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文档简介

1、操作操作环境环境操作操作对象对象操作水平操作水平基本过程基本过程结果结果生物生物体外体外基基因因DNA分子分子水平水平剪切剪切连接连接导入导入表达表达定向地改定向地改造生物的造生物的遗传性状遗传性状项项目目Ecoli DNA连接酶连接酶T4DNA连接酶连接酶来来源源_特特点点只能只能“缝合缝合”具具有有 _的双链的双链DNA片段片段既可以既可以“缝合缝合”双链双链DNA片段互片段互补的补的 _，也可以，也可以“缝合缝合”双链双链DNA片段的片段的 _项目项目作用作用应用应用限制性核限制性核酸内切酶酸内切酶使特定部位的磷酸使特定部位的磷酸二酯键断裂二酯键断裂用于提取目的基因用于提取目的基因和切割

2、载体和切割载体DNA连接酶连接酶在在DNA片段之间重片段之间重新形成磷酸二酯键新形成磷酸二酯键用于目的基因和载用于目的基因和载体的连接体的连接项目项目DNA连接酶连接酶DNA聚合酶聚合酶相同点相同点作用实质相同，都是催化两个核苷酸之间形作用实质相同，都是催化两个核苷酸之间形成磷酸二酯键成磷酸二酯键不不同同点点是否需是否需要模板要模板不需要不需要需要需要接接DNA链链双链双链单链单链作用过程作用过程在两个在两个DNA片段间片段间形成磷酸二酯键形成磷酸二酯键将单个核苷酸加到已存将单个核苷酸加到已存在的核酸片段上，形成在的核酸片段上，形成磷酸二酯键磷酸二酯键作用结果作用结果将已存在的将已存在的DNA片片段连接段连接合成新的合成新的DNA分子分子用途用途基因工程基因工程DNA复

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