庆大霉素生产工艺

1、硫酸庆大霉素生产工艺流程班级 08 药剂 姓名汪骏学号 08314028培养 48小时左右，培养24小时左右，硫酸庆大霉素工业发酵的总流程图孢子悬浮液的制备流程及工艺要求设备：蒸汽灭菌柜双人净化工作台操作步骤1. 分装纯化水至三角瓶，每瓶装150mL 左右。2. 组装接种瓶及接种皮管，组装严密，包扎结实。3. 以上器材及接种用具灭菌，125 ± 1 C， 60min 。4. 在缓冲间穿好无菌衣，戴上无菌口罩，进入洁净室，符合人流物流进出程序。5. 用酒精棉球擦拭超净台面双手，先擦台面，后擦手。6. 开启超净台通风，观察风速是否正常，将接种瓶、皮管、无菌水、接种铲及斜面摆在洁净台上。7

2、. 将灭菌纯化水倒入茄子瓶中，一瓶纯化水倒两只茄子瓶。8. 用接种铲将孢子刮下制成孢子悬浮液，用力适度，勿刮出培养基碎屑。9. 打开接种瓶瓶口，将孢子悬浮液全部倒入接种瓶10. 制备完毕关闭洁净台，出洁净室，符合人流、物流进出程序。物料指标物料编物投产数号料名称量06010纯150-2013化水0ml-子4 支斜面孢子一级种子发酵培养实际培养参数控制培养参数控制养时间温压 气压力气流量拌时间8 小时7 度 .06MPa .1MPa 0m*3/h左右镜检镜检步骤1. 取样 打开蒸汽阀先灭菌，然后关蒸汽阀，打开取样阀取样。取样完毕后关阀，再次打开蒸汽阀灭菌，关闭。2. 用载玻片沾取一薄层发酵液，加

3、热以使发酵液固定在载玻片上，然后滴加美兰溶液进行染色，在显微镜下观察目的菌的菌丝形态。3. 配制酚红肉汤培养基，在培养基中加入发酵液在恒温箱中进行培养。一定条件下观察培养基颜色的变化来判断是否染菌。4. 另取样用粘度计测粘度。一级种子镜检1. 正常标准菌丝形态：实团， 网团， 边散， 伸展， 原生质充足。无菌度 : 正常，即无杂菌污染。3. 实例 批号 21011097一级种子镜检生长指标生菌菌长时间丝形态丝数量菌情况量少常量常 量2小2h网、分支短3网0h团、实团3网8h团、较伸展较多常4实量6h团、边散多常5实量1h团、伸展多常二级种子的培养进料状况表 4 二级种子培养进料状况物物料量投产

4、单位生批料编号料名称0淀1卫0101009粉50Kg辉玉兰公609014司0玉4自0101006米粉0 Kg制9070010豆1自0101007饼粉00 Kg制9070090蛋2滑0101003白胨5 Kg云东升公906013司0硫4中0101002酸铵Kg石化岳阳906004公司0硝0交0101004酸钾.4 Kg城晋盛公903002司0轻2焦0101001质碳酸钙5 Kg作兰冠耀905003公司0氯3上0103272化钴0 g海先金公90309司0泡0开0101016敌.6L封树脂厂9050130饮3601007用水.2t二级种子镜检1. 正常标准菌丝形态：网团， 边散， 伸展， 连片、

5、原生质充足。无菌度 : 正常，即无杂菌污染。2. 实例 批号 21011097表 5 二级种子镜检生产指标长时间生丝形态菌菌杂丝数量菌情况4散量正h多常8大量正h网片、伸展多常1大量正2h网片、伸展多常1大量正6h网片、伸展多常实际培养参数控制表 6 二级培养参数控制指标空养时间温压气压力气流量拌时间4 小时7度.03MPa.7MPa70m*3/h1-左右三级种子发酵进料状况表 7 三级种子培养进料状况料编号物料名称物料量投产单位生批 号0淀5卫0101009粉50Kg辉玉兰公609004司0玉1自0101006米粉20Kg制9070010豆3自0101007饼粉60Kg制9070090蛋6滑

6、0101003白胨0Kg云东升公906013司0硫1中0101002酸铵0Kg石化岳阳906004公司0硝1交0101004酸钾Kg城晋盛公903002司0轻7焦0101001质碳酸钙5Kg作兰冠耀905003公司0氯1上0103272化钴20 g海先金公90309司0淀1北0102034粉酶50g京东升公904003司0泡3开0101016敌L封树脂厂905013三级种子镜检1. 正常标准菌丝形态：散网、伸展，连片、量多。无菌度 : 正常，即无杂菌污染。2. 实例 批号 301/327表 9 三级种子镜检生产指标生菌菌杂长时间丝形态丝数量3散h网、连片、伸多展7大h片散网、伸展多1大1h片散

7、网、伸展多1大5h片散网、伸展多菌情况正常正常正常正常提炼车间生产概况和流程提炼组的任务是将庆大霉素从来自发酵车间的发酵液中提炼出来，同时也负责本车间低单位稀氨洗脱液和成盐炭脱车间活性炭滤饼中庆大霉素的提取，并最终得到含庆大霉素的洗脱液，送入浓缩岗位浓缩。庆大霉素与其他物质的分离采用阳离子交换树脂，这是基于庆大霉素的弱碱性实现的。用浓氨解析，阴离子交换脱色。发酵液提炼车间流程图酸化、中和加树脂吸附分离漂洗发酵液酸化罐树脂分离器漂洗柱阳离子交饱和树脂收集含部分庆大霉素的洗脱液回收、氨捞（再吸附）4.5%-5.3%浓氨洗脱pH8.5-9疏松0.08-0.12M稀氨洗1:20VVM-1:40VVM稀

8、酸洗解析除蛋白质等杂质调节pH值至碱性再生树脂旋光效价旋光效价 200-1000u/mL3000-4000L纯化水冲洗0.05M盐酸、0.02M氯化铵除氯离子除钙离子、镁离子除氯离子需要时压回酸化罐旁的树脂计量低单位洗脱液贮罐加入浓氨水作阳离子交换柱洗脱9500-12000L>1000u/mL高单位洗脱液经阳串阴管道进入阴离子交换柱脱色流速 1： 100-150VVM 脱色酸洗、碱中和阴离子交换树脂再洗脱液贮罐送入浓缩车提炼车间流程简介酸化、中和操作方法1. 备好酸化用盐酸、中和用10mol/LNaOH ，压备用树脂入计量槽；2. 接发酵液20 吨左右入酸化罐，缓缓加入盐酸（约1.5 吨

9、） ，调 pH1.4-3.0 ，加入泡敌消沫，计量体积。该过程目 的在于裂解菌丝体，释放其中的庆大霉素，以提高收率。3. 加适量饮用水稀释（20% 左右） ，用10mol/LNaOH 中和 pH6.4-6.8 ；4. 按 6.5 万 u/mL（50 吨、 45 吨罐 ）或 6 万 u/mL （ 30 吨、 65 吨罐）计量加入732 阳离子交换树脂。30min 后复测 pH ，控制在6.4-6.8 。交换吸附5-8h 。取样送化验组测生物效价。庆大霉素的洗涤操作方法1. 配制 0.5 mol/L HCl 与 0.2 mol/LNH4Cl 混合液， 0.08-0.12mol/L 的稀氨。2. 每

10、柱装饱和树脂1100-1500L ， 用饮用水及空气疏松树脂并用饮用水赶走气泡。3. 通入稀酸洗涤液至无钙、镁离子， 完成后用饮用水冲洗至无Cl- ， 再用 0.08 0.12mol/L稀氨水洗至pH 8.5 9.0 。庆大霉素的洗脱和脱色 操作方法：1. 配制 4.5-5.3% 的浓氨。2. 用纯化水疏松并冲洗树脂中氮根。3. 用 4.5%-5.3% 浓氨水解吸至洗脱液旋光效价 控制在 1000 u/mL 。4. 第 2 罐透光度低于70% 时，用 2mol/L HCl和 2mol/L NaOH 对 711 脱色树脂进行再生，使其可以循环使用。注意洗脱收率在98 以上。5. 树脂吸率的计算公

11、式：树脂吸率（% ）树脂投量 /总回收树脂 洗脱收率= 洗脱总亿发酵总亿庆大霉素的洗脱和脱色操作方法：1. 配制 4.5-5.3% 的浓氨。2. 用纯化水疏松并冲洗树脂中氮根。3. 用 4.5%-5.3% 浓氨水解吸至洗脱液旋光效价 控制在 1000 u/mL 。4. 第 2 罐透光度低于70% 时，用 2mol/L HCl和 2mol/L NaOH 对 711 脱色树脂进行再生，使其可以循环使用。注意洗脱收率在98 以上。5. 树脂吸率的计算公式：树脂吸率（% ）树脂投量 /总回收树脂 洗脱收率= 洗脱总亿发酵总亿庆大霉素的成盐碳脱成盐配置人员穿好防护用品，先抽入总体积2/3 的纯化水，在夹层冷却下再缓慢抽入1/3 的浓硫酸，搅拌均匀，冷0.5 小时以上。上批装塔的浓缩液与本批浓缩液混合后压入成盐炭脱罐。在不断搅拌及夹层通冷却水冷却下缓慢加入6mol/L