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文档简介
1、鸟一论文发袤专家一1龜餌中国学木期刊网蛋白质工程论文:浅谈蛋白质工程一、蛋白质工程的原理蛋白质工程也被誉为第二代基因工程,其主要目的是为了改造现有的蛋白质或产生自然界不存在的全新的蛋白质,以更好地满足人类生产和生活的需求。蛋白质工程实现的基本途径是:通过基因工程能够大规模生产生物体内微量存在的活性物质,并借助转基因而改变动植物性状,得以在人类医疗保健中进行基因诊断和基因治疗,这些蛋白质只是适应生物自身的需要,而对它们进行产业化开发往往不合意,需要加以改造。二、蛋白质工程操作程序蛋白质工程的主要步骤包括:1. 从生物体中分离纯化目的蛋白2. 测定其氨基酸序列3. 借助核磁共振和x射线晶体衍射等手
2、段,尽可能地了解蛋白质的二维结构和三维晶体结构4. 设计各种处理条件,了解蛋白质的结构变化,包括折叠与去折叠等对其活性与功能的影响5. 设计编码该蛋白的基因改造方案,如点突变6. 分离、纯化新蛋白,功能检测后投入实际使用三、蛋白质改造工程举例1. 水蛭素改造水蛭素是水蛭唾液腺分泌的凝血酶特异抑制剂,将其47位的asn(天冬酰胺)变成lys(赖氨酸),使其与分子内第4或第5位thr(苏氨酸)间形成氢键来帮助水蛭素n端肽段的正确取向,从而提高凝血效率,试管试验活性提高4倍,在动物模型上检验抗血栓形成的效果,提高20倍。2. 生长激素改造在治疗过程中为减少副作用,需使人的重组生长激素只与生长激素受体
3、结合,尽可能减少与其他激素受体的结合,如替换第18和第21位his(组氨酸)和第17位glu(谷氨酸)。实验结果与预先设想一致,但要开发作为临床用药还有大量的工作要做。3. 胰岛素改造利用蛋白质工程技术改变这些残基,则可降低其聚合作用,使胰岛素快速起作用。该速效胰岛素已通过临床实验。4. 治癌酶的改造疱疹病毒(hsv)胸腺嘧啶激酶(tk)可以阻断癌细胞dna的合成,杀死癌细胞。hsvtk催化能力可以通过基因突变来提高。从大量的随机突变中进行筛选出一种酶,在酶活性部位附近有6个氨基酸被替换,催化能力20倍以上。四、前景蛋白质工程汇集了当代分子生物学等学科的一些前沿领域的最新成就,它把核酸与蛋白质结合、蛋白质空间结构与生物功能结合起来研究。蛋白质工程开创了按照人类意愿改造、创造符合人类需要的蛋白质的新
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