为色素极易溶解在层析液中,导致色带不清晰,影响实验效果。3.分离光合色素时,要加盖,减少有机溶剂的挥发。4.丙酮有毒性,在使用时,要远离。 1.取5g干净的生菜叶,沸水2min,捞出来,冷却。 2.将冷却后的生菜叶放在研钵中捣碎,加入等体积的 95%的乙醇,搅拌浸取30min ,过滤,滤渣按照上法再用95%的乙醇浸取3 次,合并4次的浸提液,加入等体积 的石油醚,萃取10min,静置,充分分层,分出醚相,下层醇相再用石油醚照上层萃取2次,合并3次石油醚萃取液,依次用60%,70%,80%的乙醇醇各洗涤一次最后用离子水洗涤三次。 3.水浴加热石油醚,使石油醚挥发,得到叶绿素固体 4.叶绿素质量=装有叶绿素固体的烧杯的质量-空烧杯的质量 叶绿素含量的测定实验步骤叶绿素含量的测定实验步骤实验分析及结果实验分析及结果绿叶质量:5g 叶绿素干物质的质量:0.985g叶绿素的得率:0.985/5=0.197=19.7% 同比其他方法,这种叶绿素含量测定方法比较方便、准确、速度快、可以用来成为食用色素谢谢观赏2013年6月3日此课件下载可自行编辑修改,仅供
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