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文档简介
1、X染色质标本制备与察看染色质标本制备与察看目的要求目的要求1掌握X染色质标本制备方法及其原理。2掌握X染色质的形状特征及其临床意义。实验原理实验原理 一个个体不论其细胞中有几条X染色体,均只需一条具有转录活性,其他的X染色体均失活构成异固缩的X染色质。正常女性间期细胞核中X染色质阳性率普通约为10一30,有的可高达50以上。其出现率的高低与个体不同生理形状、染色方法、染色技术以及X染色体在细胞核中的位置不同有关。在男性间期细胞核中那么平均低于1。普通检查X染色质确定性别时,察看200个细胞,X染色质出现5以上者为女性。如今,X染色质检查已广泛运用于临床,作为性别测定和性染色体数目异常的一种辅助
2、诊断方法。实验用品实验用品 (1)器材:显微镜、载玻片、牙签。 (2)试剂 :0.2甲苯胺蓝染液 、5mol/L HCl溶液 、95乙醇、pH 6. PBS (3)资料:人口腔黏膜上皮细胞。方法与步骤方法与步骤(1)取材制片:先让受检者用水漱口数次,然后用牙签钝头部刮取口腔下唇内侧面,弃去第一次刮到的细胞,在同一部位连刮几次,将刮取物均匀涂在干净的载玻片上晾干。(2)固定:用95%乙醇固定30分钟.(3)水解:玻片标本置于5mol/L HCl中,室温水解20 min。用新颖蒸馏水冲洗四次,充分洗去残留的HCl。(4)染色:0.2甲苯胺蓝染液染色510min。(5)镜检:自来水漂洗,空气枯燥后油镜下察看。察看与结果察看与结果 高倍镜下可见许多染成蓝色的细胞核,细胞质不着色或不明显。选择核较大,染色明晰,轮廓完好,核质呈均匀细网状的细胞进展察看。找到核膜内侧缘有蓝色浓染小体的细胞核后,换油镜进一步察看。油镜下X染色质为蓝色平凸形、三角形、扁平形的浓染小体。 本卷须知本卷须知 (1)取材前要漱口,以免口腔中的杂质影响察看效果。 (2)HCl水解要充分,使X染色质易于显现。 (3)临床检查时要选择形状好的细胞察看,计算100个细胞中X染色质出现的频率。作业作业 绘制X染
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