D葡聚糖的检验与临床PPT学习教案

1、会计学1D葡聚糖的检验与临床葡聚糖的检验与临床2AIDS插管等侵袭性插管等侵袭性治疗治疗肿瘤和免疫肿瘤和免疫抑制治疗抑制治疗骨髓和实体骨髓和实体器官移植器官移植广谱抗生素广谱抗生素治疗治疗 侵袭性真菌感染率上升侵袭性真菌感染率上升第1页/共57页3 第2页/共57页4感染之前定殖感染之前定殖第3页/共57页5第4页/共57页6传统的方法传统的方法第5页/共57页7第6页/共57页8第7页/共57页9第8页/共57页10第9页/共57页11第10页/共57页12Clinical Infectious Diseases 2008; 46Clinical Infectious Diseases 20

2、08; 46第11页/共57页13第12页/共57页14b1,6葡聚糖 磷脂双分子层几丁质麦角固醇b1,3葡聚糖合成酶mannoproteins1,3真菌细胞膜、壁结构真菌细胞膜、壁结构羊毛固醇羊毛固醇C C1414去甲基化酶去甲基化酶1414位还原和位还原和7 78 8位异构酶位异构酶角鲨烯环氧化酶角鲨烯环氧化酶第13页/共57页15第14页/共57页16第15页/共57页17第16页/共57页18第17页/共57页19第18页/共57页20第19页/共57页21第20页/共57页22Figure 1-10 Noncompetitive sandwich method of immunoas

3、say第21页/共57页23例例 1Carmen Pazos, Jose Ponton, etc. JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY,Jan.2005n结论：结论： BG和和GM联合检测有助于临床鉴定血液病患者是否合并真菌感染联合检测有助于临床鉴定血液病患者是否合并真菌感染, 并将并将单一试验假阳性给诊疗带来的影响降低到最小单一试验假阳性给诊疗带来的影响降低到最小 .1,3-D-葡聚糖与循环半乳甘露聚糖的检测比较：葡聚糖与循环半乳甘露聚糖的检测比较： 用于治疗和监测中性粒细胞减少性成人曲霉菌病用于治疗和监测中性粒细胞减少性成人曲霉菌病 第22页/共57页24(a

4、) 侵袭性曲霉菌病合并急性髓样白血病患者侵袭性曲霉菌病合并急性髓样白血病患者给予两性霉素给予两性霉素B和卡泊芬净用药和卡泊芬净用药 治疗过程中治疗过程中BG和和GM变化情况变化情况第23页/共57页25(b) 侵袭性曲霉病合并慢性淋巴细胞白血病患者侵袭性曲霉病合并慢性淋巴细胞白血病患者 未使用两性霉素未使用两性霉素B治疗治疗 BG ()和和GM ( )变化情况变化情况第24页/共57页26(c) 多发性骨髓瘤患者多发性骨髓瘤患者(非侵袭性曲霉病非侵袭性曲霉病) BG结果假阳性结果假阳性BG ()和和GM ( )第25页/共57页27(d) Hodgkins 淋巴瘤淋巴瘤 (非侵袭性曲霉病非侵袭

5、性曲霉病)患者患者 GM结果假阳性结果假阳性 BG ()和和GM ( )第26页/共57页28(e) 急性髓样白血病患者急性髓样白血病患者(非侵袭性曲霉病非侵袭性曲霉病)白色念珠菌和光滑念珠菌白色念珠菌和光滑念珠菌 培养阳性培养阳性 BG和和GM结果假阴性结果假阴性 BG ()和和GM ( )第27页/共57页29(f) 慢性淋巴细胞白血病患者慢性淋巴细胞白血病患者(非侵袭性曲霉病非侵袭性曲霉病)白色念珠菌白色念珠菌 培养阳性培养阳性 BG和和GM结果阴性结果阴性 BG ()和和GM ( )第28页/共57页30例例 2P.Brian Smith, Daniel K.Benjamin,Jr,

6、etc. CLINICALAND VACCINE IMMUNOLOGY,July2007n结论结论研究数据显示研究数据显示, 健康儿童的健康儿童的1,3-D-葡聚糖水平高于健康成人葡聚糖水平高于健康成人 .该指标用于儿童感染性疾病的诊断应慎重该指标用于儿童感染性疾病的诊断应慎重, 1,3-D-葡聚糖在儿童葡聚糖在儿童群体的正常值区间有待进一步研究群体的正常值区间有待进一步研究 .儿童儿童1,3-D-葡聚糖水平研究葡聚糖水平研究第29页/共57页31第30页/共57页32 收集患者收集患者82例例 侵袭性真菌感染组侵袭性真菌感染组 22例例 其他真菌感染组其他真菌感染组 镰刀菌镰刀菌/接合菌接合

7、菌/丝孢菌感染丝孢菌感染 17 例例 念珠菌感染念珠菌感染 23例例 对照组对照组(血液肿瘤患者非真菌感染血液肿瘤患者非真菌感染) 20例例 414份血清标本检测份血清标本检测GM 409份血清标本检测份血清标本检测BG 侵袭性曲霉菌病患者在留取血清标本前已接受抗真菌药物侵袭性曲霉菌病患者在留取血清标本前已接受抗真菌药物治疗治疗 (包括聚烯类、氮杂茂类、棘球白素类等包括聚烯类、氮杂茂类、棘球白素类等)R.Y.Hachem, D.P.Kontoyiannis, etc. JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY,Jan.2009n结论结论 对于血液肿瘤患者合并侵袭性真菌感

8、染的诊断对于血液肿瘤患者合并侵袭性真菌感染的诊断, BG的的敏感度优于敏感度优于GM .例例 3第31页/共57页33第32页/共57页34例例 41,3-D-葡聚糖和抗白色念珠菌细胞壁抗原的葡聚糖和抗白色念珠菌细胞壁抗原的IgG亚型亚型抗体用于系统性念珠菌感染诊疗抗体用于系统性念珠菌感染诊疗系统性念珠菌病患者 IgG亚型体液水平升高 抗细胞壁碎片抗细胞壁碎片IgG1抗体抗体(IgG1-CW) 抗磷酸肽甘露聚糖片段抗磷酸肽甘露聚糖片段IgG2抗体抗体(IgG2-PPM)系统性念珠菌病患者 IgG1-CW/ IgG2-PPM比值升高n结论结论1,3-D-1,3-D-葡聚糖以及葡聚糖以及IgG1-

9、CWIgG1-CW、IgG2-PPMIgG2-PPM可用于早期诊断系统性可用于早期诊断系统性 念珠菌病念珠菌病 . .1,3-D-1,3-D-葡聚糖与葡聚糖与IgGIgG亚型相结合检测可提高阳性预测值，有效指导亚型相结合检测可提高阳性预测值，有效指导 早期抗真菌药物治疗早期抗真菌药物治疗 . .N.Kondori, L.Edebo,etc. CLINICAL AND DIAGNOSTIC LABORATORY IMMUNOLOGY,Mar.2004第33页/共57页35念珠菌感染患者念珠菌感染患者14例例 1,3-D-葡聚糖结果阳性葡聚糖结果阳性系统性念珠菌病患者系统性念珠菌病患者14例例1,

10、3-D-葡聚糖检测结果均大葡聚糖检测结果均大于于20 pg/ml第34页/共57页36血浆血浆1,3-D1,3-D葡聚糖检测对血液病患者侵袭性真菌感染的诊断价值葡聚糖检测对血液病患者侵袭性真菌感染的诊断价值本研究收集疑为IFI的血液病患者血浆标本162例,其中化疗后患者85例,造血干细胞移植后患者77例。按照欧洲癌症研究治疗组织及真菌研究组(EORTC/MSG)诊断标准,所有病例中有确定诊断2例,临床诊断18例,拟诊75例,排除诊断67例。结果表明:以20 ng/m l为诊断界值,G试验的敏感性、特异性、阳性预测值(PPV)和阴性预测值(NPV)分别为75%、91%、72.4%和92.4%。在

11、75例拟诊病例中,其中有51例G试验阳性,且对广谱抗生素无效而经过抗真菌治疗有效,经过临床回顾性分析符合IFI,表明G试验使IFI诊断率提高31.4%。例例 5刘芳刘芳,吴彤吴彤,等等. 中国实验血液学杂志中国实验血液学杂志Journal of Experimental Hematology 2009第35页/共57页37G试验对试验对IF I诊断率的影响诊断率的影响在所有162例患者中,若无G试验作为诊断标准,仅20例患者达到确诊+临床诊断真菌感染标准,占总病例数12.3%。若将G试验阳性作为微生物学标准,则有71例达确诊+临床诊断标准,占总病例数的43.8%。在75例拟诊病例中,其中51例

12、真菌培养阴性而G试验阳性的患者,均对广谱抗生素无效而经过抗真菌治疗病情好转,经过临床回顾性分析符合IFI,故G试验使IFI诊断率提高了31.4%。第36页/共57页38血浆血浆1,3-D1,3-D葡聚糖对深部真菌感染诊断的研究葡聚糖对深部真菌感染诊断的研究例例 6赵勇赵勇,王红王红,等等. 中国真菌学杂志中国真菌学杂志2007年年8月第月第2卷第卷第4期期该研究共留取用于检测血浆葡聚糖的标本182份,其中来自确诊病例和高度疑似病例(真阳性)共18份,其余为可能感染病例(18份)和无深部真菌感染病例(146份,真阴性)。统计学结果提示血浆葡聚糖水平对深部真菌统计学结果提示血浆葡聚糖水平对深部真菌

13、感染诊断的准确性优于单纯依靠各种标本真感染诊断的准确性优于单纯依靠各种标本真菌培养或真菌涂片是否阳性对深部真菌感染菌培养或真菌涂片是否阳性对深部真菌感染的判断。的判断。AUC95%置信区间置信区间葡聚糖葡聚糖0.8870.795-0.979真菌培养真菌培养0.8400.744-0.936真菌涂片真菌涂片0.8330.738-0.927用于诊断深部真菌感染各指标用于诊断深部真菌感染各指标ROC曲线下面积曲线下面积第37页/共57页39血清血清1,3-D-葡聚糖检测在念珠菌菌血症诊断中的价值葡聚糖检测在念珠菌菌血症诊断中的价值例例 7对2007年1月至2009年4月的25例念珠菌菌血症患者、60例

14、细菌菌血症患者、25例念珠菌口咽定植者、20例健康体检者的血清1,3-D-葡聚糖含量进行比较分析。念珠菌菌血症组的血清1,3-D-葡聚糖含量为115.242.3 ng/L,明显高于其他各组,其他各组间的血清1,3-D-葡聚糖含量无显著差异。结论结论:血清血清1,3-D-葡聚糖的检测是诊断念珠菌菌血症的有效指标。葡聚糖的检测是诊断念珠菌菌血症的有效指标。四组间比较四组间比较:F=119.493,P0.105;念珠菌菌血症组与细菌菌血症组、念珠菌口咽定植组、健康体检组的两两比较念珠菌菌血症组与细菌菌血症组、念珠菌口咽定植组、健康体检组的两两比较: P值均值均0.05.刘英其刘英其. 中国卫生检验杂

15、志中国卫生检验杂志2009年年9月第月第19卷第卷第9期期第38页/共57页40血浆血浆1,3-D-葡聚糖与抗深部白色念珠菌感染药物疗效关系的实验研究葡聚糖与抗深部白色念珠菌感染药物疗效关系的实验研究例例 8李世荣李世荣,王红王红,等等. 临床和实验医学杂志临床和实验医学杂志2007年第年第6卷第卷第6期期本文采用110只小鼠随机分成3组,空白对照组、模型组、氟康唑组,建立深部白色念珠菌感染的动物模型。定量检测血浆中1,3-D-葡聚糖的含量,双肾组织匀浆液培养计数菌落数。用于探讨深部真菌感染小鼠血浆1,3-D-葡聚糖水平与抗真菌药物疗效的关系。各处理组不同时间点血浆各处理组不同时间点血浆1,3

16、-D-葡聚糖的比较葡聚糖的比较组别组别治疗前治疗前治疗第治疗第1天天治疗第治疗第3天天治疗第治疗第5天天模型组模型组4791.474415.995397.004640.993537.984259.212355.313663.52氟康唑组氟康唑组3978.093500.152976.153953.12662.601665.5417.8715.03对照组对照组8.956.06治疗前模型组血浆治疗前模型组血浆(13)-D-葡聚糖水平明显高于空白对照组葡聚糖水平明显高于空白对照组,说明血浆说明血浆1,3-D-葡聚糖水平异常升高可以反映深部真菌感染的存在。葡聚糖水平异常升高可以反映深部真菌感染的存在。氟

17、康唑组血浆氟康唑组血浆1,3-D-葡聚糖水平随着治疗逐渐减低葡聚糖水平随着治疗逐渐减低,从治疗第从治疗第5天开始与模型组相比天开始与模型组相比,血浆血浆1,3-D-葡聚糖水平差异具有统计学意义葡聚糖水平差异具有统计学意义(P0.05),说明血浆说明血浆(13)-D-葡聚糖水平与氟康唑的治疗呈量效关系。葡聚糖水平与氟康唑的治疗呈量效关系。第39页/共57页41大鼠感染大鼠感染曲霉菌后曲霉菌后1,3-D-葡聚糖水平变化葡聚糖水平变化该研究目的在于建立患侵袭性肺曲霉菌病动物模型, 监测其血清1,3-D-葡聚糖浓度变化, 评价抗真菌感染疗效 .n结论结论1,3-D-葡聚糖可用于早期检测侵袭性肺曲霉菌病

18、和评价抗真菌药物疗效葡聚糖可用于早期检测侵袭性肺曲霉菌病和评价抗真菌药物疗效Nathan P.Wiederhold, Laura K.Najvar, etc. ANTIMICROBIAL AGENTS AND CHEMOTHERAPY,Mar.2008例例 9大鼠感染曲霉菌后第三天大鼠感染曲霉菌后第三天1,3-D-葡聚糖水平明显升高葡聚糖水平明显升高, 49.2pg/ml 609pg/ml第40页/共57页42卡氏肺孢子虫肺炎血清学标志物卡氏肺孢子虫肺炎血清学标志物卡氏肺孢子虫肺炎(Pneumocystis pneumonia, PCP) 当宿主防御机能受损时易引起疾病,最常见的是血液系统恶性

19、疾病, 淋巴增生性疾病,肿瘤化疗和艾滋病等引起的细胞免疫缺乏 .PCP因没有特异性诊断指标和明显临床症状较难治疗, 通常多药物联合治疗, 常引发多器官感染 .该研究收集患者57例 标本支气管肺泡灌洗液BAL 检测项目： 乳酸脱氢酶乳酸脱氢酶 LDH (LDH (肺部感染炎症指标肺部感染炎症指标) ) 1,3-D- 1,3-D-葡聚糖葡聚糖 BG (BG (真菌感染标志物真菌感染标志物) ) KL-6 ( KL-6 (间质性肺炎标志物间质性肺炎标志物) )n结论结论1,3-D-葡聚糖为诊断葡聚糖为诊断PCP的最佳指标的最佳指标.LDH与氧分压相结合适用于反映肺部组织损害程度与氧分压相结合适用于反

20、映肺部组织损害程度.对于严重呼吸衰竭患者对于严重呼吸衰竭患者, BAL的的 1,3-D-葡聚糖水平能准确反映患者病情葡聚糖水平能准确反映患者病情 .Sadatomo Tasaka, Naoki Hasegawa, etc.Chest2007例例 10第41页/共57页43PCP组与非组与非PCP组组 LDH / BG / KL-6 水平比较水平比较第42页/共57页44第43页/共57页45第44页/共57页46各项目各项目ROC曲线下面积为：曲线下面积为： BG 0.935 KL-6 0.730 LDH 0.7041,3-D-葡聚糖的葡聚糖的ROC曲线下曲线下面积明显高于其他两个指标面积明显

21、高于其他两个指标 (p 0.01)提示提示1,3-D-葡聚糖为诊断卡氏肺孢子虫肺炎葡聚糖为诊断卡氏肺孢子虫肺炎(PCP)的最佳指标的最佳指标BGBG、LDHLDH和和 KL-6 ROCKL-6 ROC曲曲线线第45页/共57页471,3-D-葡聚糖和白色念珠菌芽管抗体葡聚糖和白色念珠菌芽管抗体用于诊断和治疗成人中性粒细胞减少性念珠菌病用于诊断和治疗成人中性粒细胞减少性念珠菌病检测白念珠菌芽管抗体(CAGT)在系统性白念珠菌感染诊断中具有一定的诊断意义n结论结论BG和和CAGT联合检测利于血液病患者合并真菌感染的检测联合检测利于血液病患者合并真菌感染的检测两试验相结合可降低单一试验的假阳性率两试

22、验相结合可降低单一试验的假阳性率Carmen Pazos,Mara-Dolores Moragues, etc. Rev Iberoam Micol 2006例例 11第46页/共57页48不同患者不同患者BG()and 抗抗CAGT()抗体动态变化情况抗体动态变化情况(a) 侵袭性念珠菌病患者合并急性髓样白血病侵袭性念珠菌病患者合并急性髓样白血病 使用两性霉素使用两性霉素B 治疗后治疗后BG和和CAGT变化情况变化情况第47页/共57页49(b) 疑似侵袭性念珠菌病患者合并慢性淋巴细胞白血病疑似侵袭性念珠菌病患者合并慢性淋巴细胞白血病未使用两性霉素未使用两性霉素B治疗治疗 BG和和CAGT滴

23、度变化情况滴度变化情况BG()and 抗抗CAGT()第48页/共57页50(c) 多发性骨髓瘤多发性骨髓瘤(非念珠菌感染非念珠菌感染)患者患者BG结果假阳性结果假阳性 BG()and 抗抗CAGT()第49页/共57页51(d) 非非Hodgkins 淋巴瘤淋巴瘤(非念珠菌感染非念珠菌感染)患者患者 CAGT结果假阳性结果假阳性 BG()and 抗抗CAGT()第50页/共57页52天津医科大学总医院天津医科大学总医院 病例病例1患者患者A，女性，女性，82岁。岁。病史：病史：2009年年8月月31日外伤后，面部、左上肢疼痛、伴大小便失禁日外伤后，面部、左上肢疼痛、伴大小便失禁5天入院，于干部保健