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文档简介
1、 实验六实验六 中性粒细胞的吞噬作用中性粒细胞的吞噬作用临床微免教研室 实验目的实验目的 1.1.熟悉中性粒细胞的吞噬作用原理熟悉中性粒细胞的吞噬作用原理和方法。和方法。 2.2.通过本实验理解机体的非特异性通过本实验理解机体的非特异性免疫机制。免疫机制。 实验原理实验原理 血液中的中性粒细胞即小吞噬细胞,血液中的中性粒细胞即小吞噬细胞,通过趋化、调理、吞入和杀菌等几个通过趋化、调理、吞入和杀菌等几个步骤,能吞噬和消化衰老、死亡细胞步骤,能吞噬和消化衰老、死亡细胞及病原微生物等异物,是机体非特异及病原微生物等异物,是机体非特异性免疫的重要组成部分。性免疫的重要组成部分。 实验材料实验材料 1.
2、1.白色葡萄球菌白色葡萄球菌8h8h培养物培养物 2.2.抗凝人血(肝素抗凝管)、瑞氏抗凝人血(肝素抗凝管)、瑞氏染液、蒸馏水染液、蒸馏水 3.3.试管、玻片、采血针、酒精棉球、试管、玻片、采血针、酒精棉球、吸管、滴管、显微镜、香柏油吸管、滴管、显微镜、香柏油 试验步骤试验步骤1.1.白色葡萄球菌培养物的准备白色葡萄球菌培养物的准备2.2.采血(采血(2 2滴)滴)3.3.加菌液(用微量加样器取准备好的加菌液(用微量加样器取准备好的菌液菌液40ul40ul加入肝素抗凝血试管内,加入肝素抗凝血试管内,轻轻混匀)轻轻混匀)4.374.37温育温育30min30min5.5.推片推片6.6.瑞氏染色
3、瑞氏染色7.7.镜检镜检油镜检查:寻找中性粒细胞,如果染油镜检查:寻找中性粒细胞,如果染 色结果正确,可见色结果正确,可见细胞核细胞核 及被吞噬的细菌染成紫色及被吞噬的细菌染成紫色, 而而粒细胞的细胞浆则为淡红色粒细胞的细胞浆则为淡红色。 8.8.计数计数 吞噬百分率:观察吞噬百分率:观察200200个中性粒细个中性粒细胞,计算其中吞噬有细菌的中性粒胞,计算其中吞噬有细菌的中性粒细胞数,计算出吞噬细胞百分率。细胞数,计算出吞噬细胞百分率。 200200个中性粒细胞中吞噬细菌的细胞数数个中性粒细胞中吞噬细菌的细胞数数200X100%X100%参考值:参考值:61.4%-64.2%61.4%-64.2%8.8.计数计数 吞噬指数:观察吞噬指数:观察200200个中性粒细胞,个中性粒细胞,计算其中被吞噬的细菌总数,平均计算其中被吞噬的细菌总数,平均每个中性粒细胞吞噬的细菌数即为每个中性粒细胞吞噬的细菌数即为吞噬指数。吞噬指数。吞噬指数吞噬指数= =200200个中性
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