《兽医寄生虫学》教学实习

1、兽医寄生虫学教学实习兽医寄生虫学教学实习实验一实验一 羊体的蠕虫学剖检和虫体采集羊体的蠕虫学剖检和虫体采集 1) 1) 体外寄生虫的采集体外寄生虫的采集羊的体表羊的体表 毛虱、颚虱、虱蝇、蠕形蚤毛虱、颚虱、虱蝇、蠕形蚤等：将采集到的虫体放于瓶内, 饥饿1-2天,加入保存液保存,虱卵应连毛取下放于瓶内或保存液内保存。首先检查食道食道的正反面,是否有美丽筒线美丽筒线虫虫及住肉孢子虫住肉孢子虫, 如果发现寄生虫可连同被寄生的组织一起剪下,保存于巴氏液中。肺脏肺脏:首先剪开支气管及大支气管,检查是否有大型肺大型肺线虫线虫( (网尾线虫网尾线虫) )然后检查小支气管或细致地撕开肺的边缘部分看是否有小型肺

2、线虫型肺线虫(原圆线虫、缪勒线虫等)。将采集检查吸附在胃粘膜到的虫体放于保存液中,肺脏表面还应注意观察是否有细粒棘球蚴细粒棘球蚴的寄生。如有则应连同肺组织一起剪下放于保存液中。肝脏肝脏:先检查是否有细粒棘球蚴细粒棘球蚴,然后去掉胆囊,检查内部,并切开胆管胆管,检查有否肝片吸虫肝片吸虫或或矛形矛形双腔吸虫双腔吸虫的寄生,然后将肝撕成小块用清水反复冲洗至上部液体清亮为止,倒去上清液,将沉渣倒入盘内检查有无虫体。胰脏胰脏和检查肝脏的方法相同,检查有否胰阔盘吸胰阔盘吸虫虫。肠系膜肠系膜：检查肠系膜血管是否有血吸虫血吸虫,并将肠肠系膜淋巴结系膜淋巴结切开检查有无舌形虫舌形虫的幼虫,注意肠系膜上是否有细颈

3、囊尾蚴细颈囊尾蚴的寄生,如有,可取下放于70%酒精或巴氏液中。 胃胃: :将胃分离,首先切开第一胃第一胃( (瘤胃瘤胃) )倒出内容物,检查吸附在胃粘膜上的前后盘吸虫前后盘吸虫。然后将第四胃第四胃( (皱胃皱胃) )的内容物倒入瓷盆内,将其翻过来用生理盐水充分洗净,再用生理盐水反复冲洗,最后将沉渣倒入大培养皿内检查是否有捻捻转血矛线虫转血矛线虫、奥斯特线虫、马歇尔线虫以及古柏、奥斯特线虫、马歇尔线虫以及古柏线虫等线虫等,如发现虫体,可用解剖针挑出放于保存液中。 小肠小肠： 沿肠系膜对侧长轴剪开肠壁,先从十二指肠开始,边剪开边检查,并把肠内容物接到搪瓷盘内, 如有寄生虫,用镊子夹到1%盐水内,

4、在羊小肠内可以发现:羊斯克里亚宾吸虫、羊斯克里亚宾吸虫、莫尼斯绦虫莫尼斯绦虫、无卵黄腺绦虫、曲子宫绦虫、仰口线虫、类圆线虫、毛无卵黄腺绦虫、曲子宫绦虫、仰口线虫、类圆线虫、毛细线虫、古柏线虫、细颈线虫、奥斯特线虫、毛圆线虫细线虫、古柏线虫、细颈线虫、奥斯特线虫、毛圆线虫等等。 当发现有绦虫绦虫时,应轻轻的用剪刀尖紧贴肠壁,避免剪断虫体。其次应留心前端细小的头节不可拉断或失去,要小心的刮下完整头节,如果有头节牢固吸着宿主肠壁则须连同肠壁组织一起取下,一般不超过5分钟。(时间过久水分渗入虫体内,就破坏了内部组织器官,影响鉴定)。洗净的虫体放于70%酒精或巴氏液固定保存。大肠大肠:将大肠的内容物倒入

5、桶中,翻转大肠,用水冲净,再将内容物反复冲洗,然后将沉渣倒入玻璃盘内检查,在大肠中主要有毛首线虫毛首线虫、夏伯特线虫夏伯特线虫、食道口线虫食道口线虫等等寄生,另外还应注意检查肠壁上有无粟粒大至豌豆大的结节(食道口线虫引起的结食道口线虫引起的结节节)。将采集到的虫体组织浸于70%酒精或巴氏液中保存。寄生虫标本的保存寄生虫标本的保存 用蠕虫学剖检法采集的虫体上,附有杂物时,可将虫体装入盛有生理盐水的广口瓶内,加以摇荡将虫体洗净然后后放入固定液中。 线虫通常是用巴尔巴卡罗氏液(简称巴氏液)固定保存,配方如下:福尔马林液30毫升,食盐7.5克,水1000毫升,吸虫、绦虫和棘头虫则常用70%酒精固定保存

6、。 鉴定：鉴定：小型线虫一般比较弯曲,可把虫体逐条放入40-50热生理盐水内,使虫体伸直,便于鉴定,然后把虫体移入固定液内。 在固定保存吸虫和绦虫之前,应先将虫体浸入常水中(或冰箱中12小时)，使之死亡。这样可使虫体的组织松弛。需要制片时,可将虫体平放于载玻片上,加盖一张载玻片,并稍加压力把虫体压平至适当薄度后(依虫体的大小薄厚而定),放在培养皿内,加入10%福尔马林液固定之。一般固定数小时,较大型的虫体要在一天以上。固定后,翻开盖在上面的玻璃片把虫体标本慢慢取下,置于盛有5%福尔马林的玻璃瓶中固定保存。 绦虫的幼虫可固定保存于巴氏液中。 在固定棘头虫时,如果他们的吻突缩在吻囊里,则须用手轻压

7、,使吻伸出以后,再用70%酒精固定,也可用巴氏液固定保存。蠕虫学剖检记录和标签的书写蠕虫学剖检记录和标签的书写 进行蠕虫剖检时,为了避免产生混乱和错误,应及时用铅笔在白色硬纸制成的标签上注明动物的种、剖解编号和器官名称,并将写好的标签投入盛有该器官的器皿中。 搜集到的虫体,在已固定装瓶,但还没有经过鉴定的时候,应当向瓶内放入标签,标签正面说明动物的种、性别、年龄、解剖编号、虫体寄生部位和初步鉴定结果。反面注明解剖地点、日期、解剖者姓名、虫体数目。实验二实验二 线虫制成装片标本线虫制成装片标本 制作时虫体不染色，直接循序通过70，80，90,95%，l00的酒精各0.5h脱水，最后在水杨酸甲酯或

8、二甲苯中透明，透明后移载玻片上，滴加拿大树胶，拨正所需位置，加盖玻片封固。实验三实验三 三种鸡抗球虫药的效力比较试验三种鸡抗球虫药的效力比较试验1、试验准奋工作 选用 14-20 日龄左右的健康公雏。防止雏鸡自然感染球虫。供试鸡使用前应绝对禁用含有抗球虫活性药物的饲料，直至试验结束。2 2、试验鸡分组、试验鸡分组 试验开始时，分别称量雏鸡的个体重，尽量挑选体重接近的，以 10-15 只为一组，分别设组：l不感染不给药组（空白对照组）、不感染不给药组（空白对照组）、l感染不给药组（感染对照组）、感染不给药组（感染对照组）、l给药给药1 1组、组、l给药给药2 2组、组、3、投药方法 将试验药物按

9、规定剂量溶于饮水中。在人工接种时同时喂给。各种混药及试验药物应分别做好标记。4 4、人工接种、人工接种柔嫩艾美耳球虫卵囊易于纯分离，且致病力最强，故一般抗球虫药药效试验的人工接种均用柔嫩艾美耳球虫卵囊。取保存备用的有感染能力的孢子化卵囊，离心去掉重铬酸钾液，然后加水稀释，进行卵囊计数。试验组每只雏鸡接种量为 5万个卵囊，以0.2-0.5 ml为宜，一般在给饲前用吸管经过口腔将卵囊液注入嗦囊。5 5、试验观察及处理、试验观察及处理 试验期前后应做好详细记录，作为药效试验的原始资料。试验期前后应做好详细记录，作为药效试验的原始资料。 试验期为试验期为 8 8 天，以人工接种当天为第天，以人工接种当

10、天为第 0 0 天，以后每天天，以后每天观察试验雏鸡数次，记录精神、食欲、粪便等状况，根观察试验雏鸡数次，记录精神、食欲、粪便等状况，根据不同试验组别分别给足相应的饲料和饮水。据不同试验组别分别给足相应的饲料和饮水。 第第 3 3 天开始检查粪便，每天数次，记录各试验组血粪堆天开始检查粪便，每天数次，记录各试验组血粪堆数（仅有血丝不算），直至第数（仅有血丝不算），直至第 8 8 天扑杀剖检为止。天扑杀剖检为止。 对人工接种第对人工接种第 3 3 天后死亡的雏鸡应逐只进行称重、剖检，天后死亡的雏鸡应逐只进行称重、剖检，查明死因，并做好详细记录。查明死因，并做好详细记录。 第第 5 5 天开始收集

11、每组试验鸡的粪便，集中分别检查出每天开始收集每组试验鸡的粪便，集中分别检查出每组雏鸡排出的卵囊总数。组雏鸡排出的卵囊总数。 第第 8 8 天将各试验组雏鸡分别进行扑杀剖检，一般先扑天将各试验组雏鸡分别进行扑杀剖检，一般先扑杀不感染不给药组，然后为给药组，最后是感染不给杀不感染不给药组，然后为给药组，最后是感染不给药组。剖检器具要分开，每组一套。药组。剖检器具要分开，每组一套。 剖检前逐只称重，剖检后重点检查盲肠病变，根据病剖检前逐只称重，剖检后重点检查盲肠病变，根据病变标准进行评分。变标准进行评分。 然后将盲肠按试验组进行消化（消化液配方为：浓盐然后将盲肠按试验组进行消化（消化液配方为：浓盐酸

12、酸0.7ml0.7ml、胃蛋白酶、胃蛋白酶0.5-1g0.5-1g、蒸馏水、蒸馏水100 ml100 ml）或制成匀）或制成匀浆，来计数盲肠卵囊数。浆，来计数盲肠卵囊数。6 6、药效判定方法、药效判定方法 药效判定方法及依据以“抗球虫指数（ACl )”来判定药物效力，其计算方法为： ACl=ACl=（相对增重率得分存活率得分）（相对增重率得分存活率得分）- -（病变扣（病变扣分卵囊扣分血粪扣分）分卵囊扣分血粪扣分） (1(1）相对增重率得分）相对增重率得分 以不感染不给药组在试验期间每鸡的平均增重为100%，算出其它各组每鸡的平均增重百分率，即相对增重率，相对增重率x100即为相对增重率得分。

13、 (2(2）存活率得分）存活率得分 以不感染不给药组的存活率为100% ，算出其它各组试验鸡存活率，存活率x100即为存活率得分。 (3(3）血粪扣分）血粪扣分 分别对各组试验鸡生前最严重的一天血粪进行记分，该天每鸡平均血粪堆数在 1-3.9堆，则分别记 1-3.9分，如平均3.5堆即记3.5分，依次类推。 4堆及其以上的计4 分，一直无血粪的记 0 分。血粪记分x5即为该组血粪扣分数。(4(4）病变扣分）病变扣分 以各试验组平均每只雏鸡的病变记分以各试验组平均每只雏鸡的病变记分 x5 x5 ，即为该组病变扣，即为该组病变扣分数。分数。病变记分标准：病变记分标准：A A、无卵囊。盲肠正常。记、

14、无卵囊。盲肠正常。记 O O 分分 B B、有卵囊。盲肠粘膜稍增厚，有少量散在性出血或少量肠芯。记、有卵囊。盲肠粘膜稍增厚，有少量散在性出血或少量肠芯。记 1 1 分。分。C C、有卵囊。盲肠壁增厚，有明显的血液或血样肠内容物。记、有卵囊。盲肠壁增厚，有明显的血液或血样肠内容物。记 2 2 分。分。D D、有卵囊。盲肠粘膜增厚，有大量的血凝块或明显的血样肠芯。记、有卵囊。盲肠粘膜增厚，有大量的血凝块或明显的血样肠芯。记3 3分。分。E E、死亡。外观盲肠呈酱色，明显肿大。有卵囊，内容物血样。记、死亡。外观盲肠呈酱色，明显肿大。有卵囊，内容物血样。记 4 4 分。分。（5 5）卵囊扣分）卵囊扣分

15、 把剖检后消化的盲肠匀浆内卵囊数与该组第 5-8天粪中卵囊数相加，分别求出每组每鸡的平均卵囊数，按下列标准扣分。7 7、药效的判定标准、药效的判定标准 抗球虫指数（ACI）在120以下，不宜用作抗球虫药；在160以下为控制球虫感染不满意，在160-180之间只有中等的控制球虫感染作用，在 180 以上时控制球虫感染满意，用作抗球虫药药效好。实习时间安排实习时间安排周日：上午讲课（周日：上午讲课（40164016），羊的剖检，养鸡），羊的剖检，养鸡( (第第3 3天）天）观察鸡群（兽医院）观察鸡群（兽医院）, ,晚上晚上剖检虫体的鉴定（剖检虫体的鉴定（40164016）。）。周一：养鸡周一：养鸡( (第第4 4天）天）观察鸡群（兽医院）观察鸡群（兽医院）周二：养鸡周二：养鸡( (第第5 5天）天）观察鸡群，收集鸡粪，观察鸡群，收集鸡粪，晚上晚上检查球虫卵囊检查球虫卵囊周三：养鸡周三：养鸡( (第第6 6天）天）观察鸡群，收集鸡粪，观察鸡群，收集鸡粪，晚上晚上