20120615分析方法验证的基本思路-张俊山

1、分析方法验证的基本思路分析方法验证的基本思路1测定方法测定方法HPLCGC滴定滴定分析方法类型分析方法类型含量含量有关物质有关物质或溶残或溶残溶剂残留溶剂残留含量含量验证项目验证项目系统适应性系统适应性YesYesYesNo专属性专属性YesYesYesYes (空白校正空白校正)精密度精密度YesYesYesYes线性及范围线性及范围YesYesYesYes准确度准确度YesYesYesNo定量限及检测限定量限及检测限NoYesYesNo耐用性耐用性YesYesYesYes2 2含量（含量（HPLC）一一1. 系统适应性系统适应性2. 专属性专属性3. 精密度精密度4. 线性及范围线性及范围

2、5. 准确度准确度6. 耐用性耐用性u系统适应性是分析方法达到其分析目的的前提；系统适应性是分析方法达到其分析目的的前提；u严格说来，作为方法验证的一个项目是合适的；严格说来，作为方法验证的一个项目是合适的；u在分析方法验证前应进行系统适应性的测试，并在验在分析方法验证前应进行系统适应性的测试，并在验证过程中确保系统适应性符合要求。证过程中确保系统适应性符合要求。3 3含量（含量（HPLC）1. 系统适应性系统适应性溶液配制溶液配制l 空白溶液；系统适应性溶液；对照液空白溶液；系统适应性溶液；对照液可接受标准可接受标准l 满足专论的系统适应性要求；满足专论的系统适应性要求；l 对称因子应在对称

3、因子应在0.81.5之间（之间（EP 2.2.46）；）；l RSD （EP 2.2.46 & USP 621）需报告内容需报告内容l 主峰与已知杂质主峰与已知杂质RT（RRT）；分离度；主峰峰面）；分离度；主峰峰面积及积及RSD；可能包括拖尾因子或对称因子或理论塔；可能包括拖尾因子或对称因子或理论塔板数板数 。4 4含量（含量（HPLC）2. 专属性专属性溶液配制溶液配制l 空白溶液；对照液；供试液空白溶液；对照液；供试液可接受标准可接受标准l 空白溶液在供试液和对照液中主峰空白溶液在供试液和对照液中主峰RT处无干扰；处无干扰；l 供试液中主峰供试液中主峰RT与对照液中主峰与对照液中

4、主峰RT保持一致；保持一致；l 供试液与对照液中主峰的供试液与对照液中主峰的峰纯度因子峰纯度因子995或者符或者符合色谱系统默认参数合色谱系统默认参数需报告内容需报告内容l 主峰主峰RT及主峰纯度因子及主峰纯度因子中间精密度：同一实验室内不同人、不同日期、不同仪器中间精密度：同一实验室内不同人、不同日期、不同仪器重现性：不同实验室之间重现性：不同实验室之间3. 精密度精密度对方法对方法 n次重复，不是对某个溶液次重复，不是对某个溶液 n次重复次重复重复性重复性溶液配制溶液配制l 对照液，对照液，2份；供试液，份；供试液，6份份可接受标准可接受标准l RSD（n=6）2.0% %重现性重现性溶液

5、配制溶液配制l 同重复性同重复性可接受标准可接受标准l RSD（n=6）2.0% %；l RSD（n=12）2.0% %；（作用不大）；（作用不大）l 重复性与重现性均值的绝对差值重复性与重现性均值的绝对差值2.0% %；样品检测样品检测溶液配制溶液配制l ATS和基地对不同于验证使用的另一批次样品进和基地对不同于验证使用的另一批次样品进行检测。行检测。可接受标准可接受标准l ATS与基地与基地QC检测的含量的绝对差值检测的含量的绝对差值2.0% %。重现性中已经进行，此项不一定必需重现性中已经进行，此项不一定必需需报告内容需报告内容l 主峰峰面积；主峰峰面积；6份及份及12份含量单值，份含量

6、单值，MeanSD，RSD；95%CI（n=6）；含量均值的绝对差值。）；含量均值的绝对差值。56溶液名称溶液名称进样针数进样针数目的目的空白溶液空白溶液 1或或2针针消除残留，排除干扰，通常消除残留，排除干扰，通常必需必需专属性溶液专属性溶液1或或2针针若非综合验证，不必需若非综合验证，不必需系统适应性溶液系统适应性溶液 1针针看系统适应性项目和要求看系统适应性项目和要求对照液对照液1 5针针/6针针这是真正的系统适应性这是真正的系统适应性对照液对照液22针针供试液供试液6份份各各1针针对照液对照液12针针重现性下进样序列：重现性下进样序列：u线性和范围是两个不同的概念。应根据方法的特征首先

7、确线性和范围是两个不同的概念。应根据方法的特征首先确定范围，然后在范围内验证方法的线性定范围，然后在范围内验证方法的线性uY轴截距的大小应当根据范围的开始点设定，对于含量等轴截距的大小应当根据范围的开始点设定，对于含量等范围较窄，且范围起始点离远点较远的方法，范围较窄，且范围起始点离远点较远的方法，Y轴截距不轴截距不必需或者应放宽。必需或者应放宽。7 7含量（含量（HPLC）4. 线性及范围线性及范围溶液配制溶液配制l 50%150%的线性溶液（至少的线性溶液（至少5个点）个点）可接受标准可接受标准l r 0.9990;l Y轴截距轴截距/100%浓度时浓度时Y轴响应值的绝对值轴响应值的绝对值

8、2.0%需报告内容需报告内容l 线性点的实际浓度及峰面积；线性图；线性范围；线性线性点的实际浓度及峰面积；线性图；线性范围；线性方程；相关系数；残差平方和；方程；相关系数；残差平方和；Y轴截距；轴截距；Y轴截距的轴截距的95%CI；Y轴截距轴截距/100%浓度时浓度时Y轴响应值的绝对值。轴响应值的绝对值。8 8含量（含量（HPLC）5. 准确度准确度溶液配制溶液配制l 80%，100%，120%的准确度溶液各三份，可用一个母的准确度溶液各三份，可用一个母 液稀释。液稀释。可接受标准可接受标准l 单个回收率及平均回收率应在单个回收率及平均回收率应在98.0%102.0%；l 回收率（回收率（n=

9、9）的）的RSD2.0%。需报告内容需报告内容l 实际测得值；理论值；单个回收率；平均回收率及其实际测得值；理论值；单个回收率；平均回收率及其95%CI及及RSD。96. 耐用性耐用性溶液稳定性溶液稳定性溶液配制溶液配制l 系统适应性溶液；对照液；供试液系统适应性溶液；对照液；供试液可接受标准可接受标准l 系统适应性溶液：如分离度符合要求；系统适应性溶液：如分离度符合要求；l 对照液及供试液：对照液及供试液： 各时间点主峰含量（或峰面积）与各时间点主峰含量（或峰面积）与0h相比应在相比应在 98.0102.0%； 主峰峰纯度因子主峰峰纯度因子990。需报告内容需报告内容l 系统适应性要求；主峰

10、含量（或峰面积）及峰纯度因系统适应性要求；主峰含量（或峰面积）及峰纯度因子；各时间点含量（或峰面积）与子；各时间点含量（或峰面积）与0h的比值；符合要的比值；符合要求测试点的求测试点的RSD。色谱条件的影色谱条件的影响响溶液配制溶液配制l 系统适应性溶液；对照液系统适应性溶液；对照液色谱条件色谱条件l 流动相比例；流速；流动相比例；流速；pH值；柱温；色谱柱批号。值；柱温；色谱柱批号。可接受标准可接受标准l 同系统适应性项下的可接受标准。同系统适应性项下的可接受标准。需报告内容需报告内容l 同系统适应性项下各报告内容同系统适应性项下各报告内容10耐用性耐用性个人理解个人理解 耐用性的目的是通过

11、有意识地对测定参数进行调耐用性的目的是通过有意识地对测定参数进行调整，来测试方法对检测条件变化的容许能力，从而整，来测试方法对检测条件变化的容许能力，从而为日常检测提供指导。为日常检测提供指导。 通常以系统适应性指标来评估通常以系统适应性指标来评估 目前的方法验证中，关于耐用性的验证操作方法目前的方法验证中，关于耐用性的验证操作方法太过复杂，且对实际检测的指导意义不大。太过复杂，且对实际检测的指导意义不大。 需思考和讨论的问题：需思考和讨论的问题： EP、USP中都有在保证系统适应性满足要求的前中都有在保证系统适应性满足要求的前提下，允许对系统进行调整的参数范围。这里面允提下，允许对系统进行调

12、整的参数范围。这里面允许的参数范围要远宽于耐用性验证的范围。请问你许的参数范围要远宽于耐用性验证的范围。请问你怎么考虑这两个参数的范围差别。怎么考虑这两个参数的范围差别。 1111有有关关物物质质或溶或溶残残（HPLC）二二1. 系统适应性系统适应性2. 专属性专属性3. 精密度精密度4. 检测限及定量限检测限及定量限5. 线性及范围线性及范围6. 准确度准确度7. 耐用性耐用性1212含量（含量（HPLC）1. 系统适应性系统适应性溶液配制溶液配制l 空白溶液空白溶液l 系统适应性溶液系统适应性溶液l 对照液对照液l 灵敏度溶液灵敏度溶液 可接受标准可接受标准l 满足专论的系统适应性要求；满

13、足专论的系统适应性要求；l 对称因子应在对称因子应在0.81.5之间（之间（EP 2.2.46）l RSD （EP 2.2.46 & USP 621）l S/N 10需报告内容需报告内容l 分离度或拖尾因子或对称因子或理论塔板数；主峰及已分离度或拖尾因子或对称因子或理论塔板数；主峰及已知杂质知杂质RT，RRT；主峰峰面积及；主峰峰面积及RSD；主峰信噪比。；主峰信噪比。13132. 专属性专属性空空白白干干扰扰及及增增敏敏试试验验溶液配制溶液配制l 空白溶液；供试液；对照液；空白溶液；供试液；对照液；l 系统适应性溶液，增敏溶液。系统适应性溶液，增敏溶液。可接受标准可接受标准l 空白溶

14、液在各杂质及主峰空白溶液在各杂质及主峰RT处（和处（和/或或RRT）无干扰）无干扰l 供试液和对照液中已知单杂及主峰与相邻峰的供试液和对照液中已知单杂及主峰与相邻峰的R1.5l 供试液和对照液中主峰及已知杂质的供试液和对照液中主峰及已知杂质的RT保持一致保持一致l 供试液与对照液中主峰的峰纯度因子供试液与对照液中主峰的峰纯度因子990l 增敏溶液与系统适应性溶液中的已知杂质增敏溶液与系统适应性溶液中的已知杂质RT保持一致保持一致l 增敏溶液与供试液相比，已知杂质增敏溶液与供试液相比，已知杂质RT处峰面积增强处峰面积增强需报告内容需报告内容l 分离度；主峰及已知杂质峰分离度；主峰及已知杂质峰RT

15、（和（和/或或RRT）及其峰）及其峰 面积；主峰峰纯度因子。面积；主峰峰纯度因子。14142. 专属性（续上）专属性（续上）强强制制降降解解试试验验溶液配制溶液配制l 未破坏供试液；各破坏试验空白溶液；未破坏供试液；各破坏试验空白溶液；l 酸破坏试验；碱破坏试验；氧化破坏试验；酸破坏试验；碱破坏试验；氧化破坏试验；l 光照破坏试验；高温破坏试验。光照破坏试验；高温破坏试验。注：注：1. 光照强度总量：光照强度总量：ICH Q1B要求要达到要求要达到1.2106Lux hours； 2. 破坏后主峰含量的计算：用未破坏供试液为对照液进行外标计破坏后主峰含量的计算：用未破坏供试液为对照液进行外标计

16、 算破坏后主峰含量，降解率在算破坏后主峰含量，降解率在510%，降解率与总杂偏差，降解率与总杂偏差5%可接受标准可接受标准l 各破坏溶液中新增降解杂质与主峰及已知杂质各破坏溶液中新增降解杂质与主峰及已知杂质R1.5 （可调整，至少保留主峰与相邻杂质的可调整，至少保留主峰与相邻杂质的R的标准的标准）l 各破坏溶液中主峰的峰纯度因子各破坏溶液中主峰的峰纯度因子990。需报告内容需报告内容l 分离度；主峰峰纯度；主峰含量及降解率；对比破坏分离度；主峰峰纯度；主峰含量及降解率；对比破坏 前后各杂质变化情况（包括前后各杂质变化情况（包括RRT，含量及总杂）；列，含量及总杂）；列 出主要降解杂质。出主要降

17、解杂质。153. 精密度精密度分析重复性分析重复性溶液配制溶液配制l 对照液，对照液，1份；份；l 供试液或供试液或100%加标液或杂质限度浓度的主成分考加标液或杂质限度浓度的主成分考察溶液，察溶液，6份份可接受标准可接受标准l RSD（n=6）10.0% %重现性重现性溶液配制溶液配制l 同分析重复性同分析重复性可接受标准可接受标准l RSD（n=6）10.0% %l RSD（n=12）10.0% %；l 重复性与重现性已知单杂含量均值（或主成分则以重复性与重现性已知单杂含量均值（或主成分则以主峰计）的主峰计）的绝对差值绝对差值0.05%（可调整）。（可调整）。样品检测样品检测溶液配制溶液配

18、制l ATS和基地对不同于验证使用的另一批次样品进行和基地对不同于验证使用的另一批次样品进行检测。检测。可接受标准可接受标准l ATS与基地与基地QC检测的已知杂质含量的绝对差值检测的已知杂质含量的绝对差值 0.05%，总杂的绝对差值，总杂的绝对差值 0.10%（可调整）（可调整）需报告内容需报告内容l 主峰或已知单杂峰面积；主峰或已知单杂峰面积；6份及份及12份主峰或已知单份主峰或已知单杂含量单值，杂含量单值，MeanSD，RSD；95%CI（n=6）；）；含量均值的绝对差值。含量均值的绝对差值。16溶液名称溶液名称进样针数进样针数空白溶液空白溶液 1或或2针针系统适应性溶液系统适应性溶液

19、1针针灵敏度溶液灵敏度溶液1针针专属性溶液（如必要）专属性溶液（如必要）1或或2针针对照液对照液3、5、6针（根据针（根据RSD定）定）供试液供试液6份份各各1针针灵敏度溶液灵敏度溶液1针针系统适应性溶液系统适应性溶液1针针应考虑成本应考虑成本重现性下进样序列：重现性下进样序列：17含量（含量（HPLC）4. 检测限及定量限检测限及定量限溶液配制溶液配制l 对照液对照液逐级稀释至逐级稀释至S/N 3和和S/N 10时的浓度溶液，时的浓度溶液， 连续进样三针。连续进样三针。可接受标准可接受标准l 检测限：检测限：S/N 3;l 定量限：定量限：S/N 10； RSD（n=3）10.0%或或15.

20、0%； 定量限定量限忽略限（或报告限）忽略限（或报告限）。需报告内容需报告内容l 信噪比；主峰峰面积及信噪比；主峰峰面积及RSD（RSD仅是用于定量限）仅是用于定量限） ；定量限及检测限的浓度及其相当于供试液中主峰浓度；定量限及检测限的浓度及其相当于供试液中主峰浓度的百分比。的百分比。1818含量（含量（HPLC）5. 线性及范围线性及范围溶液配制溶液配制l 报告限报告限杂质限度的杂质限度的150%（至少（至少5个点）个点）注：若方法描述中对照液的浓度超过了杂质限度，则线性最高点做到注：若方法描述中对照液的浓度超过了杂质限度，则线性最高点做到 对照液浓度的对照液浓度的150%。可接受标准可接受

21、标准l r 0.990;l Y轴截距轴截距/最低杂质限度时最低杂质限度时Y轴响应值的绝对值轴响应值的绝对值5.0% （最大可放宽至（最大可放宽至10.0%）需报告内容需报告内容l 线性点实际浓度及峰面积；线性图；线性范围；线性线性点实际浓度及峰面积；线性图；线性范围；线性方程；相关系数；残差平方和；方程；相关系数；残差平方和；Y轴截距；轴截距；Y轴截距的轴截距的95%CI；Y轴截距轴截距/杂质限度对应的响应值的绝对值。杂质限度对应的响应值的绝对值。u 杂质准确度测定通常采用回收率的方式检测，杂质标准品可得时可行杂质准确度测定通常采用回收率的方式检测，杂质标准品可得时可行u 对于原料药，杂质标准

22、品不可得时不可行。对于原料药，杂质标准品不可得时不可行。u 对于制剂，杂质标准品不可得时可用主成分代替。对于制剂，杂质标准品不可得时可用主成分代替。u 应考虑检测验证成本。不一定为做准确度而进行杂质标准品的制备和应考虑检测验证成本。不一定为做准确度而进行杂质标准品的制备和标定。标定。u 从定量限起做准确度，有回收率超标的风险。从定量限起做准确度，有回收率超标的风险。19含量（含量（HPLC）6. 准确度准确度溶液配制溶液配制l 报告限，报告限，杂质限度，及线性最高点的准确度溶液各杂质限度，及线性最高点的准确度溶液各3 份，可用一个母液稀释。份，可用一个母液稀释。l 供试液，供试液，1份（供试品

23、加标杂质）和份（供试品加标杂质）和/或或l 对照液，对照液，1份（主成分方法）份（主成分方法）注：若本底太高，最低点可从注：若本底太高，最低点可从50%做起，或用对照品代替供试品。做起，或用对照品代替供试品。可接受标准可接受标准l 单个回收率及平均回收率应在单个回收率及平均回收率应在90.0%110.0%；l 回收率（回收率（n=9）的）的RSD10.0%。需报告内容需报告内容l 实际测得值；理论值；单个回收率；平均回收率及其实际测得值；理论值；单个回收率；平均回收率及其95%置信区间及置信区间及RSD。207. 耐用性耐用性溶液稳定性溶液稳定性溶液配制溶液配制l 系统适应性溶液；对照液；供试

24、液系统适应性溶液；对照液；供试液可接受标准可接受标准l 系统适应性溶液：满足要求；系统适应性溶液：满足要求；l 对照液：主峰峰面积与对照液：主峰峰面积与0h相比应在相比应在0.91.1之间；之间；l 供试液：总杂含量与供试液：总杂含量与0h相比应在相比应在0.91.1之间；之间； 各原单杂含量的极差各原单杂含量的极差|An- A0| 0.05%； 不得出现大于不得出现大于0.05%的新杂质。的新杂质。 主峰面积变化可以增加，重点考虑杂质峰主峰面积变化可以增加，重点考虑杂质峰需报告内容需报告内容l 系统适应性要求；主峰峰面积或含量，系统适应性要求；主峰峰面积或含量， RRT；各；各时间点主峰峰面

25、积与时间点主峰峰面积与0h比值；单杂含量及极差；比值；单杂含量及极差；总杂质含量与总杂质含量与0h的比值。的比值。色谱条件的影色谱条件的影响响溶液配制溶液配制l 系统适应性；对照液（系统适应性；对照液（方法开发时应考虑供试液方法开发时应考虑供试液）色谱条件色谱条件l 流动相比例；流速；流动相比例；流速；pH值；柱温；色谱柱批号。值；柱温；色谱柱批号。可接受标准可接受标准l 同系统适应性项下的可接受标准。同系统适应性项下的可接受标准。注：在注：在RSD符合要求的情况下，可减少为符合要求的情况下，可减少为3针。针。需报告内容需报告内容l 同系统适应性项下各报告内容。同系统适应性项下各报告内容。21

26、21溶溶剂残剂残留（留（GC）三三1. 系统适应性系统适应性2. 专属性专属性3. 精密度精密度4. 检测限及定量限检测限及定量限5. 线性及范围线性及范围6. 准确度准确度7. 耐用性耐用性2222含量（含量（HPLC）1. 系统适应性系统适应性溶液配制溶液配制l 空白溶液；对照液空白溶液；对照液可接受标准可接受标准l 对照液中待测溶剂峰与相邻峰的分离度对照液中待测溶剂峰与相邻峰的分离度1.5；l RSD (n=6) 5.0%或或10.0%；需报告内容需报告内容l 分离度；待峰溶剂峰的峰面积及分离度；待峰溶剂峰的峰面积及RSD。2. 专属性专属性溶液配制溶液配制l 空白溶液；对照液；供试液；

27、空白溶液；对照液；供试液；100%加标溶液；加标溶液；l 专属性溶液（峰鉴别溶剂专属性溶液（峰鉴别溶剂 + 对照液）；对照液）；可接受标准可接受标准l 空白溶液在待测溶剂峰的空白溶液在待测溶剂峰的RT处（或处（或RRT）无干扰；）无干扰；l 供试液和供试液和100%加标液与对照液中待测峰加标液与对照液中待测峰RT保持一致；保持一致；l 专属性溶液及专属性溶液及100%加标液中待测峰与相邻峰的加标液中待测峰与相邻峰的R1.5l 100%加标液和供试液相比，待测峰的峰面积增加。加标液和供试液相比，待测峰的峰面积增加。需报告内容需报告内容l 分离度；各溶剂峰的分离度；各溶剂峰的RT（或（或RRT）及

28、峰面积。）及峰面积。233. 精密度精密度重复性重复性溶液配制溶液配制l 对照液，对照液，1份；份；l 供试液或供试液或100%加标液，加标液，6份份可接受标准可接受标准l RSD（n=6）10.0% %重现性重现性溶液配制溶液配制l 同分析重复性同分析重复性可接受标准可接受标准l RSD（n=6）10.0% %；l RSD（n=12）10.0% %；l 重复性与重现性均值的绝对差值重复性与重现性均值的绝对差值1/10溶残限度溶残限度 （对于痕量分析的可以放宽到限度的（对于痕量分析的可以放宽到限度的1/2）；样品检测样品检测溶液配制溶液配制l ATS和基地对不同于验证使用的另一批次和基地对不同

29、于验证使用的另一批次样品样品进行检进行检测测.可接受标准可接受标准l ATS与基地与基地QC检测的含量的绝对差值检测的含量的绝对差值1/10溶残限度溶残限度 （对于痕量分析的可以放宽到限度的（对于痕量分析的可以放宽到限度的1/2）。需报告内容需报告内容l 待测溶剂峰面积；待测溶剂峰面积；6份及份及12份含量单值，份含量单值，MeanSD，RSD；95%CI（n=6）；含量均值的绝对差值。）；含量均值的绝对差值。24溶液名称溶液名称进样针数进样针数空白溶液空白溶液 1或或2针针专属性溶液（如必要）专属性溶液（如必要）1或或2针针对照液对照液6份份各各1针针供试液供试液6份份（或（或100%供试品

30、加标液供试品加标液6份）份）各各1针针重现性下进样序列：重现性下进样序列：2525含量（含量（HPLC）4. 检测限及定量限检测限及定量限溶液配制溶液配制l 对照液逐级稀释至对照液逐级稀释至S/N 3和和S/N 10时的浓度，各时的浓度，各 平行配制平行配制3份。份。可接受标准可接受标准l 检测限：检测限：S/N 3;l 定量限：定量限： S/N 10；RSD（n=3）10.0%或或15.0%需报告内容需报告内容l 信噪比；待测溶剂峰峰面积及信噪比；待测溶剂峰峰面积及RSD（RSD仅用于定量仅用于定量限）；定量限及检测限的浓度及其相当于供试液浓度限）；定量限及检测限的浓度及其相当于供试液浓度的

31、百分比（或的百分比（或ppm）。）。 2626含量（含量（HPLC）5. 线性及范围线性及范围溶液配制溶液配制l LOQ150%的线性溶液（至少的线性溶液（至少5个点）个点）可接受标准可接受标准l r 0.990;l Y轴截距轴截距/100%浓度时浓度时Y轴响应值的绝对值轴响应值的绝对值5.0% （最大可放宽至（最大可放宽至10.0%）。）。需报告内容需报告内容l 线性实际浓度及峰面积；线性图；线性方程；线性范线性实际浓度及峰面积；线性图；线性方程；线性范围；相关系数；残差平方和；围；相关系数；残差平方和；Y轴截距；轴截距；Y轴截距轴截距95%CI；Y轴截与轴截与/100%浓度对应响应值的绝对

32、值。浓度对应响应值的绝对值。6. 准确度准确度溶液配制溶液配制l 50%，100%，150%的加标液各三份，可用一个母的加标液各三份，可用一个母 液稀释；供试液，液稀释；供试液，2份份注：若本底太高，低浓度点可用对照品代替供试品。注：若本底太高，低浓度点可用对照品代替供试品。可接受标准可接受标准l 单个回收率及平均回收率应在单个回收率及平均回收率应在90.0%110.0%；l 回收率（回收率（n=9）的）的RSD10.0%。注：痕量分析回收率最多可以放宽到注：痕量分析回收率最多可以放宽到70.0-130.%。需报告内容需报告内容l 实际测得值；理论值；单个回收率；平均回收率及其实际测得值；理论

33、值；单个回收率；平均回收率及其95%CI及及RSD。277. 耐用性耐用性溶液稳定性溶液稳定性溶液配制溶液配制l 对照液，对照液，1份；份；可接受标准可接受标准l 对照液中待测溶剂峰的峰面积与对照液中待测溶剂峰的峰面积与0h相比应在相比应在0.901.10之间。之间。需报告内容需报告内容l 各时间点主峰峰面积及与各时间点主峰峰面积及与0h的比值。的比值。气相色谱法，溶液稳定性测试可不考虑气相色谱法，溶液稳定性测试可不考虑色谱条件的影响色谱条件的影响溶液配制溶液配制l 对照液，对照液，1份；（份；（方法开发时应考虑供试液方法开发时应考虑供试液）色谱条件色谱条件l 色谱柱初始温度；色谱柱初始温度；

34、l 顶空瓶加热温度；顶空瓶加热温度；l 载气流速；载气流速；l 色谱柱批号；色谱柱批号；l 顶空瓶平衡时间。顶空瓶平衡时间。注：可根据实际情况考察对色谱耐用性影响较大的因素，如顶空注：可根据实际情况考察对色谱耐用性影响较大的因素，如顶空 的进样时间及加样时间。的进样时间及加样时间。可接受标准可接受标准l 同系统适应性项下的可接受标准。同系统适应性项下的可接受标准。注：在注：在RSD符合要求的情况下，可减少为符合要求的情况下，可减少为3针。针。需报告内容需报告内容l 同系统适应性项下各报告内容。同系统适应性项下各报告内容。2828含量（酸含量（酸碱碱滴定）滴定）四四1. 空白校正空白校正2. 滴定曲线的绘制滴定曲线的绘制3. 精密度精密度4. 线性与范围线性与范围5. 溶液稳定性溶液稳定性291. 空白校正空白校正溶液配制溶液配制l 空白溶液，空白溶液，2份份可接受标准可接受标准l 空白消耗体积不能超过空白消耗体积不能超过0.10 mL，约相当于样品消耗，约相当于样品消耗滴定体积的滴定体积的1%（根据具体情况而定）。（根据具体情况而定）。需报告内容需报告内容l 空白溶液消耗的体积空白溶液消耗的体积空白溶液校正时检验操作程序的必要步骤，不是验证项目。而且验证也空白溶液校正时检验操作程序的必要步骤，不是验证项目。而且验证也没有意义，每次操作，空白都会不同。当然