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文档简介
1、SysmexXS-500i血液分析仪作业指导书SysmexAutomatedHematologyAnalyzer(XS500i)血细胞分析仪是用于检测血细胞(红细胞、白细胞和血小板)数量和白细胞分类的仪器。检测血液中血细胞数量的变化对临床有关疾病的诊断、观察疾病的变化及治疗效果具有重要参考价值。1、检验目的SysmexAutomatedHematologyAnalyzer(XS500i)血细胞分析仪是用于检测血细胞(红细胞、白细胞和血小板)数量和白细胞分类的仪器。检测血液中血细胞数量的变化对临床有关疾病的诊断、观察疾病的变化及治疗效果具有重要参考价值。2、原理XS500i采用一束半导体激光照射
2、标本,并依据每个细胞产生的三种信号来相互区分,即前向散射光,侧向射散光和侧向光和侧向荧光。前向散射光反映细胞体积,侧向散射光反映细胞内涵物,如核和颗粒,侧向荧光反映细胞脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA盾量。.DIFF通道:表面活性剂可完全溶解红细胞和血小板,部分溶解白细胞。第2种试剂使核酸染上荧光染料。XS500i的DIFF通道可将白细胞分成5类。在STROMATOLYSER-4DL剂中的表面活性剂可溶解或破坏红细胞和血小板,并在白细胞膜上打出小孔。在STROMATOLYSER-4DS剂中的聚次甲基染料可进入破损白细胞,与核酸和细胞器结合,经波长633nm的激光照射,所产生荧光强度与细
3、胞核酸含量成一定比例。在STROMATOLYSER-4DL齐IJ中的有机酸能与嗜酸性颗粒特异结合,根据侧向散射光信号强度,能提高嗜酸性粒细胞从中性粒细胞区分出来能力。3、仪器SYSMEXXS-500自动血液分析仪4、试剂:稀释液:CELLPACK(PK-30L)氯化钠:6.38g/L硼酸:1.0g/L四硼酸钠0.2g/LEDTA-2K0.2g/LHb溶血素:SULFOLYSER(SLS-210A)月桂洗硫酸钠:1.7g/LSTORMATOLYSER4DL(FFD-200A)非离子表面活性剂:有机季镂盐:WBC分类染液:STORMATOLYSER4DS(FFS-800A)聚次甲基染料:甲醇:%1
4、,2-亚乙基二醇:%5 .操作步骤:.打开电脑.双击“IPU”图标,出现IPU窗口和登陆对话框。输入用户名和密码。点击确认进入IPU。检查废液是否已满,并倒空。打开主机电源,IPU与主机通信连接.主机初始化,然后做本底。本底通过后,主机指示灯变绿,表示仪器处于待机状态,可以开始检测质控标本了。.质控检测:点击“手动”按钮,出现“手工样本号”对话框,在“手工样本号”对话框再点击“质控”按钮,出现“选择质控文件”对话框,选择好质控文件后,点击确认打开所选质控文件,混匀质控标本,按“开始”键开始分析质控样本,分析完后跳出质控样本分析结果,观察结果是否在控,若在控按“接受”按钮退出,开始检测病人样本,
5、若失控按“取消”退出,查找原因,继续检测质控样本,直到质控结果在控。.样本分析:点击“手动”按钮,出现“手工样本号”对话框,在“手工样本号”对话框输入样本号,选择分析模式“CBC+DIFF,样本预稀释模式“是”或“否”。点击确认,混匀样本,按“开始”键开始分析样本。分析结束后在“浏览器”下的“主屏”界面,观看结果、直方图和散点图,判断是否需要复片。.关机:双击“菜单”下的“关机”按钮,跳出“关机”对话框,点击“执行”按钮,主机自动冲洗2分钟,之后提示关闭主机电源,然后关IPU窗口退出程序,最后关闭电脑。仪器维护:5.1.1. 每日维护:每天关机自动清洗,如24小时待机,则执行一次“菜单”下的“
6、自动清洗”,5.1.2. 每周维护:在“控制器”“保养”下执行排空废液,堵孔去除,去除气泡。5.1.3. 每月维护:每月或1200次分析之后开展一次每月维护,在“控制器”“保养”“每月清洗”下执行,同时执行清洗废液瓶。6 .参考范围:6.1.1. 白细胞(WBC)计数:成人(4-10)X109/L儿童(5-12)X109/L新生儿(15-20)X109/L6.1.2. 白细胞分类(成人):中性粒细胞(50-70)%淋巴细胞(20-40)%嗜酸性粒细胞()%嗜碱性粒细胞(0-1)%单核细胞(3-8)%.红细胞(RBC)男X1012/L血红蛋白(HGB):.血小板(PLT).血球压积(HCT):女
7、X1012/L新生儿(6-7)X1012/L男(120-160)g/L女(110-150)g/L新生儿(170-200)g/L(100-300)X109/L男女平均红细胞体积(MCV):平均红细胞血红蛋白含量(MCH):平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC):红细胞体积分布宽度变异系数(RDW-CVJ:红细胞体积分布宽度标准差(RDW-SD):血小板体积分布宽度(PDW):平均血小板体积(MPV):大血小板比率(P-LCR:(86-100)fl(26-31)pg(310-370)g/L()%;()fLo%(13-43)%。7 .临床意义:.白细胞7.1.1 .白细胞计数7.1.1.1. 生理性增加
8、新生儿、运动、饭后、冷水浴后、疼痛、月经期、受寒、妊娠、分娩、阵发性心动过速、阳光或紫外光照射、抽搐、恶心、呕吐、麻醉等。7.1.1.2. 病理性增加类白血病、白血病、急性化脓性细菌感染、急性溶血、急性失血、单核细胞增多症、淋巴细胞增多症、真性红细胞增多症、腮腺炎、病毒性肝炎、淋巴瘤、组织坏死、手术后、肿瘤转移、药物中毒、代谢性酸中毒、过敏等。7.1.1.3. 减少伤寒、副伤寒、斑疹伤寒、兔热病、布鲁杆菌热、流感、麻疹、风疹、革登热、传染性肝炎(亦可增多)、疟疾、过敏性休克、系统性红斑狼疮、粟粒性结核、败学症、重症细菌感染、恶液质、放射治疗、肿瘤化疗。恶性贫血、非白细胞性贫血、再生障碍性贫血、
9、脾功能亢进、戈谢病、Felty综合症、CheAdiak-Higashi综合症、阵发性睡眠性血红蛋白尿症等。7.1.2 白细胞分类计数:见下述各种白细胞增多、减少的临床意义中性粒细胞(N)1)生理性N增多:饱餐、激动、剧烈运动、高温、严寒可使N暂时性增高、新生儿、月经期、妊娠5个月以上可增高,生理性增多都是一过性的,不伴有白细胞质量变化2)病理性中性粒细胞增高:原因很多,大致归为反应性增多和异常增生性增多两大类:反应性增多是机体对各种病因刺激的应激反应,动员骨髓贮存池中的粒C释放或边缘池粒C进入血循环。因此,增多的粒C大多为成熟的分叶核粒C或较成熟的杆状核粒C,而异常增生性增多为造血组织中原始或
10、幼稚粒C大量增生,释放至外周血中的主要是病理性粒Q急性失血,可能与大出血所致的缺氧和机体的应激反应,动员骨髓贮存池中的血细胞释放有关。急性中毒恶性肿瘤非造血系统恶性肿瘤有时可出现持续性WBC增高,以N为主,可能的机制为:a.肿瘤组织坏死的分解产物刺激骨髓中的粒细胞释放b.某些肿瘤如肝Ca、肾Ca等肿瘤细胞可产生促粒细胞生成因子c.恶性肿瘤骨髓转移破坏骨髓对粒细胞释放的调控作用。异常增生性增多:见于粒C白血病如AML、CML,骨髓增殖性疾病。中性粒细胞减少:感染性疾病病毒感染:流感、麻诊、风诊、肝炎;细菌:伤寒,严重的细菌感染年老:慢性消耗疾病或晚期恶性肿瘤伴感染-预后差血液系统疾病非白血性白血
11、病恶性贫血物理化学因素、放射线、核素、毒物、药物单核-巨噬C系统功能亢进,脾亢其它过敏性休克淋巴细胞增高:生理性增高:儿童,出生4-6天的可达50%,4-6岁后逐渐减低病理性增高:百日咳、传染性单核细胞增多症、淋巴细胞性白血病、传染淋巴细胞增多症、病毒性肝炎、弓形虫病减低:急性感染、粟粒性结核、晚期肿瘤、艾滋病、伴T淋巴细胞减少的免性缺陷单核细胞增高:单核细胞性白血病、系统性红斑狼疮、亚急性细菌性心内膜炎、活动性结核、急性感染恢复期、原虫感染减低:使用皮质类固醇激素、再生障碍性贫血、多毛细胞白血病嗜碱性粒细胞增高:慢粒、何杰金病、癌转移、铅和铀中毒等;减低无意义。嗜酸性粒细胞增高:变态反应性疾
12、病哮喘尊麻诊药物过敏寄生虫病血吸虫、丝虫、囊虫皮肤病:湿诊剥脱性皮、银屑病血液病:CML、LyphomaE白血病某些急性肿瘤:肿瘤转移或有坏死灶的恶性肿瘤某些传染病,传染病感染期,E常减低,唯有猩红热急性期E增加其它,风湿性疾病,垂体前叶功能减退,肾上腺皮质功能减退高E综合征,少见,这组疾病包括肺浸润和E增高,过敏性肉芽肿,E心内膜炎减低:临床意义较小,长期应用皮质激素后.红细胞(RBC):7.2.1, 生理性减少:见于妊娠中后期、6个月至2岁的婴儿等。7.2.2, 病理性减少:造血原料不足、造血功能障碍、红细胞破坏过多或失血所引起的各种贫血。7.2.3, 相对性增多:主要因血浆容量减少所致,
13、见于脱水、呕吐、腹泻、多尿、多汗、大面积烧伤、吸烟、高血压、肥胖等。7.2.4, 代偿性增多主要见于缺氧、新生儿、高原环境、CO中毒、严重肺气肿、肺源性心脏病、先天性心脏病、心衰等。7.2.5, 绝对性增多克隆性真性红细胞增多;非隆性红细胞增多,与促红细胞生成素产生过多有关,见于肾癌、肝细胞癌、雄激素分泌细胞肿瘤、肾囊肿、肾盂积水、肾移植、小脑血管瘤、子宫肌瘤。血红蛋白(HCG):生理性增加:新生儿、高原居住者。病理性增加:真性红细胞增多症、代偿性红细胞增多症(如先天性青紫性心脏病、慢性肺性疾病、脱水)。减少:各种贫血、白血病、产后、手术后、大量失血。红细胞比积(HCT):与红细胞计数、血红蛋
14、白测定的意义类同。血小板(PLT)7.5.1 ,生理性正常人血小板在一天内可有6%-10%变化;表现为早晨低,午后较高;春季低,冬季略高;平原较低,高原较高;静脉血比毛细血管血高10%;月经前低,后升高;妊娠中晚期升高,分娩后减低;运动后升高,休息后恢复。7.5.2 病理性减少:除创伤之外,血小板减少是引起出血的常见原因。常见疾病有:、血小板生成障碍,如急性白血病、再生障碍性贫血;、血小板破坏过多,如ITP、脾功能亢进,系统性红斑狼疮;、血小板消耗过多,如DIC血栓性血小板减少性紫瘢。增多(血小板大于400X109/L):、骨髓增生性疾病:慢性粒细胞白血病,真性红细胞增多症;、原发性血小板增多
15、症;、急性大出血,急性溶血,急性化脓性感染;、脾切除手术后。,MCV、MCH、MCHC主要用于贫血的形态学分类,见下表贫血的形态学分类贫血的形态学分类MCV(fL)MCH(pg)MCHC(g/L)大红细胞性贫血100-16035-50310-370正红细胞性贫血80-10027-35310-370单纯小细胞性贫血72-8021-26300-370小细胞低色素性贫血50-8012-30240-300.RDW-CMRDW-SD7.7.1. 用于缺铁性贫血的诊断和疗效观察,缺铁性贫血时RDW增大,经治疗后可恢复正常。7.7.2. 用于小细胞低色素性贫血的鉴别,缺铁性贫血时RDW增大,而轻型珠蛋白生成
16、障碍性贫血时RDW正常。7.7.3. RDW与MCV结合可将贫血分为6种。小细胞均一性:MCV下降,RDW正常,如轻型珠蛋白生成障碍性贫血。小细胞不均一性:MCV下降,RDW增大,如缺铁性贫血。正常细胞均一性:MCV、RDW均正常,如某些慢性疾病。MCV正常,RDW增大,如早期缺铁性贫血。大细胞均一性:MCV增大,RDW正常,如再生障碍性贫血。大细胞不均一性:MCV、RDW均增大,如巨幼细胞性贫血。,MPV、PDWP-LCR7.8.1. MPV其临床意义要结合PLT的变化才二价值。、鉴别血小板减少的原因:当骨髓造血功能损伤致血小板减少时,MPV减少;当血小板在周围血液中破坏增多时,导致血小板减
17、少,MPV增大;血小板分布异常致血小板减少时,MPC正常。、MPV增大可作为骨髓造血功能恢复的较早期指征:骨髓造血功能衰竭时,MPV与PLT同时持续下降;造血功能抑制越严重,MPV越小;当造血功能恢复时,MPV增大常先于PLT升高。、其它:MPV增大见于骨髓纤维化、ITR血栓性疾病及血栓前状态、脾切除、慢粒、巨大血小板综合症、镰刀细胞T贫血;MPV减小见于脾亢、化疗后、AA、巨幼细胞性贫血等。7.8.2. PDW是反映血小板体积大小的异质性参数,增大见于急淋化疗后、巨幼细胞性贫血、脾切除、慢粒、巨大血小板综合症、血栓性疾病等;可用于鉴别原发性血小板增多症和反应性血小板增多症,前者PDW增加,后
18、者PDW正常。7.8.3. P-LCR代表血小板计数中体积>12fL的血小板的比值或数量,有助于识别堆集血小板、大血小板和细胞碎片,并可监测骨髓的造血功能8 .标本采集:随机采取病人静脉血或末梢血数滴,用100g/LEDTA-K2抗凝(20ul抗凝1ml血,相当于2mgEDTAK21ml血)。9 .注意事项:,血细胞计数应用EDTA-K2为抗凝剂,用量为EDTA-K2可抗凝1ml血不能用肝素或枸檬酸钠等抗凝剂。,采集后在室温中贮存不应超出6h;如需制用血涂片应在2h内完成。,测定前抗凝血应充混匀,任何小凝块或血小板聚集均会影响血细胞计数。,注意病理因素对血液分析仪使用的影响,特别是各系统的报警提示。如是否有大血小板对血小板计数的影响;有无有核红细胞对白细胞计数的影响等等。,如有冷凝集现象,将血置37c水浴箱10min后立即测试。10 .质量控制:,每日工作开始应先做上海市临床检验中心的全血质控品,。,出现失控,应校正后并重做质控,直至符合质控要求。,按要求做好仪器校正和仪器对比工作。,做好质控、失控和校正登记。11 .报告复查:对以下情况的样本进行复查(仪器及手工)(1)白细胞不分类或者分类不完
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