生物大分子的电子显微镜技术

1、会计学1生物大分子的电子显微镜技术生物大分子的电子显微镜技术DNA 双链dsDNA、线性的， 超螺旋的，单链 ssDNARNA 单链 ssRNA 、线性的，三叶草形的 双链dsRNA下相液下相液:0.050.25M醋酸铵水溶液或双蒸水醋酸铵水溶液或双蒸水甲酰铵法甲酰铵法:上相液组成上相液组成:Tris-Na3EDTA(PH8.5) 0.10.01M 核酸样品核酸样品 0.51ugml 细胞色素细胞色素C 0.050.1mgml 甲酰铵甲酰铵 4050%下相液下相液:0.1MTris0.01MNa3EDTA(PH8.5),20%甲酰铵甲酰铵.展层展层1.样品溶液样品溶液(上相溶上相溶液液)2.展

2、层液展层液(下相溶液下相溶液) 3.滑石粉滑石粉 4.载玻片载玻片 5.加样器加样器12345.沾网沾网:将铜网的膜面朝下将铜网的膜面朝下,沾取液面上的样品沾取液面上的样品脱水与染色脱水与染色铜网以铜网以45角插入角插入无水乙醇片刻无水乙醇片刻,进行进行脱水脱水,以同样方法在以同样方法在2%PTA中染色中染色金属投影金属投影:在真空喷镀仪中在真空喷镀仪中对样品进行重金对样品进行重金属旋转投影属旋转投影.适合微量样品的操作适合微量样品的操作,单滴展单滴展开法的展层样品液只需开法的展层样品液只需510ul,操作方法与展层方法相同操作方法与展层方法相同,可可用用16孔酶标板代用展层容器孔酶标板代用展

3、层容器 病毒，噬菌体等含核酸的细胞器，不进行提取核酸，病毒，噬菌体等含核酸的细胞器，不进行提取核酸，利用展层上相利用展层上相液液（2M2M醋酸铵），下醋酸铵），下相相液液（0.2M醋酸铵醋酸铵或水溶液）或水溶液）盐浓度的巨大差异，高盐中的病毒遇到低渗盐浓度的巨大差异，高盐中的病毒遇到低渗溶液而破裂，核酸分子溶液而破裂，核酸分子释放，并与细胞色素释放，并与细胞色素CC结合，随结合，随着单分子层展开，因此，释放与展层在一步完成着单分子层展开，因此，释放与展层在一步完成从一种非洲蛙的卵母细胞核中提取的DNA的8个基因片段。杂交重复分子X174的DNA,长度约1.8 m的环状DNA(双链DNA)病毒病

4、毒DNADNA在细菌中复制时，蛋白质结在细菌中复制时，蛋白质结合在病毒合在病毒DNADNA的特别部分，也就是的特别部分，也就是DNADNA复制的开始点。复制的开始点。能够看到大肠杆菌染色体能够看到大肠杆菌染色体的二个片段，下边一个是的二个片段，下边一个是活动中的。可以看到活动中的。可以看到mRNAmRNA的转录和蛋白质的翻译过的转录和蛋白质的翻译过程。程。基因上的RNA聚合酶杂交的杂交的DNADNA分子分子 二条二条DNADNA分子分子 经过变性、退火处理形成缺失环和经过变性、退火处理形成缺失环和 置换泡置换泡适合微量样品的操作适合微量样品的操作,单滴展单滴展开法的展层样品液只需开法的展层样品液只需510ul,操作方法与展层方法相同操作方法与展层方法相同,可可用用16孔酶标板代用展层容器孔酶标板代用展层容器X174的DNA,长度约1.8 m的环状DNA(双链DNA)病毒病毒DNADNA在细菌中复制时，