食品毒理学第五章

1、4/30/20221纯净水纯净水-经多重过滤去除了各种经多重过滤去除了各种微生物、杂质和有益的矿物质，微生物、杂质和有益的矿物质，突出的是饮用的安全性，它是一突出的是饮用的安全性，它是一种软水。种软水。矿泉水矿泉水-是种自然资源，由地层是种自然资源，由地层深处开采出来，含有丰富的稀有深处开采出来，含有丰富的稀有矿物质，略呈碱性，应该更有利矿物质，略呈碱性，应该更有利于健康，但是不排除有机物污染于健康，但是不排除有机物污染的可能。的可能。矿物质水矿物质水-在纯净水中按照人体在纯净水中按照人体浓度比例添加矿物质浓缩液配制浓度比例添加矿物质浓缩液配制而成的人工矿泉水。而成的人工矿泉水。识破识破“花样

2、花样”水水4/30/20222一般毒性作用（一般毒性作用（general toxicity effectgeneral toxicity effect）也称基础毒性作用也称基础毒性作用(basic toxicity effect) (basic toxicity effect) - -指毒物对机体产生的综合毒性效应。指毒物对机体产生的综合毒性效应。急性毒性作用急性毒性作用亚慢性毒性作用亚慢性毒性作用慢性毒性作用慢性毒性作用急性毒性试验急性毒性试验亚慢性毒性试验亚慢性毒性试验慢性毒性试验慢性毒性试验蓄积毒性实验蓄积毒性实验4/30/20223急性毒性试验急性毒性试验急性毒性急性毒性(acute

3、toxicity)(acute toxicity)概念：机体概念：机体( (人或试验动物人或试验动物) )一次接触一次接触或或2424小时内小时内 多次多次接触化学物后在接触化学物后在短期短期( (最长到最长到1414天天) )内内 所发生的毒性效应。所发生的毒性效应。包括一般行为、外观改变、大体形态变化以及死包括一般行为、外观改变、大体形态变化以及死亡效应，最主要观察指标是亡效应，最主要观察指标是LDLD5050。 4/30/20224试验试验目的目的测试和求出化学毒物对一种或几种试验动物的致死量测试和求出化学毒物对一种或几种试验动物的致死量( (以以LDLD5050表示表示) )以及以及其

4、它的急性毒性参数其它的急性毒性参数，了解急性毒作用强，了解急性毒作用强度。度。并通过并通过观察动物中毒表现和死亡的情况观察动物中毒表现和死亡的情况，了解急性毒作，了解急性毒作用性质、可能的靶器官和致死原因，提供化学毒物的急用性质、可能的靶器官和致死原因，提供化学毒物的急性中毒资料、初步评价对人体产生损害的危险性。性中毒资料、初步评价对人体产生损害的危险性。为为亚慢性、慢性毒性亚慢性、慢性毒性作用试验的染毒剂量设计提供参考作用试验的染毒剂量设计提供参考依据。依据。为毒理学为毒理学机制研究机制研究提供线索提供线索 。 4/30/20225试验方法试验方法 原则原则 ：急性毒性试验要求选择对化学毒物

5、的代谢和毒效急性毒性试验要求选择对化学毒物的代谢和毒效应表现与人的反应尽可能一致的试验动物。应表现与人的反应尽可能一致的试验动物。动物易于获得动物易于获得品系纯化品系纯化价格较低和易于饲养等条件。价格较低和易于饲养等条件。 4/30/202261 1实验动物的种属和品系实验动物的种属和品系最好用两种种属的动物最好用两种种属的动物啮齿类啮齿类: :小鼠、大鼠小鼠、大鼠/ /豚鼠或家豚鼠或家兔兔非啮齿类：狗或猴。非啮齿类：狗或猴。一一 实验动物的选择和要求实验动物的选择和要求急性皮肤毒性试验可选用成年大鼠、豚鼠或家兔，优急性皮肤毒性试验可选用成年大鼠、豚鼠或家兔，优先考虑白色家兔。而急性吸入毒性试

6、验和经口急性毒先考虑白色家兔。而急性吸入毒性试验和经口急性毒性试验则优先考虑大鼠。性试验则优先考虑大鼠。4/30/20227试验动物的年龄和体重：试验动物的年龄和体重：急性试验动物不宜过老或过幼，通常要求选择刚成年动物进急性试验动物不宜过老或过幼，通常要求选择刚成年动物进行试验，而且须是未曾交配和受孕的动物。例如：大鼠行试验，而且须是未曾交配和受孕的动物。例如：大鼠180180240g240g、小鼠、小鼠181825g25g、家兔、家兔2 22.5kg2.5kg、豚鼠、豚鼠200200250g250g、狗狗101015kg15kg。同一批试验动物体重变异范围不应超过该批动物平均体重的同一批试验

7、动物体重变异范围不应超过该批动物平均体重的2020。 3.3.试验动物的性别：试验动物的性别：急性毒性试验的主要内容是求急性毒性试验的主要内容是求LDLD5050，除特殊要求外，一般急，除特殊要求外，一般急性毒性试验对动物性别要求为性毒性试验对动物性别要求为雌雄各半雌雄各半。4/30/202284.4.动物数量与随机分组：动物数量与随机分组：大、小鼠等小动物大、小鼠等小动物 每组每组1010只只狗等大动物狗等大动物 每组每组6 6只只分组原则分组原则随机化原则随机化原则5.5.禁食：禁食：经消化道染毒时，要求试验前对动物禁食经消化道染毒时，要求试验前对动物禁食大鼠、小鼠大鼠、小鼠隔夜进食；染毒

8、后禁食隔夜进食；染毒后禁食4h4h大动物大动物每日上午喂食前染毒每日上午喂食前染毒染毒后继续禁食染毒后继续禁食2-4h2-4h，但在禁食时要保障饮水。，但在禁食时要保障饮水。6.6.实验动物的预检：实验动物的预检：选择健康动物选择健康动物1-21-2周的检疫期周的检疫期4/30/20229二二 实验动物的饲养环境实验动物的饲养环境恒定的温度：恒定的温度：222233湿度：湿度：30-70%30-70%照度：昼夜各半照度：昼夜各半饲料合格、饮水合格、垫料合格饲料合格、饮水合格、垫料合格4/30/202210三三 实验动物的染毒方法实验动物的染毒方法染毒途径（染毒途径（exposure route

9、sexposure routes）的原则：）的原则：模拟人在模拟人在生活和生产环境中实际接触受试物的途径和方式。生活和生产环境中实际接触受试物的途径和方式。最常用的染毒途径为最常用的染毒途径为经口、经呼吸道、经皮及注经口、经呼吸道、经皮及注射途径。射途径。 4/30/202211经口经口( (胃肠道胃肠道) )染毒染毒 : :灌胃法：灌胃法：最常用的染毒方式。最常用的染毒方式。 优点优点- -准确控制剂量准确控制剂量 缺点缺点- -误入气管造成动物死亡误入气管造成动物死亡 灌胃量：小鼠灌胃量：小鼠0.10.1 0.4 ml/10g0.4 ml/10g，不超过，不超过1 ml/1 ml/只只 大

10、鼠大鼠0.50.5 1 ml/10g1 ml/10g，不超过，不超过4 ml/4 ml/只只 家兔不超过家兔不超过5 ml/kg5 ml/kg 狗不超过狗不超过50 ml/10kg 50 ml/10kg 4/30/202212饲胃法：饲胃法：受试物拌入饲料或溶于饮水中，让动物自受试物拌入饲料或溶于饮水中，让动物自行摄入，按动物每日采食量或饮水量计算动物实际摄入行摄入，按动物每日采食量或饮水量计算动物实际摄入化学物的剂量。化学物的剂量。 优点：优点：简便，符合人类接触外源化合物的实际情况。简便，符合人类接触外源化合物的实际情况。 缺点：缺点：计算剂量不准确。计算剂量不准确。吞咽胶囊吞咽胶囊: :

11、 优点：优点：剂量准确，适用于有异味、有挥发性或易水解剂量准确，适用于有异味、有挥发性或易水解的受试化合物。的受试化合物。 缺点：缺点：适用于较大动物。适用于较大动物。4/30/202213经呼吸道染毒经呼吸道染毒: : 用于气体、蒸汽、粉尘、烟、雾等有毒用于气体、蒸汽、粉尘、烟、雾等有毒有害物质的毒性。有害物质的毒性。 气管注入气管注入- -仅用于制备化学物对肺脏的中毒模型仅用于制备化学物对肺脏的中毒模型 静式吸入静式吸入- -优点：优点：设备简单、操作方便、具有使用价值设备简单、操作方便、具有使用价值 缺点：缺点：影响受试物浓度；交叉接触影响结果影响受试物浓度；交叉接触影响结果 动式吸入动

12、式吸入- -设备要求高、受试物消耗大、设备要求高、受试物消耗大、 操作复杂、很少应用操作复杂、很少应用 4/30/202214经皮肤染毒经皮肤染毒(dermal exposure)(dermal exposure)：将化学物涂将化学物涂于动物体表，以观察化学物的经皮吸收毒性和于动物体表，以观察化学物的经皮吸收毒性和刺激性。刺激性。用于评价经皮肤吸收的外源化学物如化妆品、用于评价经皮肤吸收的外源化学物如化妆品、农药、外用药物、环境污染物及职业接触的一农药、外用药物、环境污染物及职业接触的一些工业毒物。些工业毒物。常用家兔和豚鼠常用家兔和豚鼠4/30/202215经注射途径染毒经注射途径染毒: :

13、静脉注射、肌肉注射、皮下静脉注射、肌肉注射、皮下注射和腹腔注射等。注射和腹腔注射等。主要用于绝对毒性研究、比较毒性研究、毒物主要用于绝对毒性研究、比较毒性研究、毒物静脉代谢动力学研究和中毒的急救药物筛选。静脉代谢动力学研究和中毒的急救药物筛选。4/30/202216四四 剂量选择及分组剂量选择及分组: :1 1查阅文献查阅文献了解化学毒物的结构式、分子量、常温常压下的状态、熔点、了解化学毒物的结构式、分子量、常温常压下的状态、熔点、沸点、密度、闪点、挥发度、蒸气压、水溶性和脂溶性等理沸点、密度、闪点、挥发度、蒸气压、水溶性和脂溶性等理化特性，生产批号及纯度，杂质成分与含量等。化特性，生产批号及

14、纯度，杂质成分与含量等。确定使用哪一种计算方法求确定使用哪一种计算方法求LDLD5050，然后再设计剂量分组。，然后再设计剂量分组。LDLD5050的计算方法常用寇氏法、概率单位法、霍恩氏法等。的计算方法常用寇氏法、概率单位法、霍恩氏法等。找出与受试化学毒物结构与理化性质近似的化学物的毒性资找出与受试化学毒物结构与理化性质近似的化学物的毒性资料，并以文献资料中相同的动物种系和相同接触途径所测得料，并以文献资料中相同的动物种系和相同接触途径所测得的的LDLD5050(LC(LC5050) )值作为受试化学物的预期毒性中值。值作为受试化学物的预期毒性中值。 4/30/2022172 2预试验预试验

15、 设定以此预期值作为待测化学物的中间剂量组，并在该设定以此预期值作为待测化学物的中间剂量组，并在该剂量的上下各设计剂量的上下各设计l l一一2 2个剂量组作为预试验剂量。个剂量组作为预试验剂量。根据确定的剂量组进行染毒。根据确定的剂量组进行染毒。根据预试验的死亡资料确定组距。根据预试验的死亡资料确定组距。 可根据以下公式计算出剂量分组：可根据以下公式计算出剂量分组： i=(lgLDi=(lgLD100100-lgLD-lgLD0 0) )(n-1)(n-1) 式中式中i i为组距为组距( (相邻的两个剂量组对数剂量之差相邻的两个剂量组对数剂量之差) )； n n为设计的剂量组数。为设计的剂量组

16、数。4/30/2022183 3正式试验正式试验一般来说、根据试验设计所选用的一般来说、根据试验设计所选用的LDLD5050计算方法来确计算方法来确定组数。例如几率单位法、定组数。例如几率单位法、寇氏法一般设寇氏法一般设6 61010个个剂量组；剂量组；霍恩法固定设霍恩法固定设4 4个剂量组。求得个剂量组。求得i i值后以值后以最低剂量组最低剂量组(LD(LD0 0或或LDLD1010) )的对数剂量加上一个的对数剂量加上一个i i值，值，即是第二个剂量组的对数剂量，依此类推直至最高即是第二个剂量组的对数剂量，依此类推直至最高剂量组，查各自的反对数即得出各组剂量的真实值。剂量组，查各自的反对数

17、即得出各组剂量的真实值。 1 2 3 4 5 6 1 2 3 4 5 6 LgLDLgLD0 0 LgLDLgLD0 0+i LgLD+i LgLD0 0+2i LgLD+2i LgLD0 0+3i LgLD+3i LgLD0 0+4i +4i 4/30/2022191 1 中毒症状和发生过程观察中毒症状和发生过程观察观察记录发生各种中毒症状的时间、症状表现观察记录发生各种中毒症状的时间、症状表现程度、发展过程、死亡前特征和死亡时间等。程度、发展过程、死亡前特征和死亡时间等。兴奋兴奋- -活动增加、骚动、窜跳、跳跃、呼吸加活动增加、骚动、窜跳、跳跃、呼吸加深加快等。深加快等。抑制抑制- -活动

18、减少、呆立、静卧、步态不稳、呼活动减少、呆立、静卧、步态不稳、呼吸困难等。吸困难等。4/30/2022202.2.死亡与死亡时间死亡与死亡时间 重点观察和记录每只动物死亡的时间，特别是最早出现死重点观察和记录每只动物死亡的时间，特别是最早出现死亡的时间以及各个剂量组动物的死亡数。亡的时间以及各个剂量组动物的死亡数。3.3.体重体重 体重可以反映动物中毒后的整体变化。体重可以反映动物中毒后的整体变化。 对存活动物尤其是对低于对存活动物尤其是对低于LDLD5050剂量组的存活动物应在观剂量组的存活动物应在观察期察期1414天内称量其体重的变化以便了解受试物引起毒效天内称量其体重的变化以便了解受试物

19、引起毒效应的持续时间。应的持续时间。 4/30/2022214.4.病理检查及其他指标病理检查及其他指标: : 对死亡的动物均应及时进行大体解剖和病理组织学检查，对死亡的动物均应及时进行大体解剖和病理组织学检查，肉眼观察肉眼观察主要脏器的大体病理变化，如脏器大小、外观、主要脏器的大体病理变化，如脏器大小、外观、色泽的变化，有无充血、出血、水肿或其它改变，对有色泽的变化，有无充血、出血、水肿或其它改变，对有改变的脏器进行取材做组织病理学检查。改变的脏器进行取材做组织病理学检查。 对存活动物在观察期结束时进行大体病理检查必要时对存活动物在观察期结束时进行大体病理检查必要时做组织做组织病理学检查病理

20、学检查。根据试验需要可进一步扩大观察项。根据试验需要可进一步扩大观察项目如体温、心电图、脑电图或进行某些目如体温、心电图、脑电图或进行某些生化指标生化指标测定测定等。等。4/30/2022225.LD5.LD5050的计算方法：的计算方法：改良寇氏法改良寇氏法概率单位法概率单位法霍恩氏法霍恩氏法4/30/202223实验结果的评价实验结果的评价外源化学物急性毒性分级（外源化学物急性毒性分级（WHO）毒性分级毒性分级大鼠一次经口大鼠一次经口LD50 (mg/kg)6只大鼠吸入只大鼠吸入4小时，死小时，死亡亡24只的浓度只的浓度(ppm)兔经皮兔经皮LD50(/mg/kg)对人可能致死的估计量对人

21、可能致死的估计量g/kg总量总量(g/60kg)剧毒剧毒11051510004/30/202224我国食品毒理急性毒性分级法我国食品毒理急性毒性分级法(1994)急性毒性分级急性毒性分级大鼠经口大鼠经口LD50(mg/kg)大致相当于大致相当于70kg人的致死量人的致死量6级级(极毒极毒)1稍尝稍尝,150001050克克4/30/202225在食品安全性毒理学评价过程中，在食品安全性毒理学评价过程中，LDLD5050 人的可能摄入量的人的可能摄入量的1010倍倍 表明化合物有被使用的希望，可进行表明化合物有被使用的希望，可进行下一步试验下一步试验4/30/202226经典急性毒性试验的局限性

22、经典急性毒性试验的局限性消耗的动物量大消耗的动物量大获得的信息有限获得的信息有限测得的测得的LDLD5050仅仅是一个近似值仅仅是一个近似值在安全性评价中仅评价动物死亡和简单的症在安全性评价中仅评价动物死亡和简单的症状观察是不够的，更需要的是生理学、血液状观察是不够的，更需要的是生理学、血液学及其它化验检查所提供的深入细致的毒性学及其它化验检查所提供的深入细致的毒性信息。信息。4/30/202227急性毒性试验常用的毒性参数：急性毒性试验常用的毒性参数：LDLD5050/LC/LC5050ZacZac （LD50/Limac） LDLD8484/LD/LD1616( (或或LCLC8484LC

23、LC1616) ) 剂量剂量反应曲线斜率反应曲线斜率 4/30/202228染发剂之所以会导致皮肤过敏、白血染发剂之所以会导致皮肤过敏、白血病等多种疾病，是因为染发剂中含有病等多种疾病，是因为染发剂中含有一种名叫一种名叫“对苯二胺对苯二胺”的化学物质。的化学物质。 对苯二胺是国际公认的一个致癌物质，对苯二胺是国际公认的一个致癌物质，对人体的危害已经得到国内外的广泛认对人体的危害已经得到国内外的广泛认同。同。 国外的研究还显示，经常染发的人群国外的研究还显示，经常染发的人群乳腺癌、皮肤癌、白血病、膀胱癌的发乳腺癌、皮肤癌、白血病、膀胱癌的发病率都会增加。病率都会增加。 4/30/202229羟基

24、苯甲酸脂羟基苯甲酸脂主要在肥皂、香波、除体臭剂和婴儿洗液等产品中用作防腐剂。具有杀菌功效，但同时也会诱发肿瘤。在一些乳腺肿瘤案例中，研究人员已将羟基苯甲酸脂视作患病诱因之一。 十二烷基硫酸钠十二烷基硫酸钠目前被广泛使用于肥皂、香波、剃须液、牙膏和沐浴液中，可能对人体肌肤造成刺激。苯甲醇苯甲醇增加香水、彩妆和染发剂的香气并发挥防腐作用，也可能刺激皮肤。 4/30/202230急性毒性急性毒性亚慢性毒性亚慢性毒性慢性毒性慢性毒性缺点：时间短缺点：时间短缺点：时间太长缺点：时间太长4/30/202231慢性实验动物染毒期限：慢性实验动物染毒期限：工业毒理学工业毒理学 3 36 6个月个月食品毒理学食

25、品毒理学 6 6个月个月1 1年年环境毒理学环境毒理学 6 6个月个月1 1年年致癌试验致癌试验 接近或等于动物的预期寿命接近或等于动物的预期寿命亚慢性实验动物染毒期限：亚慢性实验动物染毒期限：工业毒理学工业毒理学 1 13 3个月个月 食品毒理学食品毒理学 3 36 6个月个月4/30/202232( (一一) ) 概念：概念： 亚慢性毒性亚慢性毒性(subchronic toxicity)(subchronic toxicity)是指人是指人 或实验动物连续接触或实验动物连续接触较长时间较长时间、较大剂量较大剂量的外的外源化合物所引起的毒性效应。源化合物所引起的毒性效应。慢性毒性慢性毒性(

26、chronic toxicity)(chronic toxicity)是指人或实验是指人或实验动物长期动物长期( (甚至终生甚至终生) )反复接触低剂量的化反复接触低剂量的化学毒物所产生的毒性效应。学毒物所产生的毒性效应。4/30/202233（二）试验目的：（二）试验目的： 1.1.确定受试物亚慢性和慢性毒性的确定受试物亚慢性和慢性毒性的效应谱效应谱，对在急性及亚急性，对在急性及亚急性毒性试验中发现的毒作用提供新的信息，并发现在急性及亚急性毒性试验中发现的毒作用提供新的信息，并发现在急性及亚急性毒性试验中未发现的毒作用；毒性试验中未发现的毒作用； 2.2.研究受试物亚慢性和慢性毒作用的研究受

27、试物亚慢性和慢性毒作用的靶器官靶器官； 3.3.研究受试物亚慢性和慢性毒性研究受试物亚慢性和慢性毒性剂量剂量反应反应( (效应效应) )关系关系，确定，确定其观察到有害作用的最低剂量其观察到有害作用的最低剂量(LOAEL)(LOAEL)和未观察到有害作用的剂和未观察到有害作用的剂量（量（NOAELNOAEL），提出此受试物的安全限量参考值），提出此受试物的安全限量参考值; ; 4. 4.研究受试物亚慢性和慢性毒性研究受试物亚慢性和慢性毒性损害的可逆性损害的可逆性; ; 5. 5.亚慢性毒性试验为慢性毒性试验的剂量设计及观察指标选择亚慢性毒性试验为慢性毒性试验的剂量设计及观察指标选择提供依据提供

28、依据; ; 6. 6.确定不同动物物种对受试物亚慢性和慢性毒效应的差异，为确定不同动物物种对受试物亚慢性和慢性毒效应的差异，为将毒性研究结果外推到人将毒性研究结果外推到人提供依据提供依据。4/30/202234 （一）实验动物选择（一）实验动物选择 亚慢性毒性试验亚慢性毒性试验 年龄：年龄：大鼠大鼠80100g 狗狗 812月月 小鼠小鼠1015g数量：数量：小动物小动物20 大动物大动物6性别：性别：雌雄各半雌雄各半 慢性毒性试验慢性毒性试验年龄：年龄：大鼠大鼠 5070g 狗狗 8月月 小鼠小鼠 初断乳初断乳数量：数量：小动物小动物40 大动物大动物8性别：性别：雌雄各半雌雄各半4/30/

29、202235经口染毒：与饲料或饮水混合。经口染毒：与饲料或饮水混合。经呼吸道吸入：时间依试验而定，经呼吸道吸入：时间依试验而定，4-8 h4-8 h经皮肤染毒：经皮肤染毒：6 h/6 h/天天（三）实验动物染毒方式（三）实验动物染毒方式4/30/202236亚慢性毒性的剂量选亚慢性毒性的剂量选阴性对照组阴性对照组低剂量组低剂量组中剂量组中剂量组高剂量组高剂量组 急性毒性的阈剂量急性毒性的阈剂量 LDLD5050 1/20-1/5 1/20-1/5组距：组距：3-103-10倍，最低倍，最低不小于不小于2 2倍倍慢性毒性的剂量选择慢性毒性的剂量选择阴性对照组阴性对照组低剂量组低剂量组中剂量组中剂

30、量组高剂量组高剂量组 亚慢性阈剂量亚慢性阈剂量1/5-1/2 1/5-1/2 LDLD50501/10 1/10 组距：组距：2-52-5倍，最低不小倍，最低不小于于2 2倍倍（四）剂量选择与分组（四）剂量选择与分组4/30/2022371.1.一般综合性观察指标：一般综合性观察指标： 中毒症状：外观体征、行为活动、中毒症状：外观体征、行为活动、体重：综合反映动物全身健康状况的最基本指标之体重：综合反映动物全身健康状况的最基本指标之一一食物利用率：指动物每食入食物利用率：指动物每食入100g100g饲料所增加的体重饲料所增加的体重克数。克数。2. 2. 一般化验指标：血、尿液检查等。一般化验指

31、标：血、尿液检查等。（五）观察指标（五）观察指标4/30/2022383. 3. 病理学检查：病理学检查：尸检：凡在染毒过程中死亡的动物均应及时解尸检：凡在染毒过程中死亡的动物均应及时解剖，肉眼观察。剖，肉眼观察。脏器系数（脏脏器系数（脏/ /体比值体比值 ）：指某个脏器湿重在）：指某个脏器湿重在每每100g100g体重中所占的质量。（如肝体重中所占的质量。（如肝/ /体比，即体比，即( (全全肝湿重肝湿重/ /体重体重) ) 100 100 ）组织学检查：组织学检查：4.4.特异性指标：难度很大特异性指标：难度很大4/30/202239实验结果的评价实验结果的评价亚慢性毒性评价亚慢性毒性评价

32、亚慢性最大无作用剂量亚慢性最大无作用剂量（NOAEL)NOAEL)观察到损害作用的最低观察到损害作用的最低剂量（剂量（LOAEL) LOAEL) 。 NOAELNOAEL人的摄入量人的摄入量100100倍，放弃；倍，放弃；100100 NOAEL NOAEL 300300，进行慢性毒性；，进行慢性毒性； NOAEL NOAEL 300300，直接评价。，直接评价。慢性毒性评价慢性毒性评价慢性最大无作用剂量慢性最大无作用剂量（NOAEL)NOAEL)观察到损害作用的最低观察到损害作用的最低剂量（剂量（LOAEL) LOAEL) 。 慢性毒作用带慢性毒作用带ZchZch。NOAELNOAEL人的摄

33、入量人的摄入量5050倍，倍，放弃；放弃；50 NOAEL 50 NOAEL 100100，需专家进行评议；需专家进行评议； NOAEL NOAEL 100100，考虑允许使用。，考虑允许使用。4/30/202240 当化学毒物反复多次给动物染毒，化学毒物进当化学毒物反复多次给动物染毒，化学毒物进入机体的速度入机体的速度( (或总量或总量) )超过代谢转化的速度和超过代谢转化的速度和排泄的速度排泄的速度( (或总量或总量) )时，化学毒物或其代谢产时，化学毒物或其代谢产物就有可能在机体内逐渐增加并贮留，这种现物就有可能在机体内逐渐增加并贮留，这种现象称为化学毒物的象称为化学毒物的蓄积作用蓄积作

34、用(accumulation)(accumulation)。 一、基本概念一、基本概念4/30/202241蓄积作用实际上有二个含义：蓄积作用实际上有二个含义：物质蓄积物质蓄积(material accumulation):(material accumulation): 用化学方法测得机体内或某些组织脏器中存在该化学物或用化学方法测得机体内或某些组织脏器中存在该化学物或代谢产物代谢产物功能蓄积功能蓄积(functional accumulation)(functional accumulation) 不能检测，但会引起机体功能或形态结果发生一定程度的不能检测，但会引起机体功能或形态结果发生一

35、定程度的改变，这种变化可逐渐累积改变，这种变化可逐渐累积 化学毒物的化学毒物的蓄积作用是发生慢性中毒的物质基础蓄积作用是发生慢性中毒的物质基础，因此研因此研究化学毒物在机体内的蓄积性是评价化学毒物能否引起潜究化学毒物在机体内的蓄积性是评价化学毒物能否引起潜在慢性毒性的依据之一，也是卫生标准制订过程选择安全在慢性毒性的依据之一，也是卫生标准制订过程选择安全系数的主要依据。系数的主要依据。4/30/202242蓄积毒性试验是研究化学毒物基础毒性的重要内蓄积毒性试验是研究化学毒物基础毒性的重要内容之一，容之一，目的是通过试验求出蓄积系数目的是通过试验求出蓄积系数K K，了解化，了解化学毒物蓄积毒性的

36、强弱，学毒物蓄积毒性的强弱，并为慢性毒性试验及其并为慢性毒性试验及其他有关毒性试验的剂量选择提供参考。他有关毒性试验的剂量选择提供参考。4/30/202243( (一一) )蓄积系数法蓄积系数法 蓄积系数蓄积系数(accumulation coefficient)(accumulation coefficient)是多次是多次染毒使半数动物出现效应染毒使半数动物出现效应( (或死亡或死亡) )的累积剂量的累积剂量EDED5050(n)(n)与一次染毒使半数动物出现相同效应与一次染毒使半数动物出现相同效应( (或死亡或死亡) )的剂量的剂量EDED5050(1)(1)的比值，即：的比值，即：K

37、KEDED5050(n)/ED(n)/ED5050(1)(1)K KLDLD5050(n)/LD(n)/LD5050(1) (1) 二、试验方法及其评价二、试验方法及其评价4/30/202244 1 1固定剂量法：固定剂量法：一般常选用大、小鼠灌胃或腹腔注射方法进行染毒。一般常选用大、小鼠灌胃或腹腔注射方法进行染毒。先求出先求出LDLD5050，然后选取相同条件的，然后选取相同条件的4040只只( (或更多或更多) )实验动实验动物，分为两组，一为染毒组，一为对照组，每组至少物，分为两组，一为染毒组，一为对照组，每组至少2020只，雌雄各半。只，雌雄各半。剂量选择剂量选择:1:12020l l

38、50 LD50 LD5050，每日以固定剂量、定时，每日以固定剂量、定时和相同途径进行染毒和相同途径进行染毒, ,试验期间观察记录每组动物死亡试验期间观察记录每组动物死亡数。当试验组累积发生一半动物死亡即可终止试验。数。当试验组累积发生一半动物死亡即可终止试验。计算累积总接触剂量计算累积总接触剂量LDLD5050(n)(n)，根据公式计算，根据公式计算K K值，然值，然后依表进行评价。但若接触剂量已累积达到后依表进行评价。但若接触剂量已累积达到5 5个个LDLD5050剂剂量，也可终止试验。量，也可终止试验。4/30/202245 2 2剂量递增法：剂量递增法： 当化学毒物引起动物累积死亡一半时即可终止试验，当化学毒物引起动物累积死亡一半时即可终止试验，计算计算K K值进行评价。一般来说，在试验第值进行评价。一般来说，在试验第2l2l天也可结束天也可结束试验，因为这之前如果动物没有死亡或死亡数不足一半，试验，因为这