卵母细胞的采集和培养课件

1、卵母细胞的采集和培养。3.23.2体外受精和早期体外受精和早期(zoq)(zoq)胚胎培养胚胎培养 一、教学目标：一、教学目标： 1.简述哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤。简述哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤。 2.简述哺乳动物胚胎的早期培养方法。简述哺乳动物胚胎的早期培养方法。 3.认同体外受精在家畜认同体外受精在家畜(jich)快速繁殖中的重要意义。快速繁殖中的重要意义。 二、教学重点：二、教学重点： 1.体外受精在家畜快速繁殖中的重要意义。体外受精在家畜快速繁殖中的重要意义。 2.哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤。哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤。 三、教学难点：三、教学难点：

2、1. 卵母细胞的采集和培养。卵母细胞的采集和培养。 2. 精子的采集和获能。精子的采集和获能。第一页，共三十二页。卵母细胞的采集和培养。19781978年年7 7月月2525日世界日世界(shji)(shji)首例试管婴儿首例试管婴儿第二页，共三十二页。卵母细胞的采集和培养。19881988年年3 3月月1010日我国首例试管婴儿日我国首例试管婴儿(sh un yn r)(sh un yn r)第三页，共三十二页。卵母细胞的采集和培养。19921992年我国首例三胞胎试管婴儿年我国首例三胞胎试管婴儿(sh un yn r)(sh un yn r)第四页，共三十二页。卵母细胞的采集和培养。根据资

3、料回答下列问题：根据资料回答下列问题：1.1.资料上用到了什么生物技术？资料上用到了什么生物技术？ 试管婴儿技术试管婴儿技术（包括体外受精、胚胎体外培（包括体外受精、胚胎体外培养）和养）和胚胎移植技术胚胎移植技术。2.2.试管婴儿和母亲正常怀孕试管婴儿和母亲正常怀孕(hui yn)(hui yn)，生产的过程，生产的过程有何异同？有何异同？相同之处：相同之处：都通过有性生殖产生，在母体子宫内发都通过有性生殖产生，在母体子宫内发育形成胎儿育形成胎儿。不同之处：不同之处：受精作用在体外，并在体外发育成早期受精作用在体外，并在体外发育成早期胚胎进行胚胎移植胚胎进行胚胎移植。第五页，共三十二页。卵母细

4、胞的采集和培养。试管动物技术：试管动物技术： 通过通过 使卵子和精子在使卵子和精子在 下成熟和受精，并通过培养下成熟和受精，并通过培养(piyng)发育成发育成 后，再经移植产后，再经移植产生后代的技术。生后代的技术。体外条件体外条件(tiojin)人工人工(rngng)操作操作早期胚胎早期胚胎第六页，共三十二页。卵母细胞的采集和培养。 国产奶牛国产奶牛：年均产奶量：年均产奶量30003000公斤左右公斤左右 国际良种奶牛国际良种奶牛：年均产奶量：年均产奶量1000010000公斤左右公斤左右 引进一头良种成年奶牛需要引进一头良种成年奶牛需要3 3万万5 5万元；万元； 牛的生育率低，一头牛一

5、胎只生一只，一生牛的生育率低，一头牛一胎只生一只，一生(yshng)(yshng)只能生育四五次。只能生育四五次。 牛的生育率虽然很低，但是牛的卵母细胞却相当牛的生育率虽然很低，但是牛的卵母细胞却相当的多，其卵巢中卵母细胞数目要比一生中排卵数的多，其卵巢中卵母细胞数目要比一生中排卵数多多10001000倍左右；倍左右； 公牛产生的精子数目就更多了。公牛产生的精子数目就更多了。一、从试管一、从试管(shgun)牛牛说起说起第七页，共三十二页。卵母细胞的采集和培养。试管动物技术试管动物技术(jsh)过程：过程：第一步：体外受精第一步：体外受精(t wi shu jn) 第二步：胚胎的早期第二步：胚

6、胎的早期(zoq)培养培养第三步：胚胎移植第三步：胚胎移植第八页，共三十二页。卵母细胞的采集和培养。胚胎胚胎(piti)移移植植采集采集(cij)良种母牛的卵母细胞良种母牛的卵母细胞卵母细胞的体外培养卵母细胞的体外培养(piyng)采集良种公牛精子采集良种公牛精子精子体外获能精子体外获能体外受精体外受精良种牛体外受精胚胎良种牛体外受精胚胎受体牛受体牛良种犊牛良种犊牛成熟期牛成熟期牛屠宰加工厂屠宰加工厂市场市场采集卵巢中的采集卵巢中的卵母细胞卵母细胞“试管牛试管牛”工厂化生产的技术流程图工厂化生产的技术流程图第九页，共三十二页。卵母细胞的采集和培养。19821982年世界年世界(shji)(sh

7、ji)首例试管牛犊问世首例试管牛犊问世 实现良种牛快速大量繁殖实现良种牛快速大量繁殖(fnzh)(fnzh)首先要做的是首先要做的是 和和 的培养。的培养。体外受精体外受精(t wi shu jn)早期胚胎早期胚胎第十页，共三十二页。卵母细胞的采集和培养。 主要包括主要包括 、 和和 等几个等几个(j )(j )主要步骤主要步骤 。概念：采取概念：采取(ciq)雌性雌性动物的动物的 和雄和雄性动物的性动物的 ，使，使其在其在 中受精。中受精。二、体外受精二、体外受精(t wi shu jn)卵卵母母细胞细胞精子精子试管试管卵卵母母细胞的采集细胞的采集精子的获取精子的获取受精受精第十一页，共三十

8、二页。卵母细胞的采集和培养。1.1.卵母细胞的采集卵母细胞的采集(cij)(cij)和培和培养养 对不同动物对不同动物, ,采集卵母细胞的方法不同。采集卵母细胞的方法不同。 实验动物如小鼠、兔，以及家畜猪、羊等实验动物如小鼠、兔，以及家畜猪、羊等卵细卵细胞的采集胞的采集： 最常用的方法是最常用的方法是卵巢卵巢(luncho)(luncho)经过经过 处理，处理，具体做法具体做法是给供体注射是给供体注射 ，使一头母畜，使一头母畜一次排出比自然情况下多几倍到十几倍的卵子，一次排出比自然情况下多几倍到十几倍的卵子，之后从之后从 中冲取卵子，直接与获能的精子在体中冲取卵子，直接与获能的精子在体外受精。

9、外受精。超数排卵超数排卵促性腺激素促性腺激素输卵管输卵管第十二页，共三十二页。卵母细胞的采集和培养。 大家畜或大型大家畜或大型(dxng)(dxng)动物，如牛，动物，如牛，卵细胞的采集卵细胞的采集： 从屠宰场已屠宰母畜的从屠宰场已屠宰母畜的 中采集卵母细胞，中采集卵母细胞，也可以借助也可以借助 、 或或 等工具确定卵泡位置，直接从活体动物中吸等工具确定卵泡位置，直接从活体动物中吸取泡卵液（连同卵母细胞）取出，在体外进行人工取泡卵液（连同卵母细胞）取出，在体外进行人工培养，使其成熟。培养，使其成熟。卵巢卵巢(luncho)超声波超声波(B超超)探测仪探测仪内窥镜内窥镜腹腔镜腹腔镜第十三页，共三

10、十二页。卵母细胞的采集和培养。牛卵巢牛卵巢(luncho)第十四页，共三十二页。卵母细胞的采集和培养。B B超活采仪超活采仪第十五页，共三十二页。卵母细胞的采集和培养。第十六页，共三十二页。卵母细胞的采集和培养。第十七页，共三十二页。卵母细胞的采集和培养。第十八页，共三十二页。卵母细胞的采集和培养。第十九页，共三十二页。卵母细胞的采集和培养。活活体体(hu t)采采集集的的牛牛卵卵母母细细胞胞第二十页，共三十二页。卵母细胞的采集和培养。第二十一页，共三十二页。卵母细胞的采集和培养。第二十二页，共三十二页。卵母细胞的采集和培养。第二十三页，共三十二页。卵母细胞的采集和培养。第二十四页，共三十二页

11、。卵母细胞的采集和培养。2.2.精子精子(jngz)(jngz)的收集和获的收集和获能能 收集精子的收集精子的方法有：方法有：假阴道假阴道(yndo)法法手握法手握法电刺激法电刺激法第二十五页，共三十二页。卵母细胞的采集和培养。 在体外受精前，要对精子进行在体外受精前，要对精子进行(jnxng)获能处理。通常获能处理。通常采用的体外获能方法有采用的体外获能方法有 和和 两种。两种。 对于对于 、 和和 的精子，一般采用的精子，一般采用培养培养法法；对于；对于 、 等家畜的精子常用等家畜的精子常用化学法化学法。培养法培养法：精子在：精子在获能液获能液中获能。中获能。化学诱导法化学诱导法：精子：精

12、子放在放在一定浓度的一定浓度的肝素肝素或或钙离子载体钙离子载体A23187溶液溶液中，用化学药物诱导获能。中，用化学药物诱导获能。培养培养(piyng)法法化学化学(huxu)诱导诱导法法啮齿动物啮齿动物家兔家兔猪猪牛牛羊羊第二十六页，共三十二页。卵母细胞的采集和培养。3.3.受精受精(shu jng)(shu jng) 获能的精子和获能的精子和培养成熟的卵子，培养成熟的卵子，一般情况下在一般情况下在 或或中完成受精中完成受精(shu jng)过程。过程。获能溶液获能溶液(rngy)专用受精溶液专用受精溶液第二十七页，共三十二页。卵母细胞的采集和培养。三、胚胎的早期三、胚胎的早期(zoq)培培

13、养养概念：是应用人工概念：是应用人工(rngng)创造条件，对获取的创造条件，对获取的 进进行体外培养。行体外培养。培养液成分：培养液成分：水水、无机盐无机盐、糖类糖类、维生素维生素、氨基酸氨基酸、激激素素、核苷酸核苷酸、血清血清等等早期早期(zoq)胚胚胎胎第二十八页，共三十二页。卵母细胞的采集和培养。 不同动物胚胎移不同动物胚胎移植时间不同植时间不同牛、羊：牛、羊：桑椹胚或囊胚桑椹胚或囊胚阶段阶段小鼠、家兔：小鼠、家兔：卵裂卵裂(lun (lun li)li)期或囊胚阶段期或囊胚阶段试管婴儿：试管婴儿：8 8个或个或1616个个细胞阶段细胞阶段 胚胎胚胎(piti)培养发育到适宜阶段时，可将其取培养发育到适宜阶段时，可将其取出向受体移植或冷冻保存。出向受体移植或冷冻保存。第二十九页，共三十二页。卵母细胞的采集和培养。第三十页，共三十二页。卵母细胞的采集和培养。 试管动物 与 克隆动物相比生殖方式：技术手段：遗传(ychun)规律：有性生殖(yuxng shngzh) 无性生殖核移植技术(jsh)、胚胎移植遵循 无体外受精体外受精胚胎移植胚胎移植第三十一页，共三十二页。卵母细胞的采集和培养。内容(nirng)总结