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文档简介

1、会计学1武汉大学临医免疫学试验课武汉大学临医免疫学试验课一、间接免疫荧光（写实验报告）一、间接免疫荧光（写实验报告）二、二、 ELISA法检测法检测HBs-Ab（写实验报告）（写实验报告）三、凋亡细胞的三、凋亡细胞的DNA琼脂糖凝胶电泳分析琼脂糖凝胶电泳分析 （写实验报告）（写实验报告）第二次第二次实验课内容实验课内容和补体法等。和补体法等。补体法补体法中作细胞抗原备用。中作细胞抗原备用。（淡黄色淡黄色）（乳白色乳白色）（无色无色）（白色白色）（红色红色）结果观察：荧光显微镜观察：暗背景中有绿色荧光细荧光显微镜观察：暗背景中有绿色荧光细胞胞基本原理与类型基本原理与类型 思考题：为什么标记一种抗

2、抗体能检测多对抗原抗体系统？思考题：为什么标记一种抗抗体能检测多对抗原抗体系统？ 1 2 3 4 5整倍数的片段，通过琼脂糖整倍数的片段，通过琼脂糖凝胶电泳可形成典型的凝胶电泳可形成典型的“梯梯状带状带”。胞，不加地塞米松为对照组。胞，不加地塞米松为对照组。（去上清，沉淀细胞加（去上清，沉淀细胞加1ml 1640 混匀备用）。混匀备用）。小鼠胸腺细胞（细胞浓度107/ml）（诱导组和未诱导组）EP管(1.5ml)弃上清充分混匀后，55 温浴20分钟。12000转/分，10秒20ml A液和100ml L液加入10l3MNaAc和1250lB液充分振荡混匀后离心12000转3分钟期间颠倒EP管五

3、次移取700ml至吸附柱中,静止1分钟，离心30s。弃去收集管中的液体，重复上述操作。加入600lW液离心30s。弃去收集管中的液体，重复上述操作，再离心1次将吸附柱移入一个干净的EP管中(1.5ml)中。在吸附膜的中央加入50ml T液，静置1分钟后， 12000转，离心1分钟。取出EP管(其中便是收集的DNA)20 保存、备用。一.细胞裂解阶段(L液=裂解液,RNaseA/蛋白酶K=A液) 二.结合DNA阶段(B=结合缓冲液)三.漂洗阶段(漂洗缓冲液=W液) 四.洗脱阶段(洗脱缓冲液=T液) 下观察实验结果。下观察实验结果。地塞米松诱导小鼠地塞米松诱导小鼠 胸腺细胞凋亡胸腺细胞凋亡1： DNA marker;2-3：细胞坏死对照细胞坏死对照4-6：细胞凋亡；：细胞凋亡；7： 正常细胞对照正常细胞对照 1 2 3 4 5 6 7中作细胞抗原备用。中作细胞抗原备用。（淡黄色淡黄色）（乳白色乳白色）（无色无色）（白色白色）（红色红色）

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