微生物学检验复习题

1、微生物学检验复习题供2021级医学检验本科名词解释：凝固酶：金黄色葡萄球菌可产生游离凝固酶和结合凝固酶两种,前者分泌至菌体外,被血浆中的协同因子激活为凝血酶,使纤维蛋白原变为纤维蛋白,导致血浆凝固.后者结合于菌体外表不释放,能与纤维蛋白 原结合,使纤维蛋白原变为纤维蛋白而引起细菌凝聚,故又称为凝聚因子.Vi抗原：伤寒、希氏沙门菌的外表抗原,是覆盖在LPS外的荚膜多糖抗原.抗吞噬、抗体、补体,与毒力有关.能阻止O抗原与相应抗体凝集,可进行噬菌体分型.肥达试验：用伤寒、副伤寒沙门菌的 O、H抗原,检测受检血清中有无相应的抗体的半定量凝集试验, 称为肥大反响.卫星现象：当流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌

2、一起培养时,可见到靠近葡萄球菌菌落的流感嗜血杆菌菌落 较大,而远离葡萄球菌的流感嗜血杆菌菌落较小,这种现象称为卫星现象.抗O试验：抗链球菌溶素O抗体检测,是一种体外毒素抗毒素中和试验.抗溶血素O抗体ASO可中和溶血素O的活性,常用于风湿热的辅助诊断,活动性风湿热患者抗体效价一般超过400个单位.MRSA: 1ug苯座西林纸片的抑菌圈直径 <10m减其MIC>4ug/ml的金黄色片葡萄球菌称为 MRSA.X1ug的苯座西林抑菌圈<10mr?t其MIC>0.5ug/ml的凝固酶阴性葡萄球菌称 MRCNS.统称为耐甲氧西林葡萄球菌 MRS.HLARE氨基糖昔类高水平耐药,D试

3、验：克林霉素诱导耐药试验,外-裴反响：变形杆菌属中的某些特殊菌株如X19 X2、XK的菌体抗原与某些立克次体有共同抗原,能出现交叉凝集,临床上用这些变形杆菌代替立克次体与患者血清做凝集反响,可作为立克次体病的辅助诊断 试验,称为外-裴反响Weil-Felix reaction .迁徙生长现象：奇异变形杆菌和普通变形杆菌的大多数菌株在普通琼脂平板上可蔓延成菌接种部位为中央 的厚薄交替的波纹状薄膜布满整个培养基外表的现象,称为迁徙生长现象神奈川试验：副溶血性弧菌在普通血平板含羊、兔或马等血液上不溶血或只产生纺溶血；但在在特定条件下,副溶血性弧菌中某些菌株在含高盐 70g/LNacl的人O型血或兔血

4、及以 D-甘露醇为炭源的我妻 Wagatsuma血琼脂平板上可产生 0溶血,该现象作为鉴定致病性与非致病性菌株的一项重要指标结核菌素试验：结核菌素是结核杆菌的菌体成分,有两种,旧结核菌素OT和纯蛋白衍生物PPD,取5U 0.1ug PPD或OT 0.1mL注射于前臂掌侧皮下,注射后 4872小时后观察,以是否出现红肿、硬 结,以及其大小判断结果.卡介苗：有毒力的牛型结核分支杆菌在含甘油、马铃薯和胆汁的培养基中经 13年230次传代而获得的减毒变异株.抗酸杆菌：分支杆菌属中大多数细菌,菌体内含有分支菌酸,具有抗酸性,一般不易着色,能对抗3%盐酸酒精的脱色作用,这类细菌又称为抗酸杆菌有菌免疫：是指

5、细菌进入机体后对细菌再次入侵有免疫力,而当细菌或其成分从体内彻底消失后机体的免疫力也随之消失.细菌外膜：革兰阴性菌的特有成分,有脂质双层、脂蛋白、脂多糖三局部组成,作为保护屏障可阻止或减 缓胆汁盐、抗体及其他可能杀死或损害细菌的有毒物质的进入,也可阻止周质酶等一些细胞成分的损失.脂多糖：由脂质双层向细胞外表伸出的是脂多糖,包括磷脂A、核心多糖和O-侧链三个组成局部.R质粒：又称耐药质粒,具有编码能够破坏或修饰抗生素的酶基因.毒性噬菌体：能在宿主菌细胞内复制增殖,产生许多子代噬菌体,并最终裂解细菌,称为毒性噬菌体.温和噬菌体：又称溶原性噬菌体,噬菌体基因与宿主菌染色体整合,不产生子代噬菌体,但噬

6、菌体DNA能随细菌DNA复制,并随细菌的分裂而传代.接合：细菌通过性菌毛相互连接沟通,将遗传物质质粒从供体菌转移给受体菌.溶原性转换：是侵入细菌的噬菌体在溶原期以前噬菌体形式在细菌内与细菌的染色体发生重组,导致细菌的基因型发生改变,溶原性细菌可以获得新的性状.转导：以温和噬菌体为载体,将供体菌的遗传物质转移到受体菌中,使后者获得新的性状.Hfr :高频重组株,F质粒基因经接合传递后,与染色体重组,整合后的细菌能以高效率转移染色体上的基因,这种染色体被整合进F质粒基因的受体菌称 Hfr.毒血症：致病菌进入机体后,只能在机体局部生长繁殖不进入血循环,但其产生的外毒素入血.内素毒：是革兰阴性菌细胞壁

7、的脂多糖,当菌体死亡崩解后游离出来.耐热,有毒性作用发热、白细胞反响、内毒素血症、DIC,抗原性弱,不可脱毒为类毒素.外毒素：是多数革兰阳性菌和少数革兰阴性菌在生长繁殖过程中,释放到菌体外的蛋白质.不耐热,毒性强,对组织有选择性作用,抗原性强,可脱毒为类毒素.中度敏感：常规用药时,到达平均血药浓度,一般相当于或略高于某种细菌的MIC.对细菌引起的感染仅在应用高剂量该药物时有效,或细菌处于体内抗菌药物浓集的部位或体液尿、胆汁、肠腔中时才被抑制.对毒性较小药物,可适当加大剂量仍可获得临床疗效.中介：不是敏感习性的度量,作为“缓冲碱,以预防因微小技术因素失控导致的结果偏差,临床意义不确MIC：最低抑

8、菌浓度g g/ml,指在体外实验中抗菌药物抑制培养基中某种细菌的生长的最低药物浓度, 是药物抗菌活性的指标,提示药物的抑菌水平.汹涌发酵现象：在牛乳培养基中能分解乳糖产酸,使酪蛋白陈凝固,同时产生大量气体,将凝固的酪蛋白陈冲成蜂窝状,并将液面上的凡士林层向上推挤,甚至冲开管口棉塞,气势凶猛,称为“汹涌发酵“,是产气荚膜梭菌的特征.无芽胞厌氧菌：是指一大群咋爱有氧条件下不能生长,必须在无氧条件下才能生长的无芽抱的革兰阳性及 革兰阴性的球菌与杆菌.二相性真菌：有些真菌可因环境条件如营养、温度.氧气等改变,可由一种形态转变为另一种形态,此真菌称为二相性真菌.假菌丝：又称无隔菌丝,是指酵母菌进行出芽生

9、殖时,子母细胞不立即别离而以狭小的面积相连, 那么称这种藕节状的细胞串为假菌丝.病毒：是由一个核酸分子DNA或RNA与蛋白质构成的非细胞形态的营寄生生活的生命体.病毒体：完整的成熟病毒颗粒,由核酸和蛋白质构成,其核心只有一种核酸DNAe RNA,外被蛋白质衣壳构成核衣壳,有些病毒的核衣壳外还被有包膜.病毒衣壳：包围在病毒核酸外的一层蛋白质,由一定数量壳粒聚合而成. 病毒衣壳的排列呈3种对称型20面立体对称、螺旋对称、复合对称可作为病毒鉴定和分类的依据.包膜：是病毒以出芽方式从细胞内释放时穿过核膜、胞质膜、空泡膜等,在核衣壳外获得了宿主细胞的膜血凝素：又称红细胞凝集素,为包膜上的柱状突起糖蛋白,

10、与病毒吸附和穿入宿主细胞有关,能与人、鸡、豚鼠等多种红细胞外表的 N-乙酰神经氨酸受体结合引起红细胞凝集.反转录病毒：反转录病毒是带有反转录酶依赖RNA的DNA聚合酶的RNAW毒,此病毒在反转录酶的作用下以病毒RNA为模板转录出互补 DNA链,单链DNA进入细胞核内互补另一条 DNA形成双链DNA并以前 病毒的形式整合于宿主 DNA中.问做题：1、试述微生物的种类及主要特点1试述微生物的种类及主要特点答：微生物的种类有：非细胞型微生物,原核细胞型微生物,真核细胞型微生物.主要特点非细胞型微生物：无细胞结构,无产生能量酶,一种核酸,专性胞内寄生原核细胞型微生物：拟核,无核仁、核膜,只有核糖体,兼

11、性寄生真核细胞型微生物：细胞核,有核仁、核膜,细胞器完整,腐生为主种类：非细胞型微生物、原核细胞型微生物、真核细胞型微生物特点：1个体小um/nm2结构简单：单细胞或简单多细胞结构,无分化.3代谢水平强、繁殖迅速4容易变异、种类多、分布广泛2、简述正常菌群及生理功能正常菌群：正常人体的体表及与外界相通的腔道中,都存在着不同种类和数量的微生物.在正常情况下, 这些微生物对人类无害,成为正常菌群.生理作用*拮抗作用：正常菌群在生物体的特定部位生长后,对其他的菌群有生物拮抗的作用.产生这种生物屏障的往往是一些厌氧菌.正常菌群通过紧密与黏膜上皮细胞结出来占领位置,由于在这些部位数量很大,在营养竞争中处

12、于优势,并通过自身代谢来改变环境的pH值或释放 抗生素,来抑制外来菌的生长.*营养作用：正常菌群的存在影响着生物体的物质代谢与转化.如蛋白质、碳水化合物、脂肪及维生素的合成,胆汁的代谢、胆固醇的代谢及激素转化都有正常菌群的参与.*免疫作用：正常菌群的抗源刺激可以使宿主产生免疫,从而减少了本身的危害.已有实验说明, 某些诱发的自身免疫过程具有抑癌作用.*抗衰老作用:3、简述条件致病菌及致病条件条件致病菌：在正常情况下不致病,在特殊情况下能引起疾病的细菌. 致病条件：1.机体免疫功能低下；2.寄居部位改变；3.菌群失调.4、比较革兰阳性菌与革兰阴性菌细胞壁卜胞壁革兰阳性菌革兰阴性菌卜度较坚韧较疏松

13、卜度20-80nm10-15nm卜聚糖层数可多达50层1-2层卜聚糖含量占细胞壁干重50%-80%占细胞壁干重 5%-20%磷壁酸+外膜+脂蛋白+脂多糖+5、革兰染色的步骤及影响因素1步骤：革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤,具体操作方法是：1制片：涂片、枯燥、固定.2初染：草酸镂结晶紫染 1分钟.用细流水水冲洗,甩去积水.3媒染：加卢戈碘液覆盖涂面染 1分钟.用细流水水冲洗,甩去积水.4脱色：加95%酒精数滴,并轻轻摇动进行脱色,数秒后水洗,然后斜持玻片,再加酒精,直到流下的酒精无色为止约30秒,用细流水水冲洗,甩去积水.5复染：加稀释石炭酸复红染 30秒.用细流水水冲洗,

14、甩去积水.标本干后,置油镜下镜检.2影响因素操作因素：涂图片太厚或太薄,固定时菌体过分受热以及脱色时间长短,均会影响结果染液因素：所有染液应预防染液蒸发而改变浓度,特别是卢戈碘液久存或受光作用后易失去媒染作用；涂片积水过多会改变染液浓度,影响染色效果.细菌因素：细菌菌龄不同,革兰染色结果也有差异,一般以1824小时的培养物染色效果最好,菌龄过长影响细菌染色性.6、抗酸染色步骤、结果步骤1用接种环挑取约 0.01ml脓性或呈干酪样局部痰液做成25mm< 20mm大小的均匀薄涂片,待自然枯燥后用酒精灯火焰固定.2初染用玻片夹夹持涂片标本, 滴加石炭酸复红2-3滴,在火焰高处徐徐加热, 切勿沸

15、腾, 出现蒸汽即暂时离开,假设染液蒸发减少,应再加染液,以免干涸,加热3-5分钟,待标本冷却后用水冲洗.3脱色3%盐酸酒精脱色至无红色染液脱下为止,用水冲洗.4复染用碱性美兰溶液复染 1分钟,用水冲洗后用吸水纸吸干.用油镜检查并记录结果.结果：油镜观察涂片,在淡蓝色背景下可见染成红色细长或略带弯曲的杆菌,并有分枝生长趋向,此为抗酸染色阳性菌.其他细菌或者细胞染成蓝色.-:仔细观察至少300个视野未发现抗酸菌.土： 100到300个视野内发现1-2条抗酸菌全部涂膜镜检 3遍；+ : 100个视野内发现3-9条抗酸菌全部涂膜镜检 1遍；+: 10个视野内发现1-9条抗酸菌；+:每个视野内发现1-9

16、个抗酸菌;+：每个视野内发现 9条以上抗酸菌.7、细菌常用生化试验的培养基、底物、指示剂、结果判断A 碳水化合物代谢试验 一,糖醇.甘类发酵试验底物：糖.醇.昔 产物：酸/酸和气A/AG指示剂：漠甲酚紫黄一紫培养基：肉膏汤Ph7.4 含相应糖.醇.甘 结果：紫-黄+紫-二.葡萄糖的氧化/发酵试验底物：葡萄糖 产物：有机酸指示剂：漠色香草酚蓝黄一绿-蓝培养基：结果：氧化管开 发酵管封绿黄绿黄绿黄绿绿/绿蓝绿三 B -半乳糖普酶试验底物：邻硝基酚0-半乳糖昔ONPG产物HL葡萄糖培养管开放 封闭发酵型F氧化型O不利用/产碱型-:邻硝基酚黄色培养基：ONPG培养基结果：黄+ 不变- 四七叶甘水解试验

17、底物：七叶甘 产物：七叶素结果：黑色+ 不变-指示剂：Fe2+培养基：七叶甘培养基五.甲基红试验MR试验 底物：葡萄糖产物：酸指示剂：甲基红红 P h< 4 .5黄 P h> 5 .4 培养基：葡萄糖蛋白陈水结果： 无色红+不变-六 VP试验底物：葡萄糖 产物：乙酰甲基甲醇指示剂：10%KoHa-茶酚VP甲乙液培养基：葡萄糖蛋白陈水结果：红色+ 不变-B 蛋白质和氨基酸代谢试验1 .引噪试验靛基质试验底物：色氨酸 产物：口引噪 指示剂：对二氨基苯甲醛靛基质试剂培养基：蛋白陈水结果：玫瑰色+ 不变-2 .硫化氢t验H2S底物：含硫氨基酸产物：硫化氢指示剂：醋酸铅/硫酸亚铁Fe2+ 培

18、养基：含铁琼脂结果：黑色+不变-3 .尿素酶试验底物：尿素 产物：氨 指示剂：酚红黄红培养基：尿素肉汤/尿素琼脂培养基结果：黄-红+黄-4 . 苯丙氨酸脱氨酶试验底物：苯丙氨酸 产物：苯丙酮酸 指示剂：10%三氯化铁培养基：苯丙氨酸琼脂斜面 结果：绿色化合物+不变-5 .氨基酸脱竣酶试验底物：氨基酸 产物：胺和二氧化碳指示剂：漠甲酚紫黄-紫培养基：Moeller脱竣培养基含葡萄糖和氨基酸结果：对照管 不变试验管 黄-紫+黄-此试验需做对照不含氨基酸的培养基C碳源利用试验一枸檬酸盐利用试验底物：枸檬酸盐 产物：碳酸盐指示剂：漠色香草酚蓝绿一蓝培养基：枸檬酸盐培养基结果：绿蓝+绿-D 呼吸酶试验一

19、 细胞色素氧化酶试验OX试验OX原理：细胞色素C - 氧化型细胞色素C+苯二胺-酶类化合物红色指示剂：1%盐酸四甲基对苯二胺/盐酸二甲基对苯二胺产物：血类化合物红色结果：10s内红色+不变-二 过氧化氢酶试验/触媒H2O2试验原理：触媒H2O2 - H2O+O2 T指示剂：3% H2O2底物：3% H2O2产物：O2结果：大量气泡 O2产生+无-注意：做对照血细胞中有H2O2 ,可产生假阳性三硝酸盐复原试验原理：酶系硝酸盐-亚硝酸盐+ a-茶胺+对氨基苯磺酸-N - a-秦胺偶氮苯磺酸红色底物：硝酸盐产物：亚硝酸盐指示剂：对氨基苯磺酸/ a-蔡胺甲液/乙液培养基：硝酸盐培养基结果：红色+ 不变

20、-注意：不变色,参加锌粉-红色真阴性 不变 假阴性E其他生化试验一 凝固酶试验原理：方法；结合型血浆凝固酶-玻片法 凝集+ /不凝集-游离型血浆凝固酶-试管法 凝固+ /不凝固-结果：金黄色葡萄球菌+ 其他-注意：做对照试验二 卵磷脂酶试验原理：酶+Ca2+卵磷脂 -甘油脂混浊底物：卵磷脂 产物：甘油脂培养基：卵黄琼脂平板结果：混浊+ 不变-三 DNA酶试验原理：DNA酶长链DNAf寡核甘酸链被酸沉淀溶于酸底物：长链DNA产物；寡核甘酸链培养基：DNA琼脂平板 结果：菌落周围透明环+无透明环-四 胆汁溶菌试验原理：胆汁或胆盐可溶解肺炎链球菌,而其他细菌那么能耐受.指示剂：10%去氧胆酸钠结果：

21、加胆盐的培养基变透明,而对照管仍混浊+加胆盐的培养基仍混浊,而对照管仍混浊-五 CAMP试验原理：胆汁或胆盐可溶解肺炎链球菌,而其他细菌那么能耐受.指示剂：10%去氧胆酸钠结果：加胆盐的培养基变透明,而对照管仍混浊+加胆盐的培养基仍混浊,而对照管仍混浊-F复合生化试验一克氏双糖铁琼脂培养基试验KIA试验培养基：克氏双糖铁琼脂培养基底物：乳糖和葡萄糖指示剂：酚红产物：酸结果：乳糖 葡萄糖 产气 硫化氢二动力-靛基质-尿素酶试验MIU试验培养基：培养基为含尿素、蛋白陈成分的半固体培养基指示剂：酚红 底物：蛋白陈中的色氨酸、尿素结果：动力 口引噪 尿素8、何为细菌的质粒,质粒的主要特点及种类质粒：质

22、粒为细菌染色体外的遗传物质,环状双股DNA质粒携带有遗传信息,限制某些特定的遗传性状,可独立复制,与细菌的遗传变异有关.特点：1自我复制2独立限制特定的性状F质粒、R质粒、Col质粒、Vi质粒3可在细菌间转移、可丧失、一个细菌体内可带有多个质粒种类：致育质粒F质粒、耐药质粒R质粒、细菌素质粒Col质粒、毒力质粒 Vi质粒、代谢质粒9、构成细菌侵袭力的物质根底有哪些1菌体外表结构：主要包括荚膜及其他外表物质.如微荚膜、Vi抗原、K抗原等,都具有抗吞噬、抵抗抗体和补体的作用.2菌毛：通过与宿主细胞外表的相应受体结合而粘附定居在黏膜外表,有助于细菌侵入.3侵袭性酶：是某些细菌代谢过程中产生的与致病性

23、有关的胞外酶,分泌到菌体周围,协助细菌抗吞噬或有利于细菌在体内扩散.主要的侵袭性酶有：1血浆凝固酶：使血浆发生凝固.凝固物沉积在菌体外表或病灶周围,保护细菌不被吞噬细胞吞噬和杀灭.2透明质酸酶：又称扩散因子,因而有利于细菌及其毒素向周围及深层扩散.3链激酶：使细菌易于扩散.4胶原酶：促使细菌在组织间扩散.5脱氧核糖核酸酶：有利于细菌扩散.6其他可溶性物质：杀白细胞素,溶血素.4芽抱增强细菌的侵袭力10、高压灭菌的温度、时间、适用范围,如何对高压灭菌效果进行监测答：134C, 1320min,适用于耐高温耐湿的物品,如普通培养基、生理盐水、手术器械、玻璃容器及注射器、敷料等物品的灭菌.监测：高压

24、蒸汽灭菌效果的监测：有以下三种方法.第一种是物理监测.根据安装在灭菌器上的量器 B-D试验,排气、抽真空,反响压力、温度,时间、 图表、指示针、报警器等,指示灭菌设备工作正常与否.此法能迅速指出灭菌器的故障,但不能确定待灭 菌物品是否到达灭菌要求.此法作为常规监测方法,每次灭菌均应进行.o第二种是化学指示监测.化学指示卡或化学指示胶带 100%变色来指示灭菌效果.利用化学指示剂在 一定温度与作用时间条件下受热变色或变形的特点,以判断是否到达灭菌所需参数.第三种是生物指示剂监测.嗜热脂肪芽抱菌菌片,121c三19分钟-漠甲酚紫葡糖蛋白陈培养基-7天培养-显紫色无嗜热脂肪芽抱菌生长,灭菌合格.11

25、、简述医院感染及其病原学特征.,简述医院感染及其病原学特征.医院感染：指住院病人在医院内获得的感染,包括在住院期间发生的感染和在医院内获得出院后发生的感染,但不包括入院前已开始或者入院时已处于潜伏期的感染.医院工作人员 在医院内获得的感染也属医院感染.病原学特征：流行根本环节包括三个根本要素,感染源,感染途径,感染者分外源性医院感染,内源性医院感染传播途径：接触传播；空气传播；共同媒介传播水,食物,医源性血液诊疗器械和设备,一次性用品；生物媒介传播.流行形式：散发性,爆发性.易感人群：机体免疫功能严重受损者；婴幼儿及老年患者；营养不良者；接受各种免疫抑制剂治疗者；接 受各种侵入性操作者；长期应

26、用光谱抗菌药物者；住院时间长着；手术时间长者.以革阴为主,也有革阳和真菌感染.12、L型菌及特点概念：某些药物作用于细菌,可抑制的肽聚糖的合成或破坏细胞壁的结构,在高渗环境下,细菌仍可存活, 成为细胞壁缺陷型L型细菌的生物学特性：1、细菌L型的形态和染色性：细菌 L型呈高度多形性,大小不一.着色不匀,无论其原为革兰阳性或阴 性菌,形成L型大多染成革兰阴性.2、细菌L型生长缓慢,营养要求高,对渗透压敏感,普通营养基上不能生长,培养时必须用高渗的含血清 的培养基.3-5%Nacl , 10-20%蔗糖,10-20%人或马血清,细菌L型在高渗的含血清的培养基上生长后形 成三种类型的菌落.3、L型细菌

27、的其他特征：生化反响和抗原结构不典型,无法进行常规的菌种鉴定；人工传代后可回复为野 生型；常引起慢性及反复发作的感染,对作用于细胞壁的常规药物不敏感.13、K-B法药敏试验的影响因素及质量限制1 .药敏纸片的药量和pH值.2 .纸片的规格 药敏纸片的厚度要求在 1mm左右,这样适合药物的扩散速度和细菌的生长.药敏纸片的直 径为6.006.35mm.如果纸片的厚度过厚或过薄,药敏纸片直径过大或过小将影响药敏试验的结果.3 .含药纸片保存和含药纸片片间差.4 .药敏纸片应用标准菌株定期监测是否失效.5试验操作过程中的影响因素6细菌的纯度7菌液浓度8菌液在培养基上的分布9贴药敏纸片时,每取一种药敏纸

28、片必须烧一下镣子口,预防药敏纸片之间相互混淆,以提升药敏的准确性.10培养基种类,在大多数情况下,采用WHO组织统一要求的 M-H培养基进行的药敏试验效果较好11孵育的温度和时间14、液体稀释法的原理答：原理：以水解酪蛋白(M-H )液体培养基将抗生素作不同浓度的稀释,然后种入待检菌,定量测定抗菌药物对该菌的MIC .以外观清楚,肉眼看无细菌生长的最低药物浓度(最高抗生素稀释度) 作为MIC15、联合抑菌试验可能出现的结果、及判断标准联合抑菌试验可能出现的结果、及判断标准可能出现的结果有：1,拮抗作用,2,无关作用3累加彳用4协同作用FIC指数=A药联合时的 MIC/A药单测MIC+B药联合时

29、的 MIC/B药单测MIC.判断标准：FIC指数0.5为协同作用；0.51为相加作用；12为无关作用；2为拮抗作用.16、细菌产生耐药性的生化机制答：1、产生一种或多种水解酶,钝化酶和修饰酶；2、抗生素作用的靶位改变,包括青霉素结合蛋白位点和DNA解旋酶的改变；3、细菌膜的通透性下降,包括细菌生物被摸的形成和通道蛋白丧失；4、细菌主动外排系统的过度表达.17、3 -内酰胺酶的种类及目前临床最常用的检测方法,常规需做直接3-内酰胺酶检测的细菌有哪些答：B-内酰胺酶的种类：按结构(功能)分为丝氨酸(A、C、D)和 金属酶(B);按分子生物学分类(Bush 分类)：1(C)、2a(A)、2b(A)、

30、2bc(A)、2br(A)、2c(A)、2d(D)、2c(A)、2f(A)、3(B)、4.(其它).临床检测方法：1、纸片法(头抱硝曝吩纸片),10分内观察结果纸片由黄变红为阳性,表示有 B-内酰胺酶产生.2、碘淀粉法,10分后蓝色消失为阳性.常规需进行B-内酰胺酶的检测的细菌有：肺炎链球菌、肺炎克雷伯菌、嗜血杆菌属、淋病奈瑟菌、卡他莫拉菌葡萄球菌、肠球菌、大肠埃希菌、奇异变形杆菌、产酸克雷伯菌等.18、何为ESBL临床意义及 CLSI推荐的检测方法,哪些细菌应常规检测ESBL? ESBL为超广谱0内酰胺酶临床意义：临床上以革兰阴性杆菌产生的超广谱0内酰胺酶(ESBLs)最受重视,一旦ESBL

31、s阳性,不管体外药敏如何,均应视为对青霉素和所有头抱菌素类耐药,应改用其它抗菌药物.产ESBLs菌在体外对多种抗生素敏感而在感染者体内却表达临床意义耐药.检出ESBL菌株可对症下药,缩短病人住院时间,减少病人痛苦,还可以大大减少院内感染且为患者节省开支. CLSI推荐的检测方法：双纸片协同法.哪些细菌应常规检测 ESBL:肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌、大肠埃希菌、奇异变形杆菌、阴沟肠杆菌 等革兰阴性杆菌.19、何为MRSA临床意义及检测方法MRSA是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的缩写、是金黄色葡萄球菌家族中的一种检测方法1、纸片扩散法(K-B法)2、肉汤稀释法3、琼脂稀释法4、琼脂筛选法5、浓度梯度

32、法6、自动化药 敏检测7、 DNA探针杂交8、 PCR技术20、淋病确实诊应如何进行微生物学检查答：先培养：即疑为淋病奈瑟菌感染的标本接种于选择培养基如NYC、MTM 、 ML,立即置于5%CO2气体条件下3537c孵育,培养基需观察 72小时后无菌生长可报告为阴性,每隔24小时观察,淋病奈瑟菌的菌落呈灰褐色、光滑、半透明呈露滴状凸起的菌落.然后进行革兰染色镜检：将菌落涂片,革兰染色后显微镜下见革兰阴性双球菌,再进行氧化酶和触酶试验,葡萄糖发酵试验阳性,其他糖类试验阴性于是可确诊为淋病奈瑟菌.21、链球菌是如何分类和鉴定的链球菌的分类：根据溶血现象分类：甲型溶血性链球菌、乙型、不出现溶血的丙型

33、.根据Lancefield抗血清分型将分为 ABCD.等20个群.对人类治病主要是 A群.鉴定：羊血脂平板识别溶血特性,涂片格兰染色,镜检,如果为G+,进一步做触酶试验,6.5%的NaCL不生长着,可确定为链球菌细菌.22、肺炎链球菌致病因素及鉴定要点,如何区分肺炎链球菌与草绿色链球菌肺炎链球菌的致病因素：肺炎链球菌的荚膜在细菌的侵袭力上起着重要作用；肺炎链球菌的溶血素、神经氨酸酶也是其主要致病物质鉴定要点：发酵葡萄糖和多种糖,不产气,乳酸为代谢终末产物,触酶阴性,胆汁溶菌试验和Optochin阳性.a溶血性链球菌.荚膜多糖使菌落呈粘液状；可产生自溶酶,培养 48h后出现“脐窝状菌落.对青 霉

34、素耐药甚至多重耐药.如何区分肺炎链球菌和草绿色链球菌：肺炎链球菌：Optochin为S,胆汁溶菌试验阳性.草绿色链球菌：Optochin为R,胆汁溶菌试验阴性.23、肠杆菌科细菌有哪些共同的生物学特性如何区分肠杆菌科细菌与其他革兰阴性杆菌答：共同的生物学特性：1.形态与染色：G杆菌,多数有周鞭毛、有荚膜或微荚膜,致病菌株多数有菌毛,均无芽胞,多数有动力.2、培养：需氧或兼性厌氧,营养要求不高,在普特培养基上和MAC上生长良好.3、生化反响：氧化酶-；发酵葡萄糖产酸或产酸产气；触酶十；硝酸盐复原试验十发酵多种糖类,多数能发酵乳糖,产酸产气利用乳糖发酵试验初步鉴别肠道致病菌和肠道非致病菌：肠道致病

35、菌-多数不发酵乳糖肠道非致病菌-多数发酵乳糖4、抗原构造复杂：鞭毛抗原H、K或Vi抗原、菌体抗原O5、对抗力不强,加热 60c30min即被杀死,不耐枯燥,对一般化学消毒剂如漂白粉、酚、甲醛等均敏感.对低温有耐受力,能耐胆盐,并在一定程度上能对抗染料的抑菌作用.6、易变异：通过接合、转导、溶源性转换引起耐药性变异、毒力性变异、生化反响性变异7、临床意义：致病物质：菌毛、外表抗原、内毒素、肠毒素传染途径：肠道传染、肠道外传染所致疾病：O肠道致病菌引起肠道传染病细菌性痢疾、伤寒等O条件致病菌：是医院感染的主要病原菌肠杆菌科细菌与其他革兰阴性杆菌区分肠杆菌科细菌与其它 G-b鉴定要点：肠杆菌科弧菌科

36、非发酵菌O/F 葡萄糖FFO/-氧化酶-+形态杆状弧形杆状鞭毛周毛或无单毛单、丛、周或无24、哪些是主要引起人类肠道感染的肠杆菌科细菌埃希菌属,志贺菌属,沙门菌属,耶尔森菌属.25、如何进行肠杆菌科细菌的微生物学检验答:尿液标本1首先是直接图片染色,给出初步报告2接种在BAP和MAC上,35 C培育箱中培育 1824小时3培育好后,做涂片染色,和氧化酶实验.然后转种到KIA和MIU上以及O/F,37 C培育1824小时.4然后观察结果,全面生化鉴定和血清学分型5药敏试验注:1血清和脑脊液标本需要先增菌,然后做14步2 粪便呕吐物的别离培养是在SS/HE/XLD和MAC/EM斯国蓝上边进行,然后

37、同尿标本 以上实验步骤为肠杆科菌属的检验程序 报告依据：1革兰阴性无芽抱杆菌O/F为发酵型引噪/甲基红/V-P/枸檬酸盐IMVC4 MAC上面的菌落KIA实验的结果肠杆菌的定科主要依靠 O/F实验和氧化酶实验,以及菌的形态和有无鞭毛有鞭毛的细菌才具有致病性 来定.属种的鉴定可以用自动仪和商品鉴定盒来定. 手工操作结果判定各种属特点：大肠埃希氏菌：在选择性平板上课发酵如糖,形成有色菌落：EMBk市粉红色有金属光泽；MAC1粉红或红色；HE上中度抑制,菌落呈橙红色或橘红色；SS上受抑制,菌落呈粉红色或者中间粉红色,周围无色；XLD上市不透明的黄色. KIA上为AA+-,上下产酸产气,H2s阴性MI

38、U 动力/口引噪/尿素+-. IMVC+- 沙门菌属：KIA结果可能为葡萄糖分解阳性,乳糖分解阴性,有的产气,有点不产气,有的H2s阳性有的阴性.MIU+-; IMVC:-+-或者-+-+.沙门菌属的血清学鉴定中,H血清分型如果第二相不凝,可能是位相诱导.志贺菌属：无鞭毛,在增菌培养是在GN肉汤上,37c培养4到6小时即可.KIA上,产碱/产酸、不产气、H2s阴性；MIU-+/-,IMVC 上+/- +- o血清定型原那么是先多价,后单价,需对照.小肠结肠炎耶尔森菌：粪便标本在增菌时采用冷增菌培养,45c培养2到3周.25c动力阳性,37c动力阴性.尿素阳性克雷伯菌属：对氨士西林天然耐药,对头

39、抱容易耐药.肠杆菌属：IMVC结果与大肠埃希氏菌属相反,为 -+,动力和鸟氨酸均阴性.变形杆菌属：周身鞭毛,H2s阳性,同种间的鉴定,普通变形杆口引噪阳性,普通变形杆与豪氏主要依靠七 叶甘和水杨普实验,前者两项为阳性,后者为阴性,奇异变形杆的特点是鸟氨酸阳性,产黏变形杆是木糖 发酵阴性,潘氏变形杆是氯霉素耐药.26、变形杆菌、小肠结肠炎耶尔森菌鉴定要点变形杆菌1、G-杆菌2、普琼：有迁徙现象. SS:中央呈黑色3、氧化酶-4、尿酶+5、KIA : KA+ 小肠结肠炎耶尔森菌 1、G-杆菌2、CIN:菌落为粉红色,偶有一圈胆盐沉淀3、氧化酶：-4、尿酶+5、KIA : KA-6、TSIA : A

40、A7、血清定型27、不发酵革兰阴性杆菌的共同特点是什么临床常见菌属有哪些答：1 培养在一般培养基上生长良好,包括血平板,巧克力平板.2 革兰染色革兰阴性杆菌.3 氧化酶实验大多为阳性.4 O/F 为O型,不利用或产碱N/F.5 KIA 斜面穿刺生长不良,底层穿刺上可生长,斜面及底层均呈碱性生长.6 动力实验在半固体中仅在穿刺的 4mm左右生长,4-6h初步观察,时间久了动力消失. 临床常见菌属有假单胞菌属,不动杆菌属,产碱杆菌属,黄杆菌属,莫拉菌属,军团菌属.28、产碱杆菌、不动杆菌属鉴定要点产碱杆菌属：在MAC、SS平板上可形成无色透明的菌落,在血平板上行成灰色,扁平,边缘薄的较大菌落. 生

41、化鉴定：氧化酶及触酶+、O/F产碱性、月尿酶一、动力一不液化明胶、 不分解任何糖类不动杆菌属：在普通培养基和麦康克平板上生长良好,最是温度为35度,有些菌株可在42度生长,在SS琼脂平板上有局部菌落生长, 生化鉴定：氧化酶一、动力一、硝酸盐实验一29、铜绿假单胞菌的主要生物学特性1)、形态特征：为格兰阴性菌,长短不一,球状或长丝状,成双或成锻炼排列.一端有鞭毛,运动活泼, 无芽抱.可产生多种色素,如绿脓素与带荧光的水溶性荧光素.2)、培养特性：专性需氧菌,局部菌株能在兼性厌氧条件下生长,营养要求不高,在普通培养基上生 长良好,可生长的温度范围为 2542摄氏度,最适生长唯独为 2530摄氏度,

42、4摄氏度不生长.氧化酶 阳性,氧化分解葡萄糖、木糖、产酸不产气,液化明胶,复原硝酸盐并产生氮气,口引噪阴性,利用枸檬酸 盐,精氨酸双水解酶阳性.3)、有O抗原和H抗原,其中O抗原包含外膜蛋白,脂多糖两种成分.外膜蛋白是保护性抗原,脂 多糖具有特异性,应用抗原成分可对铜绿假单胞菌进行血清学分型,目前可分为20个血清型.30、革兰阴性杆菌鉴定步骤见书31、革兰阳性球菌鉴定步骤见书32、细菌实验室应如何检验疑为霍乱的粪便标本粪便标本：(1) a 涂片b 动力制动试验=> 快速检测-初步报告(2)接种碱性陈水-(25C 6-8 小时)-转钟a TCBSe 4号琼脂一35C 12-18 小时-观察

43、可疑菌落.(3)生化鉴定：a 涂片 染色(菌体短小 弯曲成弧形或直杆状的革兰阴性细菌)b 氧化酶试验(+)c 粘丝试验(+) d O/129敏感试验 (s) e - O1群,O139群血清凝集实验(+)(4)分纯： 转钟 KIA-生化鉴定：a耐盐性试验 NAcL【0% (+) 1% (+) 3% (+) 6% (+) 8% (-) 10%(-);b血清型鉴定；c生物型鉴定33、简述结核分枝杆菌的形态及培养特性(培养基)答：形态：细长略弯曲的杆菌,有时可见啊分枝状,无芽胞和鞭毛,因衰老和抗结核药物的作用可出现多 种形态,如球状、串珠状或丝状.培养特性：在固体培养基上,菌落为粗糙型,外表枯燥呈颗粒

44、状,不透明,乳白色或淡黄色,如菜花样.在液体培养基中,生成菌膜.如在培养液中参加吐温-80可是细菌分散,均匀生长,有毒株的在液体培养基中呈索状生长.34、如何进行结核分枝杆菌的微生物学检验1、形态观察(1)、涂片：直接涂片和厚涂片；火焰固定后用于染色(2)、染色：O抗酸染色报告抗酸杆菌z荧光染色岬分枝杆菌2、 别离培养(1)、标本处理：脑脊液等无杂菌污染的标本可直接或离心后取沉渣接种；痰和尿液有杂菌污染的标本接种之前应作适当的处理.O 1酸处理,待接种；02碱处理,待接种；03胰酶一新洁尔灭法,待接种(2)、接种与培养1)固体培养基：O1抗酸性染色飞鉴定试验鉴定报告群别或种别耐药试验2)液体培

45、养基：占定报告群别或种别3、生化反响糖发酵触酶热触酶中性红硫盐池原+_+一4、基因诊断：O1 DNA探针PCR杂交梳鉴修告群别或种别O16rRNA基因测序5、免疫学诊断：O1结核菌素试验轴助中段检测抗PPD IgG诊财动性结核全血INF- 丫测定报告爵被或种别35、厌氧芽胞梭菌属共同特征,主要种类共同特征：厌氧或微需氧的粗大芽抱杆菌.革兰阳性,芽抱呈圆形或卵圆形,直径大于菌体,位于菌体中 央,极端或次极端,使菌体膨大呈梭状.多数为腐生菌,少数致病菌,能分泌外毒素,和侵袭酶类,引起 人和动物致病.种类：临床上有致病性的梭状芽抱杆菌主要是某些厌氧芽抱杆菌,如破伤风梭菌,产气荚膜梭菌,肉毒梭 菌与艰

46、难梭菌等.36、破伤风梭菌、肉毒梭菌的形态特征、致病物质及所致疾病破伤风撵梭菌的形态特征：革兰氏阳性菌、细长、周身鞭毛、能运动、无荚膜.芽抱正圆形,比菌 体大,位于菌体顶端,使细菌呈鼓槌状.专性厌氧菌,在血平板上呈薄膜状生长,菌落半透明、灰白色、 边缘疏松呈羽毛状,伴 B溶血.在疱肉培养基中,肉渣局部消化,微变黑,有少量气体,有腐败性恶臭.致病物质：外毒素.所致疾病：感染后引起机体强直性痉挛、抽搐,称为破伤风.肉毒梭菌的形态特征：革兰阳性粗短杆菌、单独或成双排列、有时可见短链状.有周身鞭毛、无 荚膜.严格厌氧菌,普通琼脂平板上形成直径35毫米不规那么菌落,能产生脂酶.血平板上有溶血.卵黄平板上

47、,菌落周围出现浑浊圈,有腐败恶臭气味.致病物质：外毒素.所致疾病：引起人和动物 严重的中毒性疾病即肉毒症、食物中毒.37、厌氧菌感染的条件和特征条件：1、组织缺氧或氧化复原电势降低可造成厌氧菌生长繁殖的适宜环境,易于遭受厌氧菌感染2、机体免疫功能下降,如接受免疫抑制剂、抗代谢药物、放射治疗、化学药物治疗的患者,易并发 厌氧菌感染.3、长期应用氨基糖甘类抗生素,或长期应用头抱菌素、四环素等无效的患者,均可诱发厌氧菌感染 特征：1、感染组织局部产生大量气体.2、感染部位多发生在粘膜附近.3、深部外伤如枪伤后,人或动物咬伤后的继发感染,均可能是厌氧菌感染.4、分泌物有恶臭,或为暗血红色,并在紫外光下

48、发出红色荧光,均可能是厌氧菌感染.发红色荧光 的分泌物,可能有产黑色素普鲁沃菌和不解糖紫单胞菌；分泌物或浓汁中有硫磺颗粒,为放线菌感染5、长期应用氨基糖甘类抗生素治疗无效的病例、新近流产史者,以及胃肠手术后发生的感染,均有可 能是厌氧菌感染.6、分泌物涂片经革兰染色,镜检发现有细菌,而常规培养阴性者；或在液体或半固体培养基深部生长 的细菌,均可能是厌氧菌感染38、什么是真菌,病原性真菌的培养特性答：真菌培养要求不高,在普通培养基上能生长,常用沙氏培养基培养,适宜温度2228 C,深部真菌为37c.真菌培养后可形成两种菌落.1, 酵母菌型菌落：单细胞真菌的菌落,形态与一般菌落相似,但较大,菌落外

49、表光滑,湿润,柔软,边 缘整洁,如新生隐球菌.局部单细胞真菌可在培养基中形成假菌丝,伸入培养基中,此菌落为类酵母菌.2, 霉菌型菌落：是多细胞真菌的菌落,菌落呈棉絮状,绒毛状,粉末状,并产生不同的色素,如皮肤 廨菌.39、白色假丝酵母菌、新生隐球菌的主要特征白色假丝酵母菌的主要特征：呈圆形或卵圆形,革兰阳性,着色不均.出芽方式繁殖,在组织内可见抱子、 假菌丝.新生隐球菌的主要特征：在组织中呈圆形或卵圆形,外周有宽厚荚膜,荚膜较菌体大13倍,折光性强,一般染色法不易着色,常采用墨汁负染色法,在黑色背景下可镜检到透亮菌体和宽厚荚膜.菌落呈粘液状.40、何为呼吸道病毒主要包括哪些种类普通感冒最常见病

50、原体有哪些呼吸道病毒是指能侵犯呼吸道并导致呼吸道病变或以呼吸道途径感染而主要引起呼吸道以外组织器 官病变的病毒.主要包括：甲乙丙型流感病毒,甲型禽流感病毒,副流感病毒,麻疹病毒,腮腺炎病毒,呼吸道合胞病毒,人鼻病毒,人冠状病毒,人腺病毒2型,风疹病毒,轮状病毒.普通感冒最常见的病原体有：副流感病毒,人鼻病毒,人冠状病毒,41、简述流感病毒的结构、抗原与分型1流感病毒的结构：核心：分节段的-SSRNA 核蛋白N? RNA聚酶基质蛋白M蛋白：M1,M2具型特异性包膜：刺突：血凝素 HA神经氨酸酶NA抗原及分型内部抗原外表抗原组成NP、 MPHA、NA特异性型特异亚型特异分型情况甲、乙、丙A0、A1、A2、A342、乙型肝炎病毒HBV的形态、结构及基因组的组成人类乙型肝炎病毒在电镜下观察有 3种病毒颗粒,即小球形颗粒、管状颗粒和大球状颗粒或称 Dane颗粒. Dane颗粒为完整的病毒体,有 3层结构,即外部包囊 8nm厚的外衣壳蛋白相当于病毒包膜即