14药物分析2课时

1、第八章杂环类药物的分析讲授授课时数方法授课时间教具第九周多媒体1、明确杂环类药物的性质、结构特征、鉴别试验、杂质检查、含量测定方法及注意事项；2、掌握解析类似结构药物质量分析方法的能力。叱嚏类药物、吩曝嗪类药物、苯并二氮杂革类药物、唾诺酮类药物及咪嚏类药物的分析；解析杂环类药物质量分析方法;项目10毗咤类药物、吩嚷嗪类药物、苯并二氮杂革类药物、唾诺酮类药物及咪噪类药物的分析杂环化合物：碳环中夹杂有非碳原子的环状有机化合物，其中非碳原子称为杂原子，一般为O、S、N等。在化学合成药中，已成为现代药物中应用最多、最广的一大类。主要包括叱噬类：异烟肌、尼克刹米和硝苯地平；唾咻类：硫酸奎宁、奎尼丁、盐酸

2、环丙沙星等；托烷类：硫酸阿托品、氢澳酸东K若碱等；吩嚷嗪类：氯丙嗪、异丙嗪、奋乃静和盐酸硫利达嗪等;苯并二氮杂卓类：地西泮、奥沙西泮和氯氮卓第一节叱噬类药物、结构与化学性质(1)含有N原子的六元单环，例如：异烟肌、尼克刹米和硝苯地平异烟脱(isoniazid)尼克刹米(nikesethamide)硝苯地平(nifedipine)(2)化学性质:弱碱性：叱噬环N原子为碱性原子，叱噬环pKb为8.8（水中）；尼克刹米：除了叱噬环上的N原子外，叱噬环B位被酰氨基取代，遇碱水解释放二乙胺。Chp2005鉴别：取本品10滴，加氢氧化钠试液3ml,加热，即发生二乙胺的臭气，能使湿润的红色石蕊试纸变蓝色。还

3、原性：异烟肌叱噬环丫位被酰脏所取代，有较强的还原性，可被不同的氧化剂氧化，也可与某些含有染基的化合物发生缩合反应。异烟肥与硝酸银-银镜反应Chp2005:取本品约10mg,置试管中，加水2ml溶解后，加氨制硝酸银试液1ml,即发生气泡与黑色浑浊，并在试管壁上生成银镜。NH2-NH2+4AgNO34AgJ+N2'+4HNO3缩合反应：Chp2005异烟册鉴别：取本品约0.1g,加水5ml溶解后，加10%香草醛的乙醇溶液1ml,摇匀，微热，放冷，即析出黄色结晶；滤过，用稀乙醇重结晶，在105c干燥后，依法测定（附录VIC）,熔点为228231C,熔融时同时分解。NNH2HCHO-H2O*O

4、/mn=ChHIoch3OHOCH3香草醛OH异烟踪（黄色结晶）异烟肌的其他鉴别反应与亚硒酸作用，可将其还原为红色硒的沉淀NH2+SeO2一IINJOH+N2t+Se，+H2O主要化学性质与鉴别反应口比噬环的特性:二硝基氯苯反应（Vongerichten反应）：在无水的条件下，口比噬及其衍生物与3,4-二硝基氯苯混合共热或加热至熔融，冷却后，加醇制氢氧化钾溶液将残渣溶解，溶二、鉴别反应形成沉淀的反应（可与重金属盐类或苦味酸形成沉淀）：尼克刹米的鉴别：取本品2滴，加水1ml,摇匀，加硫酸铜试液2滴与硫氟酸俊试液3滴，即生成草绿色沉淀；异烟肌、尼克刹米可与氯化汞形成白色沉淀。分解产物的鉴别反应:异

5、烟肌、尼克刹米等与无水碳酸钠或氢氧化钙共热，可发生脱竣降解，并有叱呢臭味逸出。紫外吸收光谱鉴别：芳杂环在紫外光区有特征吸收三、有关物质检查（1）异烟肌中肌的检查异烟肌不稳定，游离册即可能在原料中引入，又可能在贮藏过程中降解-诱变剂和致癌物质。1、TLC检查方法：取本品，加水制成每1ml中含50mg的溶液，作为供试品溶液。另取硫酸肌加水制成每1ml中含0.20mg（相当于游离册50卜g）的溶液，作为对照溶液。照薄层色谱法（附录VB）试验，吸取供试品溶液10膜与对照溶液2口，分别点于同一硅胶薄层板（用竣甲基纤维素钠溶液制备）上，以异丙醇一丙醇（3:2）为展开剂，展开后，晾干，喷以乙醇制对二甲氨基苯

6、甲醛试液，15分钟后检视。在供试品主斑点前方与硫酸肌斑点相应的位置上，不得显黄色斑点。2、比浊法JP（14）采用样品中加水杨酸的乙醇溶液观察浑浊的方法一专属性差3、差小分光光度法肌一对-二甲氨基苯甲醛一黄色缩合物（对-二甲氨基苯甲醛连氮）465nm波长有最大吸收异烟肌一对-二甲氨基苯甲醛一缩合物（对-二甲氨基甲叉）（2）尼克刹米中有关物质的检查无杂质对照品-高低浓度对比法检查方法：取本品，加甲醇制成每1ml中含40mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取适量，加甲醇分别稀释成每1ml中含0.4mg和40仙g的溶液，作为对照溶液（1）和（2）。照薄层色谱法（附录VB）试验，吸取上述三种溶液各10口，

7、分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以氯仿丙醇（75:25）为展开剂，展开后，晾干，置紫外光灯（254nm）下检视。供试品溶液如显杂质斑点，与对照溶液（2）的主斑点比较，不得更深；如有1点超过时，应不深于对照溶液（1）的主斑点。HPLC法检查取供试品溶液I和对照品溶液R各20口，分别注入液相色谱仪。记录色谱图至主成分峰保留时间的2倍。供试品溶液I如出现与对照品溶液n中杂质A和B相对应的峰，其峰面积不得大于对照品溶液II中杂质A和B的面积；如出现除杂质A和B以外的其他杂质峰，其峰面积不得大于对照品溶液II中硝苯地平的峰面积；各杂质总量不得大于0.5%。供试品溶液I中小于对照品溶液R中硝苯地平峰面

8、积的10%以下的杂质峰忽略不计。第二节吩曝嗪类药物、结构与性质（1）吩曝嗪类药物为苯并曝嗪的衍生物，分子结构中均含有硫氮杂慈母核，基本结构如下：R':-H、-Cl、-CF3、-COCH3、-SCH2CH3R:具有23碳链的二甲或二乙胺基，或含氮杂环如哌嗪和哌噬的衍生物典型药物：盐酸氯丙嗪、盐酸异丙嗪、奋乃静、盐酸氟奋乃静、癸氟奋乃静、盐酸三氟拉嗪和盐酸硫利达嗪等。（2）主要的化学性质1 .紫外吸收光谱特性硫氮杂慈母核为共腕三环的冗系统，紫外区三个吸收峰值，约205nm、254nm、300nm,最强多在254nm附近，根据2位、10位取代基不同，可引起最大吸收峰的位移。当母核的二价硫被氧

9、化为碉或亚碉，则呈现四个峰值。2 .红外吸收光谱特性由于取代基R和R'的不同，具有不同的红外光谱，已被药典用于不同品种的鉴别。3 .主要的化学性质易氧化呈色：硫氮杂慈母核中的二价硫易氧化，不同的氧化剂如硫酸、硝酸、三氯化铁试液及过氧化氢等，母核易被氧化成亚碉、碉等不同的产物，随取代基的不同，呈现不同的颜色，可用于鉴别。金属离子络合呈色：未氧化的硫可与金属钳离子形成配位化合物，而氧化产物亚碉、碉则不能，可用于鉴别和含有测定，具有专属性。与钳离子络合显色：鉴别方法：取本品约50mg,加甲醇2ml溶解后，力口0.1%氯化钳溶液3ml,既有沉淀生成，并显红色，再加过量的氯化钳溶液，颜色变深。分

10、解产物反应（如癸氟奋乃静等含氟有机药物）：鉴别方法：取本品1520mg,加碳酸钠与碳酸钾各约0.1g,混匀，在600C炽灼1520分钟，放冷，加水2ml使溶解，加盐酸溶液（1一2）酸化，滤过，滤液加茜素培试液0.5ml,应显黄色。4 .特殊杂质检查检查方法:（TLC）取本品，加二氯甲烷制成每1ml中含10mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取适量，加二氯甲烷稀释成每1ml中含0.15mg和0.05mg的溶液，作为对照溶液（1）和（2）。照薄层色谱法（附录VB）试验，吸取上述三种溶液各10仙l,分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以己烷丙酮二乙胺（8.5:1:0.5）为展开剂，展开后，晾干，置紫外

11、光灯（254nm）下检视，供试品溶液如显杂质斑点，不得多于3个；具杂质斑点与对照溶液（2）的主斑点比较，不得更深；如有一点超过，应不深于对照溶液（1）的主斑点。5 .特殊杂质检查盐酸硫利达嗪中的有关物质检查对光不稳定，无杂质对照品，TLC高低浓度对比法第三节苯并二氮杂卓类药物、结构与性质（1）含氮杂原子、六元和七元环双环并合而成，其中1,4-苯并二氮杂卓类药物是目前临床应用最广泛的抗焦虑、抗惊厥药。如：地西泮、硝基地西泮、艾司哇仑、氯氮卓、阿普口坐仑、吵仑、盐酸氟西泮、氯硝西泮和奥沙西泮等，其中，除了氯氮卓外，均为地西泮的衍生物0地西泮阿普口坐仑奥沙西泮H氯氮卓（2）化学性质碱性:非水溶液滴定

12、法测定含量水解:在强酸性溶液中，形成二苯甲酮衍生物,具有的特性可用于鉴别和含有测定鉴别试验1 .沉淀反应氯氮卓稀盐酸溶液、阿普哇仑稀盐酸溶液、盐酸氟西泮水溶液、氯硝西泮稀盐酸溶液加碘化钿钾试液显现橙红色沉淀。2 .水解后呈芳伯胺反应氯氮卓和奥沙西泮的盐酸溶液（1一2）,缓缓加热煮沸，放冷，加亚硝酸钠和碱性B-蔡酚试液，生成橙红色沉淀，后者放置后颜色变暗。IClHNCH3NH2NaNO3 .硫酸荧光反应:苯并二氮杂卓类药物溶于硫酸/稀硫酸在紫外光（365nm）下显不同的颜色。4 .氯化铜焰色反应分子结构含有氯元素，在铜网上燃烧发出氯化铜的绿色火焰。、鉴别试验（1）酸水解产物的薄层色谱法苯并二氮杂

13、卓类经酸水解后生成二苯甲酮衍生物，但专属性差，不同的药物可能水解产生相同的二苯甲酮衍生物（三陛仑、阿普哇仑等经水解后不产生二苯甲酮衍生物，可以区别）。特殊杂质检查TLC是本类药物较为常用的检查方法，HPLC法在杂质检查中的应用也逐渐增加。例：氯氮卓（USP24、BP2000采用薄层色谱法）HPLC检查法:色谱条件：色谱柱：C18柱；流动相：甲醇磷酸液（0.05mol/L）（60:40）,40%氢氧化钠调pH6.0;流速1ml/min,检测波长254nm。结果：灵敏度高，可检测未知结构的痕量杂质。特殊杂质检查HPLC法用于地西泮降解产物的检查色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充

14、剂；以甲醇-水（70:30）为流动相；检测波长为254nm。理论板数按地西泮峰计算应不低于1500,地西泮峰和内标物质峰的分离度应符合要求。检查方法：取本品，加甲醇分别制成每1ml中含1mg的供试品溶液和每1ml中含5pg的对照溶液。照含量测定项下的色谱条件进行试验，取对照溶液10口注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为记录仪满量程的10%;再准确量取上述两种溶液各10Nl分别进样，记录色谱图至主成分峰保留时间的4倍，供试品溶液的色谱图中主成分峰之后如显示杂质峰，量取各杂质峰面积的和，不得大于对照溶液主成分峰的峰面积。三、含量测定比色法（1）酸性染料比色法原理：在适当的介质中，碱性药物（B）可与氢离子结合成（BH+）,而一些酸性染料可解离为（In-）,两者定量结合成有色络合物（BH+In-）离子对，可被有机溶剂定量提取，在一定波长处测定其吸收，即可算出碱性药物的含量。（2）钳离子比色法原理：吩嚷嗪类药物的二价硫在pH2±0.1缓冲液中可与钳离子（Pb2+）形成红色络合物，10min呈色完全，可稳定2hour,在500nm波长附近有最大吸收，最适宜范围50pg250卜go（3）紫外分光光度法萃取后分光光度法碱化，有机溶剂萃