病原性球鉴定ppt课件

1、总目录下页退出病原性球菌鉴定病原性球菌鉴定u南华大学预防医学与放射卫生实验教学中心总目录上页退出下页返回退出u教学对象：高等医学院校卫生检验专业学生u实验课时：6学时u课程类型：专业实验课u课程要求：必修u每组人数：2人总目录上页退出下页返回退出实验目的实验目的 掌握葡萄球菌属的分离培养与鉴定方法掌握葡萄球菌属的分离培养与鉴定方法 、菌落特点、菌落特点、菌体形态及染色性菌体形态及染色性 掌握链球菌属的分离培养与鉴定方法掌握链球菌属的分离培养与鉴定方法 、菌落特点、菌、菌落特点、菌体形态及染色性体形态及染色性总目录上页退出下页返回退出实验器材和试剂实验器材和试剂u显微镜显微镜u恒温培养箱恒温培养

2、箱u菌种菌种u金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌u表皮葡萄球菌葡萄球菌表皮葡萄球菌葡萄球菌u超净工作台超净工作台 总目录上页退出下页返回退出一、葡萄球菌属的鉴定一、葡萄球菌属的鉴定u形态观察形态观察u取金黄色葡葡球菌与表皮葡萄球菌做革兰氏染色后取金黄色葡葡球菌与表皮葡萄球菌做革兰氏染色后置显微镜下观察细菌染色性、大小、形态、排列置显微镜下观察细菌染色性、大小、形态、排列u结果：可见革兰氏阳性葡萄状排列的球菌结果：可见革兰氏阳性葡萄状排列的球菌u菌落观察菌落观察 u取金黄色葡葡球菌与表皮葡萄球菌接种血平板，取金黄色葡葡球菌与表皮葡萄球菌接种血平板，37C培养培养1824h，观察其菌落大小、形态、色素及

3、，观察其菌落大小、形态、色素及溶血现象溶血现象总目录上页退出下页返回退出葡萄球菌革兰染色葡萄球菌革兰染色10001000）总目录上页退出下页返回退出葡萄球菌的普通平板菌落照片葡萄球菌的普通平板菌落照片总目录上页退出下页返回退出金黄色葡萄球菌血平板菌落照片金黄色葡萄球菌血平板菌落照片宽大透明溶血环宽大透明溶血环溶血）溶血）总目录上页退出下页返回退出一、葡萄球菌属的鉴定一、葡萄球菌属的鉴定u生化反应生化反应 u触酶试验触酶试验u原理：葡萄球菌产生的触酶，能将对细菌有害的原理：葡萄球菌产生的触酶，能将对细菌有害的H2O2分解成无害的水和氧气分解成无害的水和氧气 u方法：用接种环挑取普通琼脂平板上的葡

4、萄球菌，方法：用接种环挑取普通琼脂平板上的葡萄球菌，置于洁净玻片上，滴加置于洁净玻片上，滴加3% H2O2溶液溶液1-2滴，观察结滴，观察结果果u结果：半分钟内产生大量气泡为阳性，不产生气泡结果：半分钟内产生大量气泡为阳性，不产生气泡为阴性为阴性总目录上页退出下页返回退出u生化反应生化反应u血浆凝固酶试验血浆凝固酶试验 u原理：金葡菌能产生血浆凝固酶，可使血浆中可溶性原理：金葡菌能产生血浆凝固酶，可使血浆中可溶性纤维蛋白变为不溶性纤维蛋白，附着于细菌表面，在纤维蛋白变为不溶性纤维蛋白，附着于细菌表面，在玻片上形成凝块；游离型的血浆凝固酶则可使试管中玻片上形成凝块；游离型的血浆凝固酶则可使试管中

5、血浆发生凝固血浆发生凝固u玻片法：取未稀释的新鲜兔血浆和生理盐水各玻片法：取未稀释的新鲜兔血浆和生理盐水各1滴分滴分别滴加于载玻片上，挑取待检葡萄球菌菌落少许，分别滴加于载玻片上，挑取待检葡萄球菌菌落少许，分别与生理盐水和血浆混合，立即观察结果，此法测结别与生理盐水和血浆混合，立即观察结果，此法测结合型凝固酶。合型凝固酶。u试管法：取试管法：取3支支1010mm试管，各加入试管，各加入0.5ml 1:4稀稀释的新鲜兔血浆，在其中释的新鲜兔血浆，在其中1支试管中加支试管中加3-5个待检菌落，个待检菌落，充分研磨混匀，另充分研磨混匀，另2支试管中分别加凝固酶阳性株和支试管中分别加凝固酶阳性株和阴性

6、株作对照，阴性株作对照，37C水浴水浴3-4h，观察结果。此法用于，观察结果。此法用于测定游离型凝固酶。测定游离型凝固酶。一、葡萄球菌属的鉴定一、葡萄球菌属的鉴定总目录上页退出下页返回退出u生化反应生化反应u甘露醇发酵试验甘露醇发酵试验 u原理：致病性葡萄球菌多能发酵甘露醇产酸，使培养原理：致病性葡萄球菌多能发酵甘露醇产酸，使培养基由紫色变为黄色。基由紫色变为黄色。u方法：将三种葡萄球菌分别接种于甘露醇发酵管，方法：将三种葡萄球菌分别接种于甘露醇发酵管，35C，24h观察结果：培养基呈混浊，由紫色变为黄观察结果：培养基呈混浊，由紫色变为黄色为阳性，仍为紫色者为阴性色为阳性，仍为紫色者为阴性 一

7、、葡萄球菌属的鉴定一、葡萄球菌属的鉴定总目录上页退出下页返回退出二、链球菌属的鉴定二、链球菌属的鉴定u形态学观察形态学观察u甲、乙、丙溶血链球菌分别做革兰氏染色，观察其形甲、乙、丙溶血链球菌分别做革兰氏染色，观察其形态与排列态与排列 u菌落观察菌落观察u链球菌在血琼脂平板上生长后出现灰白色、圆形凸起、链球菌在血琼脂平板上生长后出现灰白色、圆形凸起、表面光滑、边缘整齐的针尖大小的菌落，周围可出现表面光滑、边缘整齐的针尖大小的菌落，周围可出现不同的溶血情况；不同的溶血情况；u甲链出现草绿色溶血环甲链出现草绿色溶血环溶血，不完成溶血），乙溶血，不完成溶血），乙链出现透明的溶血环链出现透明的溶血环溶血，完成溶血），丙链无溶血，完成溶血），丙链无溶血环溶血环总目录上页退出下页返回退出链球菌形态观察链球菌形态观察总目录上页退出下页返回退出总目录上页退出下页返回退出本卷须知本卷须知 对血浆凝固酶试