根系活力的测定[TTC法]优秀课件

1、1根系活力的测定根系活力的测定TTC法法制作人制作人：刘新刘新单单 位位：生命科学学院生命科学学院 植物生理学教研室植物生理学教研室2一、实验目的一、实验目的H2O无机盐无机盐合成氨基酸和植物激素合成氨基酸和植物激素（ABA、CTK、GA等）等）根的生长情况和活力水平直接影响地上部的生长和营养状况及产量根的生长情况和活力水平直接影响地上部的生长和营养状况及产量测定根系活力，为植物营养研究提供依据。测定根系活力，为植物营养研究提供依据。n理解植物根系活力的内涵理解植物根系活力的内涵n掌握根系活力测定的原理与方法掌握根系活力测定的原理与方法3二、实验原理二、实验原理氯化三苯基四氮唑（氯化三苯基四氮

2、唑（TTC）是标准氧化电位为）是标准氧化电位为80mV的氧化还的氧化还原物质，溶于水中成为无色溶液，但还原后即生成红色而不原物质，溶于水中成为无色溶液，但还原后即生成红色而不溶于水的三苯基甲腙溶于水的三苯基甲腙 （TTF）。）。 生成的生成的TTF比较稳定，不会被空气中的氧自动氧化比较稳定，不会被空气中的氧自动氧化4TTCTTF根系活力根系活力脱氢酶脱氢酶丙二酸丙二酸碘乙酸碘乙酸琥珀酸琥珀酸延胡索酸延胡索酸苹果酸苹果酸 促进促进抑制抑制（无色，溶于水）（无色，溶于水）（红色，不溶于水）（红色，不溶于水）5三、实验材料三、实验材料n水培或砂培小麦、玉米等植物根系。水培或砂培小麦、玉米等植物根系。

3、6四、实验步骤制作TTC标准曲线吸取吸取0.25mL TTC加入加入10mL容量瓶容量瓶Na2S2O4加少许加少许Na2S2O4乙酸乙酯乙酸乙酯乙酸乙乙酸乙酯定容酯定容0.25mL0.50mL1.00mL1.50mL2.00mLTTC含量（含量（g）2550100150200乙酸乙酯作乙酸乙酯作参比，测定参比，测定485nm下光下光密度值，绘密度值，绘制标准曲线制标准曲线7四、实验步骤测定根系活力0.5g根尖样品根尖样品0.4TTC和磷酸缓冲液的等量混合液和磷酸缓冲液的等量混合液10ml 根充分浸没于溶液中根充分浸没于溶液中37下暗保温下暗保温13h加入加入1mol/L硫酸硫酸2ml取出根吸取

4、出根吸干水分干水分与与34ml乙酸乙酯和少量乙酸乙酯和少量石英砂在研钵内磨碎石英砂在研钵内磨碎红色提取液移入试管且红色提取液移入试管且用乙酸乙酯定容到用乙酸乙酯定容到10ml空白试验作参比测空白试验作参比测485nm下吸光度下吸光度与此同时与此同时做一空白做一空白实验，先实验，先加硫酸，加硫酸，再加根样再加根样品，其他品，其他操作同上操作同上查标准曲线，求查标准曲线，求四氮唑还原量四氮唑还原量8五、实验结果五、实验结果四氮唑还原强度四氮唑还原强度（mg/g(根鲜重根鲜重)/h）四氮唑还原量（四氮唑还原量（mg）根重（根重（g）时间时间(h)9六、思考题六、思考题n1.1.植物的根与地上部分有何关系植物的根与地上部分有何关系? ?n2.2.反应中加入硫酸、琥珀酸或延胡羧酸、反应中加入硫酸、琥珀酸或延胡羧酸、苹果酸各起何作用？苹果酸各起何作用？n3.3.测定根系活力时最好选择根的哪个部位？测定根系活力时最好选择根