微33+其他病毒及朊粒

1、 狂犬病病毒狂犬病病毒 Rabies Virus人乳头瘤病毒人乳头瘤病毒 Human Papillomavirus 朊粒（朊粒（prion）主要内容主要内容 狂犬病毒、狂犬病毒、HPV、朊粒生物学性状、朊粒生物学性状 狂犬病毒、狂犬病毒、HPV、朊粒致病性。、朊粒致病性。 狂犬病毒微生物学检查方法，防治原则狂犬病毒微生物学检查方法，防治原则Rabies VirusRabies Virus狂犬病狂犬病k 又称又称“恐水症恐水症”，是一种中枢神经系统传染病；，是一种中枢神经系统传染病；人畜共患病人畜共患病k 主要症状：高度兴奋、恐水、咽肌痉挛不能进主要症状：高度兴奋、恐水、咽肌痉挛不能进食、全身进

2、行性瘫痪；呼吸和循环衰竭而死亡。食、全身进行性瘫痪；呼吸和循环衰竭而死亡。k 病死率几乎病死率几乎1001、形态结构、形态结构v有有包膜病毒包膜病毒，弹状，弹状，6085X130300nm，衣壳为螺旋对称形，衣壳为螺旋对称形，有刺突，有刺突，包膜有大量糖蛋白突起血凝素包膜有大量糖蛋白突起血凝素v核心为核心为 (-)ssRNAv感染细胞胞质内形成嗜酸性包涵体感染细胞胞质内形成嗜酸性包涵体-Negri body（内基小体内基小体）一、生物学性状一、生物学性状 狂犬病毒狂犬病毒Rabies Virus病毒复制病毒复制 易感动物范围大易感动物范围大 家畜（狗、猫）家畜（狗、猫） 野生动物（狼、狐狸、野

3、生动物（狼、狐狸、猴、蝙蝠等）猴、蝙蝠等）在中枢神经细胞中增殖，在中枢神经细胞中增殖，形成形成内基氏小体内基氏小体。内基小体内基小体：狂犬病毒狂犬病毒在神经细胞内增殖，可形成在神经细胞内增殖，可形成胞浆内嗜酸性的、圆形或椭圆形的包涵体，可辅胞浆内嗜酸性的、圆形或椭圆形的包涵体，可辅助诊断狂犬病。助诊断狂犬病。嗜神经性嗜神经性内基小体内基小体病毒病毒AgAg和毒力变异和毒力变异 根据包膜糖蛋白根据包膜糖蛋白G G蛋白，分成蛋白，分成野毒株野毒株（Wild strain） 固定毒株固定毒株（Fixed strain） 变异株变异株对家兔致病力强对家兔致病力强，对人和犬的对人和犬的 致病力减弱致病力

4、减弱 可制成疫苗可制成疫苗抵抵抗力抗力 不强不强：对热敏感对热敏感 56 C 30-60 min或或100 C 2 min可灭活。可灭活。 在脑组织中室温或在脑组织中室温或4可持续可持续1 12 2周周灭活病毒：灭活病毒：酸、碱、有机溶剂、表面活性剂酸、碱、有机溶剂、表面活性剂 （肥皂水、离子型或非离子型去垢剂）肥皂水、离子型或非离子型去垢剂）等敏感等敏感*易感动物：易感动物： 家畜和野生动物家畜和野生动物 蝙蝠可能是重要蝙蝠可能是重要 的储存宿主的储存宿主致致病性病性 * 动物间狂犬病动物间狂犬病：患病动物患病动物咬咬伤伤健康动物而传播。健康动物而传播。 人被患病动物咬伤致病人被患病动物咬伤

5、致病。 发病率为发病率为30%-60%。*一旦发病，一旦发病，死亡率达死亡率达100%。致病性与免疫性致病性与免疫性发病机制发病机制 人被病犬咬伤人被病犬咬伤病毒随犬唾液经伤口进入人体病毒随犬唾液经伤口进入人体（v v在入侵部位的肌肉细胞中增殖）在入侵部位的肌肉细胞中增殖）通过神经肌肉接头侵入周围神经通过神经肌肉接头侵入周围神经神经节直至中枢神经系统神经节直至中枢神经系统（脑组织中病毒迅速增殖扩散）（脑组织中病毒迅速增殖扩散）沿传出神经传至唾液腺及其他组织。沿传出神经传至唾液腺及其他组织。前驱期：前驱期：发热、伤口处感觉异常、烦躁不安等发热、伤口处感觉异常、烦躁不安等麻痹期：麻痹期：昏迷、呼吸

6、和循环衰竭昏迷、呼吸和循环衰竭死亡死亡（病死率几乎（病死率几乎100100）2 24 4天天兴奋期：兴奋期：恐光、恐水、恐声、阵发性咽喉肌痉挛恐光、恐水、恐声、阵发性咽喉肌痉挛3 35 5天天临床表现临床表现潜伏期：潜伏期：通常通常3-83-8周周长至数年长至数年典型临床表现：狂犬病（典型临床表现：狂犬病（） * 可诱导机体产生可诱导机体产生中和抗体中和抗体，中和游离病毒。，中和游离病毒。* 疫苗接种对预防该病有效。疫苗接种对预防该病有效。* 抗体对细胞内病毒无作用，可能会因病抗体对细胞内病毒无作用，可能会因病 理免疫加重疾病。理免疫加重疾病。免免疫性疫性微生物学检查微生物学检查v临床表现临床

7、表现病史病史诊断诊断 观察咬人动物观察咬人动物710d，如观察如观察期间动物发病，取动物脑部海期间动物发病，取动物脑部海马回马回查病毒抗原或内基小体查病毒抗原或内基小体v免疫荧光免疫荧光法：法： 检测检测病毒抗原病毒抗原vRT-PCR：检测病毒核酸检测病毒核酸四、防治原则：四、防治原则：1、控制犬类，普及家犬预防接种、控制犬类，普及家犬预防接种高危人群（兽医、饲养员）注意个人防护高危人群（兽医、饲养员）注意个人防护2、人被咬伤后：、人被咬伤后： 处理伤口处理伤口 3%-5%皂水或清水皂水或清水-75%酒精酒精/碘酒碘酒 被动免疫被动免疫 抗狂犬病马血清抗狂犬病马血清 抗狂犬病人抗狂犬病人Ig

8、主动免疫主动免疫 灭活疫苗（灭活疫苗（0, 3, 7, 14, 28d）Human Papillomavirus，HPV 主要感染皮肤粘膜细胞，引起增生性病变主要感染皮肤粘膜细胞，引起增生性病变 种类有种类有100多型多型 高危型高危型16,18引起：引起：宫颈癌宫颈癌 低危型：低危型：6,11引起：引起：生殖器尖锐湿疣生殖器尖锐湿疣* 球形球形，无包膜无包膜，50nm，衣壳呈衣壳呈2020面体立体对称面体立体对称* 核酸为核酸为双链环状双链环状DNA*E5、E6、E7基因：使细胞转化基因：使细胞转化-致癌致癌1 1、生物学性状：、生物学性状：二、致病性二、致病性 根据感染部位的不同，根据感染

9、部位的不同， HPV分为分为：嗜皮肤和嗜粘膜：嗜皮肤和嗜粘膜 致病机制：致病机制： 病毒复制病毒复制诱导上皮细胞增殖诱导上皮细胞增殖，使表皮增厚和角化，由，使表皮增厚和角化，由此形成乳头状瘤，也称疣。此形成乳头状瘤，也称疣。 高危型别高危型别HPV的一段游离基因可插入宿主染色体的任的一段游离基因可插入宿主染色体的任意位置，导致意位置，导致细胞转化细胞转化。 传播方式传播方式： 直接直接/间接接触，性传播，新生儿垂直传播间接接触，性传播，新生儿垂直传播HPVHPV引起宫颈癌机制示意图引起宫颈癌机制示意图二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性疾病特点疾病特点不引起病毒血症不引起病毒血症多样性：疣、尖

10、锐多样性：疣、尖锐湿疣、喉乳头瘤湿疣、喉乳头瘤与宫颈癌有关与宫颈癌有关HPVHPV型别型别相关疾病相关疾病1、2、3、43、1076、116、1116、18、31、33等等57b12、32寻常疣寻常疣扁平疣扁平疣屠夫寻常疣屠夫寻常疣喉及口腔乳头瘤喉及口腔乳头瘤尖锐湿疣尖锐湿疣子宫颈癌子宫颈癌鼻腔良鼻腔良/恶性肿瘤恶性肿瘤口腔癌口腔癌HPVHPV型与人类疾病型与人类疾病寻常疣寻常疣(HPV1,2,4(HPV1,2,4型型) )跖疣跖疣扁平疣（扁平疣（HPV 3，10型）型）尖锐湿疣尖锐湿疣(HPV6,11型型)四、微生物学检查四、微生物学检查核酸检测核酸检测-PCR-PCR，核酸杂交法，核酸杂交

11、法血清学检测血清学检测WBWB免疫印迹法免疫印迹法三、免疫性三、免疫性感染后可以产生感染后可以产生AbAb，但是无保护作用，但是无保护作用，容易容易反复感染反复感染。* 治疗方法治疗方法 局部涂药局部涂药 用激光、冷冻、电灼或手术等方法除去疣体用激光、冷冻、电灼或手术等方法除去疣体* 预防预防 避免接触避免接触 HPV-VLP疫苗：二价（疫苗：二价（16/18型）疫苗型）疫苗 四价（四价（6/11/16/18型）疫苗型）疫苗四、防治原则四、防治原则中国可以接种中国可以接种HPV疫苗疫苗20062006年年6 6月月，HPVHPV疫苗获得美国食品药品监督管理局疫苗获得美国食品药品监督管理局（FD

12、AFDA）批准，成为世界上第一个预防癌症的疫苗。）批准，成为世界上第一个预防癌症的疫苗。 20162016年年7 7月月1818日日， 葛兰素史克公司宣布：葛兰素史克公司宣布： 希瑞适（希瑞适（CervarixCervarix，HPVHPV疫苗疫苗 1616型和型和1818型型 ） 获得中国许可，成为国内首获得中国许可，成为国内首个获批的预防宫颈癌的个获批的预防宫颈癌的HPVHPV疫苗。疫苗。 我们用的我们用的HPV疫苗疫苗是否过时？是否过时？默沙东旗下的默沙东旗下的 “佳达修佳达修”（Gardasil）HPV 4价疫苗。价疫苗。9价疫苗价疫苗：增加了：增加了31、33、45、52和和58 五

13、种亚型，对病毒的覆五种亚型，对病毒的覆盖面也达到了盖面也达到了90%。 第第34章章 朊粒朊粒 PrionProteinaceous infeciousProteinaceous infecious particle particle朊粒（朊粒（prion）v 概念概念： 是一种由是一种由正常宿主细胞正常宿主细胞基因编码的、基因编码的、构象异常的蛋白构象异常的蛋白质质，无核酸成分，具有自我复制能力和无核酸成分，具有自我复制能力和传染性。传染性。v 是是人和动物人和动物传染性海绵状脑病传染性海绵状脑病（TSETSE）的病原体。）的病原体。Stanley Prusiner.Prion resear

14、cher and 1997 Nobel Prize winnerv生物学特性生物学特性：疏水性糖蛋白，疏水性糖蛋白，27-30KD，存在，存在2种不同构象。种不同构象。正常：正常：PrPC，异常：，异常：PrPsc传染性海绵状脑病传染性海绵状脑病（transmissible spongiform encephalopathy, TSE） * 动物动物TSE，如：，如： 羊瘙痒病羊瘙痒病 牛海绵状脑病牛海绵状脑病（BSE）疯牛病疯牛病 * 人类人类TSE，如：，如： 库鲁病库鲁病（kuru disease） 克克-雅病变种雅病变种（variant CJD, v-CJD）PrPC 与与 PrPSC

15、* * 正常宿主细胞具有编码产生朊蛋白的基因，人正常宿主细胞具有编码产生朊蛋白的基因，人类类PrP基因位于第基因位于第20号染色体，小鼠号染色体，小鼠PrP基因位基因位于第于第2号染色体号染色体。* * PrPC与与PrPsc由由同一染色体基因编码同一染色体基因编码，其氨基酸，其氨基酸序列完全一致（序列完全一致（253254aaaa），），差别差别在于它们在于它们空间构象上的差异空间构象上的差异。PrPC 与与 PrPSC* 正常正常情况下，情况下，细胞细胞PrP基因编码产生细胞朊蛋基因编码产生细胞朊蛋白（白（cellular prion protein, PrPC），），PrPC以以螺旋螺旋

16、为主为主，对蛋白酶，对蛋白酶K敏感，无敏感，无致病致病性。性。* 某些条件下，某些条件下，PrPC构型发生构型发生异常异常变化变化（以（以折叠折叠为主为主）形成致病的形成致病的PrPsc（羊瘙痒病朊蛋白羊瘙痒病朊蛋白，scrapie prion protein），对蛋白酶对蛋白酶K有抗性，具有有抗性，具有致病性与传染性致病性与传染性。抵抗力抵抗力 Prion对理化因素有对理化因素有很强的抵抗力很强的抵抗力 * 抵抗蛋白酶抵抗蛋白酶K的消化作用；的消化作用； * 标准的高压蒸气灭菌（标准的高压蒸气灭菌（121.3, 20 min）不能破）不能破坏坏Prion，需高压蒸气灭菌，需高压蒸气灭菌134

17、、2h，才能使，才能使其失去传染性。其失去传染性。 * 对辐射、紫外线、及常用消毒剂有很强的抗性。对辐射、紫外线、及常用消毒剂有很强的抗性。人和动物的人和动物的Prion病病 羊瘙痒病羊瘙痒病 水貂传染性脑病水貂传染性脑病 鹿慢性消瘦症鹿慢性消瘦症 牛海绵状脑病牛海绵状脑病 猫海绵状脑病猫海绵状脑病库鲁病库鲁病（kuru disease）克雅病克雅病格斯特曼格斯特曼-斯召斯列综合征斯召斯列综合征致死性家族失眠征致死性家族失眠征克雅病变种克雅病变种 prion病共同特征病共同特征： 1. 潜伏期长潜伏期长（数年（数年-数十年），数十年）， 2. 慢发病毒感染慢发病毒感染：一旦发病，进行性加重致死

18、亡的：一旦发病，进行性加重致死亡的中枢神经系统的慢性退化性疾患。中枢神经系统的慢性退化性疾患。 3. 病理学特点病理学特点：大脑皮质神经元退化，空泡变性，：大脑皮质神经元退化，空泡变性， 形成淀粉样斑块，成为海绵样脑病或白质脑病。形成淀粉样斑块，成为海绵样脑病或白质脑病。 4. 免疫原性低免疫原性低，不能诱导特异性免疫应答，不能诱导特异性免疫应答 v-CJD病人大脑组织切片：示病人大脑组织切片：示海绵状海绵状病变病变（左）和淀粉样蛋白沉淀（右）（左）和淀粉样蛋白沉淀（右）人类人类Prion病病的的传播途径传播途径* 传染性传染性（TSE）：）： 如库鲁病如库鲁病、克雅病变种克雅病变种 多种途径

19、传播多种途径传播（消化道、血液、神经及医源性消化道、血液、神经及医源性） * 遗传性遗传性： 如家族性克雅病如家族性克雅病，与遗传有关与遗传有关（PrP基因突变）基因突变） * 散发性散发性： 如散发性克雅病如散发性克雅病，传播途径尚不明传播途径尚不明 多种途径传播多种途径传播途径途径关于库鲁病关于库鲁病（Kurus disease） 20世纪，新几内亚局部流行，主要症状：震颤、共济世纪，新几内亚局部流行，主要症状：震颤、共济失调、脑退化痴呆，渐至完全丧失运动能力，失调、脑退化痴呆，渐至完全丧失运动能力，36个个月内因衰竭而死亡。月内因衰竭而死亡。 Kuru：恐惧或寒颤，故称库鲁病，以女性和儿童居多。：恐惧或寒颤，故称库鲁病，以女性和儿童居多。 美国医学家盖杜赛克美国医学家盖杜赛克,1955年开始进行年开始进行20年研究，病毒年研究，病毒引起，与食用人肉的祭祀方式密切关联引起，与食用人肉的祭祀方式密切关联 1968年停止该仪式，拯救了一个部落，盖杜赛克获得年停止该仪式，拯救了一个部落，盖杜赛克获得了了1976年诺贝尔医学奖。年诺贝尔医学奖。患库鲁病的儿童患库鲁病的儿童疯牛病疯牛病，与病牛接触或进食病牛肉是，与病