酶联免疫吸附试验论文：影响ELISA检测HBsAg结果的常见因素

1、论文发表专家一顾中国学术期刊洌wwv/酶联免疫吸附试验论文：影响ELISA检测HBsAg结果的常见因素【摘要】目的：探讨血清标本因素对酶联免疫吸附法(elisa)检测乙型肝炎表面抗原(hbsag)结果的影响。方法用同一批号试剂对不同状态的血清标本进行同步检测，并对结果进行综合比较分析。结果：引起结果错误的主要原因是有溶血或浑浊的血清。结论应针对血清标本的具体情况进行不同的处理。【关键词】酶联免疫吸附试验；乙型肝炎表面抗原；抗凝剂酶联免疫吸附法(elisa)检测hbsag因具有灵敏度高、特异性强等优点而被广泛应用，但在日常工作中检测hbsag常遇到假阳性率高、重复性不好的现象。hbsag假阳性结

2、果易给广大体检人员造成大的精神压力，易引起体检人员对检测人员的投诉，同时对检验机构易造成不良的声誉1。针对这一现象，为了使检验结果更加准确、假阳性率更低，笔者采用同一种试剂对不同的血清标本进行重复测定分析，现报告如下。1资料与方法1.1血清标本采静脉血做乙肝两对半的血清标本均来自来我院进行单位职工年度体格检查。I一论文发袤专家一)中国学术期刊风v/1.2试剂和仪器上海科华生物工程有限公司生产的乙肝hbsag酶联免疫试剂盒，深圳雷杜酶标仪和洗板机。1. 3分组和检测方法严格按照说明书进行操作，在操作过程中，小心吸取血清，避免人为造成影响2。分3类情况进行观察。a组：不抗凝血液标本：取96份不抗凝

3、血液标本，每份分为三管，分别静置0.5、1、2h后用3OOOr/min离心15min，取出血清分别检测hbsag。b组：加抗凝剂标本：采集50份静脉血标本，每份标本分别用不抗凝管、肝素钠抗凝管、edta2ka管、枸橼酸钠管这4种管各装I管，其中不抗凝标本静置2h后3000r/min离心15min,另3管静置2h析出血浆。c组：含血细胞标本：从体检人员中抽出45例健康人血液标本(hbsag阴性者)。取45份血清和血细胞每份血清1.2ml，血细胞0.2ml。把0.2ml的血细胞加生理盐水，校正红细胞计数为1.0X1012l-1，然后按表1进行稀释制成含有不同血细胞的血清标本，然后对含有不同浓度血细

4、胞的标本进行hbsag的检测。2结果2. 1a组不抗凝标本hbsa9检测结果标本自凝0.5、1、2h的hbsag阳性率分别为10.42%(10/96)、3.12%(3/96)和0。I一论文发袤专家一)中国学术期刊凤2.2b组加不同抗凝剂标本hbsa9检测结果依照不同血液处理方式，不抗凝血、edta2k抗凝血、肝素钠抗凝血、枸橼酸钠抗凝血的hbsa9阳性率分别为0、0、8.0%(4/50)和0。2.3c组合有不同浓度血细胞标本hbsag检测结果随着标本中含血细胞浓度的增高(0.0625X1012I-10.125X1012I-1、0.250X1012l-1)，检测hbsag阳性率也随之升高，依次为6.7%(3/45)、77.8%(35/45)和100%(45/45)。3讨论血液中心和血站对供血者健康检查标准中hbv的筛查要求也是hbsag阴性1。因此，hbsag检测的结果是否准确具有非常重要的意义。血清是最常用的elisa标本，血浆中除含有纤维蛋白原和抗凝剂外，其他成分等同于血清，除特殊情况外，在医学检验中均以血清作为检测标本3。用elisa一步法检测乙肝两对半，简化了操作步骤，缩短了检验时间；同时，应用高亲和力的单克隆抗体或，高纯度抗原，检测的敏感性和特异性都有显著提高。但实验原理、实验步骤及