盐酸氨溴索颗粒的药物动力学及生物等效性研究

1、638 Chinese Journal of Pharmaceuticals 2007, 38(9 · · 中国医药工业杂志药理与临床盐酸氨溴索颗粒的药物动力学及生物等效性研究邓鸣1，张彦玲2，胡玉钦1，侯艳宁1，牛坤1(1. 白求恩国际和平医院临床药理室，河北石家庄 050082；2. 石药集团中奇制药技术(石家庄有限公司，河北石家庄 050051摘要：采用双周期随机交叉试验设计，研究了19名健康男性受试者单剂量口服盐酸氨溴索颗粒(受试制剂与盐酸氨溴索片(参比制剂的药动学。采用LC-MS/MS法测定血浆中氨溴索的浓度。受试制剂与参比制剂的c max 为(69.66

2、7;22.12和(67.89±25.08 ng/ml，t max 为(1.95±0.60和(1.89±0.43 h ，t 1/2为(7.77±0.93和(7.61±1.02 h ，AUC 024h 为(517.9±180.4和(518.3±215.5 ng·h·ml1。盐酸氨溴索颗粒的相对生物利用度为(102.7±17.1，双单侧t 检验结果表明两制剂具有生物等效性。关键词：盐酸氨溴索；液相色谱-串联质谱；药物动力学；生物等效性中图分类号：R944.9 文献标识码：A 文章编号：1001-825

3、5(2007 09-0638-03Pharmacokinetics and Bioequivalence of Ambroxol Hydrochloride GranulesDENG Ming1, ZHANG Yan-ling2, HU Yu-qin1, HOU Yan-ning1, NIU Kun1(1. Dept. of Clinical Pharmacology, Bethune International Peace Hospital, Shijiazhuang 050082;2. Zhongqi Pharmaceutical Technology (Shijiazhuang Co.,

4、 Ltd., Shijiazhuang 050051ABSTRACT : The pharmacokinetics of ambroxol hydrochloride granules and reference tablets were investigated at a single oral dosage of 30mg in 19 healthy male volunteers, according to a randomized crossover design. The concentration of ambroxol in plasma was determined by a

5、LC-MS/MS method. The main pharmacokinetic parameters of test and reference preparations were c max (69.66±22.12 and (67.89±25.08 ng/ml, t max (1.95±0.60 and (1.89±0.43 h, t 1/2(7.77±0.93 and (7.61±1.02 h, AUC 024h(517.9±180.4 and (518.3±215.5 ng·h·ml

6、1. The relative bioavailability of ambroxol hydrochloride granules was(102.7±17.1. The result of two one-side t test showed that the two preparations were bioequivalent.Key Words: ambroxol hydrochloride; LC-MS/MS; pharmacokinetics; bioequivalence氨溴索(a m b r o x o l ，1是溴己新的活性代谢物，系黏液溶解剂，对呼吸系统有保护作

7、用，还有促进表面活性物质合成和分泌等作用，临床用于治疗急、慢性呼吸道疾病引起的痰液黏稠、咳痰困难等。国内有关1片剂、胶囊剂、口服液等剂型的药物动力学和生物等效性研究已有报道1-5，但颗粒剂的药物动力学研究尚未见报道。本研究以1片为收稿日期：2007-01-24作者简介：邓鸣(1973，女，硕士，主管药师，从事药物分析和药物动力学研究。Tel 比制剂，采用LC-MS/MS法测定人血浆中1的浓度，研究了两种1制剂的人体药物动力学和生物等效性，为临床合理用药提供了依据。1仪器与试药液相色谱-质谱联用系统：Agilent 1100型液相色谱仪，包括四元梯度泵、在线脱气机、

8、自动进样器、柱温箱；API 4000型三重四级杆质谱仪，配有电喷雾离子化(ESI 源、Analyst 1.4 软件(美国ABI 公司。受试制剂(T ：盐酸1颗粒剂(河北华威得菲尔药业有限公司，规格 含1盐酸盐30mg ，批号060901；参比制剂(R ：盐酸1片(上海勃林格殷格翰药业有限公司，规格 含639中国医药工业杂志 Chinese Journal of Pharmaceuticals 2007, 38(9 · ·1盐酸盐30mg ，批号684069；1盐酸盐对照品(河北省药品检验所，含量99.4，批号040801；维拉帕米(2盐酸盐对照品(内标，中国药品生物制品检定

9、所，含量100.0，批号0223-9601。和10h 后统一进餐。受试者于给药前及给药后20、40min 和1、1.5、2、2.5、3、4、6、8、10、12、24h 分别从肘静脉取血2ml 置肝素管中放置1h ，离心(3000r/min 10min ，分离血浆，置-20冻存，备用。1周后交叉给药。2.2血样测定 2. 2. 1测定条件色谱条件：色谱柱Restek Allure C18柱(4.6mm×50mm ，5µm；流动相 甲醇-乙腈-0.5甲酸(55540；流速0.5ml/min；柱温20；进样量5µl。质谱条件：离子源 电喷雾离子化(ESI 源；喷雾电压5

10、kV ；雾化温度500；雾化气流速40L/min；帘气流速25L/min；碰撞气流速4L/min；辅助气流速40L/min；检测方式 正离子多离子反应监测(MRM 。定量分析的离子反应m/z 379.1264.1(1 ，m/z 455.5m/z 165.2(2 ，碰撞诱导解离(CID 电压25V (1和45V (2 ；驻留时间(dwell time 200ms 。在上述测定条件下，空白血浆中内源性物质不干扰1和2的测定，保留时间分别为1.5min 和1.7min 。空白血浆、加样血浆和服药后血浆的多反应监测(MRM 色谱图见图1。2方法与结果2. 1试验设计试验前对志愿者进行病史询问和体格检查

11、，包括心电图、胸透、肝功能、肾功能、血常规、尿常规和乙肝表面抗原检查等，共入选20名男性健康志愿者，19名完成试验(1名退出。19名受试者平均年龄(23.6±2.5岁，平均体重(64.2±5.6 kg ，身高(1.72±0.06 m ；受试者试验前两周及试验期间未服用其它任何药物，试验期间禁烟酒及含咖啡因的饮料，并自愿签署知情同意书。试验方案经本院伦理委员会批准通过。采用两制剂双周期交叉试验设计，20名受试者随机分为2组。试验前12h 进清淡晚餐后禁食，翌晨8时空腹口服T 或R 制剂，剂量均为30mg (以1盐酸盐计，用温开水250ml 送服。R 制剂直接吞服，T

12、 制剂先用适量水搅拌均匀后服用，再用少量水分次冲洗杯中残留药物，服下。服药2h 后统一饮水，40122012012A ：空白血浆，B ：空白血浆+1盐酸盐对照品+2盐酸盐对照品，C ：服药后4h 血浆，I ：m/z 379.1264.1；II ：m/z 455.5m/z 165.211; 22图1MRM 色谱图2. 2. 2血样预处理内标溶液200µl，涡旋20s ，离心(10000r/min 5min ，取上清液进样测定。640 Chinese Journal of Pharmaceuticals 2007, 38(9 · · 中国医药工业杂志表1主要药动学参数

13、结果( ± s，n =19参数max t max /ht 1/2 /hAUC 024h /ng·h·ml1AUC 0 /ng·h·ml1F/AUC 经对数转换后进行方差分析，用双单侧t 检验进行生物等效性评价。结果表明，T 和R 制剂的t max 、c max 、AUC 024h、AUC 0均无显著性差异(P 0.05 ；T 制剂图2平均药-时曲线(n = 192. 2. 3标准曲线精密称取1盐酸盐对照品适量，用甲醇溶解配制成1浓度为1mg/ml的贮备液。将该贮备液用空白血浆稀释成1浓度为2、5、10、25、50、100、200ng/ml的系列

14、血浆。精密称取2盐酸盐对照品适量，用甲醇溶解并稀释成2浓度为100ng/ml的内标溶液。取上述含1的系列血浆，按“2. 2. 2”项下方法操作，进样测定。以1浓度(c 为横坐标，1与2的峰面积比(Y 为纵坐标，采用加权(1/c 2最小二乘法进行回归，得回归方程为Y = 0.0135c +0.00277(r = 0.9993，表明1浓度在2200ng/ml范围内与峰面积比线性关系良好。定量限为2ng/ml。2. 2. 4精密度与回收率19名健康受试者口服单剂量T 和R 制剂的平均药-时曲线见图2，可见基本相同。将血药浓度值录入DAS 1.0统计软件，计算各药动学参数(见表1 ，并进行生物等效性统

15、计分析。对T 和R 制剂的t max 进行非参数秩和检验，c max 和5 4 3 2c max 的90置信区间落在R 制剂的70143之间，AUC 的90置信区间均落在R 制剂的80125之间；以AUC 024h计算，T 制剂相对于R 制剂的生物利用度为(102.7±17.1 。结果表明两制剂具有生物等效性。3讨论人血浆中1测定多采用HPLC 法2-5，灵敏度较低，样品处理复杂。本研究采用甲醇沉淀血浆蛋白后直接进样的LC-MS/MS法，操作简捷、特异性好、干扰少，每个样品的测定仅需2min ，且灵敏度提高，定量限2ng/ml。在本研究中，受试者口服1制剂30mg 即可满足研究需要，服药剂量仅相当于文献1-5报道的1/31/2，所有受试者试验期间均未发生药物不良反应。本研究所得的药动学参数与文献1,3,4报道基本一致。参考文献：1徐红蓉, 汪红, 陈伟力, 等. 氨溴索分散片在健康志愿者的药代动力学和生物等效性J . 中国临床药理学杂志, 2006, 22(3 : 180-183.刘书铭, 周远大. 盐酸氨溴索口腔崩解片人体生物等效性研究