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1、中国学木论文网艾滋病论文医院检测的重要意义论文:艾滋病在医院检测的重要意义【摘要】目的探讨艾滋病在医院检测的重要意义。方法将我院2003年6月至2010年6月收集的住院患者3770份血液标本,在单个血清检测结果未知的条件下进行混合血清elisa法检测。结果3770分血清中采用混合血清法检测出hiv阳性者32例,该32例患者采用westernblot蛋白印迹法(wb)确诊31例,阳性率为0.82%,各科室间的hiv阳性无显著性差异,p0.05。结论加强对住院患者的hiv检测力度,对预防医源性感染,防止医务人员职业暴露具有重要的意义。【关键词】艾滋病;hiv;检测;意义艾滋病(aids),主要通过
2、人免疫缺陷病毒hiv进行传播,被誉为“史后世纪的瘟疫”,严重威胁着人类的健康和社会的发展,现今已经发展成为全球性的流行病1。目前,我国艾滋病的传播速度正在加快,流行区域不断扩大,流行形势十分严峻,检测这一病源最常用的方法是hiv抗体的检测。医院是各种疾病患者聚集地,人口密度大,很容易造成医源性感染。有研究表明,住院患者的hiv阳性率要显著高于普通人群的筛查结果。为了解住院患者hiv的感染情况,有效的预防医源性传染。现对我院2003年6月至2010年6月收集的住院患者的3770份血液标本进行hiv阳性检测,报告中国学木论文网vww.59168,net如下1材料与方法1.1血清标本:收集我院监测人
3、群的3770份血液标本,抽取监测人群的清晨空腹留取外周静脉血3ml,于普通真空采血管中,静置10min,以6000r/min,离心10min。分离血清后吸取50卩I放入无菌eppendorf管内,放于后-70C冰箱保存待检。另选400例健康体检者的血液标本进行hiv检测。1.2实验方法1.2.1试剂与仪器:hiv-1和hiv-2嵌合抗env18标记的过氧化物酶组成试剂盒由英科新创(厦门)科技有限公司提供,联免疫检测试剂盒购于上海科华生物技术有限公司,洗板机为郑州安图anthosfluio自动洗板机;微量加样器,上海雷勃分析仪器有限公司生产,westernblot蛋白印迹法检测试剂盒购自中山大学
4、达安基因股份有限公司提供,dycz-24dn型电泳仪,zs-3板式酶标仪,测定波长为450nm,参考波长为655nmo北京市六一仪器厂生产。1.2.2检测方法:混合血清检测:采用酶联免疫吸附试验(elisa)检测血清中免疫血清学标志物;以5个标本为一组,构成混合标本,混合后加一定量稀释液,保证每份待检血清在混合血清稀释后的浓度与单独检测时浓度一致,进行混合血清检测,操作步骤按照试剂盒说明进行,全部阴性血中国学木论文冈68,net清样品混合,1份弱阳性血清(于临界对照a值平均值),其余均为阴性血清样品2。westernblot蛋白印迹法(wb):bca法测定各样品蛋白浓度,按bca蛋白质定量试剂
5、盒操作说明操作,测定各样品浓度,确定上样量,沸水浴5min后进行上样,进行电泳蛋白分离。sds-page后的凝胶在转移缓冲液中漂洗后,用电转移仪转移到nc膜上(4C,100v,1h)。将膜置于5%的脱脂奶粉封闭液中,37C封闭2h。?封闭后的nc膜在tbst中摇床漂洗三次,每次10min。加入用抗体稀释液稀释的actin抗体(1:1000稀释),4C摇床上孵育过夜。tbst漂洗三次,每次10min。(tbst:含0.05%tween-20的tbs;抗体稀释液:5%脱脂奶粉)。加入5%脱脂奶粉稀释的辣根过氧化物酶标记的第二抗体(1:4000),室温摇床上温育1.5h。tbst漂洗三次,每次10min。将膜置于ecl显色工作液中15min,吸去多余液体,将膜放入保鲜膜中包好于暗盒中压上胶片曝光数分钟。将胶片进行显影定影。1.3统计学处理:采用spss16.0软件,率的比较采用卡方检验,以pv0.05为差异有统计学意义2结果3770分血清中采用
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