12名词解释兽医微生物

1、兽医微生物复习题一、名词解释1 .微生物：微生物是存在于自然界中的一群个体微小、结构简单、肉眼不可见，必须借助显微镜放大数百倍甚至数万倍才能观察清楚的一类微小生物的总称。2 .病原微生物：凡是能够引起动、植物疾病的微生物称为病原微生物，有细菌、病毒(包括霉菌和酵母菌)、放线菌、螺旋体、支原体、立克次体、衣原体、病毒等。3 .病原体：指可造成人或动物感染疾病的微生物(包括细菌、病毒、立克次氏体、寄生虫、真菌)或其他媒介(微生物重组体包括杂交体或突变体)。病原菌(pathogenicbacteria)是指那些导致机体发病的细菌，是一群高度特化了的微生物，为了自身的生存，已适应而且必须在宿主生物体内

2、持续存在或增殖，有时可造成宿主发病。4 .细菌：是一类个体微小、有细胞壁的单细胞原核微生物。它们的个体微小，形态结构简单，细胞壁坚韧，以二分裂方式繁殖。5 .L型细菌：将遗传稳定的细胞壁缺陷的细菌，包括原生质体及原生质球，称为L型细菌。革兰氏阳性菌l型称为原生质体(protoplast),必须生存于高渗环境中。革兰氏阴性菌l型称为原生质球(spheroplast),在低渗环境中仍有一定的抵抗力。6 .菌落：即某个细菌在适合生长的固体培养基表面或内部，在适宜的条件下，经过一定时间的培养，多数为18-24h,分裂繁殖出巨大数量的菌体，形成一个肉眼课件的，有一定数量的独立群体，成为菌落，又称克隆。7

3、 .间体：是胞膜凹入胞质内形成的一种囊状、管状或层状的结构。其功能与真核细胞线粒体相似，与呼吸有关，并有促进细胞分裂的作用。8 .质粒：是指细菌、酵母菌和放线菌等生物游离在核体以外的小型环状双股DN的子。R因子：与抗药性有关；F因子：与有性接合有关；其他质粒：与抗生素，色素合成有关；基因工程中作为目的基因载体。9 .异染颗粒：是某些细菌细胞质中一种特有的酸性小颗粒。它对碱性染料的亲和力特别强。10 .荚膜：某些细菌在其生活过程中可以在细胞壁的外周产生一层包围整个菌体，边界清楚的黏液样物质，称为荚膜。11 .芽抱：某些细菌在其生长发育后期，在细胞内形成一个圆形或椭圆形、厚壁、含水量极低、抗逆性极

4、强的休眠体。未形成芽抱的菌体称为繁殖体或休眠体。12 .鞭毛：生长在某些细菌体表的长丝状蛋白质附属物，称为鞭毛，其数目为一至数条，具有运动功能。13 .细菌生长曲线：将细菌培养于适宜的液体培养基中，定时取样测定其细菌总数和活菌数，以活菌数的对数为纵坐标，以培养时间为横坐标，可描绘出一条细菌生长的典型曲线，该曲线称为细菌生长曲线。细菌的生长曲线分为迟缓期、对数期、稳定期和衰亡期4个时期。细菌的这种生长曲线是在体外人工培养条件下观察到的，对细菌生长规律的研究有重要意义。14 .SPF动物：即无特定病原体动物，是指不存在某些特定的具有病原性或潜在病原性的微生物的动物。15 .无菌法：为防止任何微生物

5、进入人和动物机体以及其他物品而采取方法均叫无菌法，其操作方法叫无菌操作。16 .巴氏消毒法：亦称低温消毒法，冷杀菌法，是一种利用较低的温度杀灭液态食品中的病原菌或特定微生物，而又不致严重损害其营养成分和风味的消毒法。17 .滤过除菌法：是通过机械、物理阻留作用将液体或空气中的细菌等微生物出去的方法，但滤过出尽常不能除去病毒、支原体以及细菌L型等小颗粒。18 .细菌素：是某种细菌产生的一种均有杀菌作用的蛋白质，只能作用于与它不同菌株的细菌以及与它来源关系相近的细菌。例如大肠杆菌所产生的大肠杆菌素，除作用于某些型别的大肠杆菌外，还能作用于亲缘关系相近的沙门菌、巴氏杆菌等，根据其分子量的大小可分为多

6、肽细菌素，蛋白质细菌素和颗粒细菌素三类。19 .毒力：又称致病力，表示病原体致病能力的强弱。对细菌性病原体来说，毒力就是菌体对宿主表的吸附，向体内侵入，在体内定居、生长和繁殖，向周围组织的扩散蔓延，对宿主防御功能的抵抗，以及产生损害宿主的毒素等一系列能力的总和。同一细菌的不同毒株，其毒力不一样。20 .类毒素：利用外毒素对热和某些化学物质敏感的特点，用0.3-0.4%甲醛处理，使其毒性完全丧失，但仍保持抗原性，这种经处理的外毒素为类毒素，常用来预防注射。也可用类毒素注射动物（如马），以制备外毒素的抗体，称为抗毒素，作治疗用。21 .基因转移：供体细菌间接或直接地将部分遗传物质单向传递给受体细菌

7、，从而导致受体细菌发生基因重组的现象，称为基因转移。22 .包含体：是某些病毒感染细胞，在胞浆或或核中产生的特征性的形态变化，通过固定染色后在光镜下可见。大小不一、形态各异，单一或多个，多为圆形、卵圆形或不定形。常用于病毒病的诊断，嗜酸（伊红成粉红）或嗜碱（苏木精成蓝色）。包涵体：病毒感染宿主细胞后，细胞的胞核或胞质内有病毒颗粒或未装配的病毒病毒成分组成的在光学显微镜下可见到的团块，称为包涵体。23 .申珠试验：在含青霉素0.5IU/mL的培养基中，幼龄炭疽杆菌因细胞壁的肽聚糖合成受到抑制，原生质体相互连接成串，称为“申珠反应”。24 .卡介苗：卡氏（Calmette）和介氏（Guerin）二

8、人将牛分支杆菌在培养基上经13年230次传代，使有毒菌株变为毒力减弱的菌株，培育出无毒的结核分支杆菌，对人、牛无致病性，用来制造疫苗，预防人的结核病，此种疫苗称卡介苗（BCG）。它可以使机体产生免25 .病毒：是由蛋白质包裹的只含一种核酸（DNA或RNA必须进入易感宿主细胞内才能经行增殖的感染因子。26 .病毒颗粒（病毒子）：成熟的，结构完整的，具有可感染性的单个病毒，等同于病毒体、病毒粒或病毒子。27 .肮病毒：是动物与人传染性海绵状脑病的病原，没有核酸，是具有传染性的蛋白颗粒。28 .病毒复制：病毒增殖只在活细胞内进行，是以病毒基因为模板，在酶的作用下，分别合成其基因及蛋白质，再组装成完整

9、的病毒颗粒，这种方式称为复制。29 .二倍体细胞株：将长成的原代细胞消化分散成单个细胞，继续培养传代，获得的细胞染色体数与原代细胞一样的二倍体，又称继代细胞。此种细胞数目可扩大，对病毒的易感性则基本无变化。30 .噬菌体：是感染细菌、支原体、螺旋体、放线菌以及蓝细菌等的一类病毒，亦称细菌病毒。二、问答题1、与医学相关的微生物有哪些？与医学相关的微生物有：病毒、细菌、真菌、放线菌、支原体、衣原体、立克次氏体、螺旋体。2、微生物学的先驱有那些？他们的主要成绩是什么？先驱有吕文虎克、巴斯德、科赫十七世纪，荷兰人吕文虎克用自制的、能放大160200倍的显微镜第一次看到了微生物巴斯德是微生物的奠基人。（

10、1）发现并证实发酵是由微生物引起的；（2）彻底否定了自然发生”学说；著名的曲颈瓶试验才可辩驳地证实,空气内确实含有微生物，是它们引起有机质的腐败。（3）免疫学一一预防接种首次制成狂犬疫苗(4)其他贡献巴斯德消毒法：6065C作短时间加热处理，杀死有害微生物微生物的另一位奠基人是一位德国医生柯赫(1)微生物学基本操作技术方面的贡献细菌纯培养方法的建立设计了各种培养基，实现了在实验室内对各种微生物的培养(2)对病原细菌的研究作出了突出的贡献：具体证实了炭疽杆菌是炭疽病的病原菌；发现了肺结核病的病原菌(1905年获诺贝尔奖)证明某种微生物是否为某种疾病病原体的基本原则一一著名的柯赫原则Lister建

11、立消毒技术3、微生物学有哪些特性？体积小面积大吸收多转化快生长旺繁殖快适应强易变异分布广种类多4、细菌的基本结构和特殊结构有哪些？细菌都具有细胞壁、细胞膜、细胞质、核体等基本结构。有些细菌在一定条件下还具有特殊结构细菌的特殊结构包括荚膜、S层、鞭毛、菌毛、芽胞等。5、细菌形态、结构特征在细菌鉴定中有何作用？各种细菌菌落在大小，色泽、表面性状均有各自的特征，菌落的特征与细菌个体的形态，结构的特征密切，通过观察细菌菌落特征，可以推测该细菌的种类，通常用固体培养基分离培养菌落，进行细菌的鉴定。6、绘出细菌的基本结构和特殊结构图。7、细菌群体生长繁殖分几个时期？各个时期有何特点？细菌群体的生长繁殖有4

12、个时期：迟缓期、对数期、稳定期、衰亡期。迟缓期：是细菌初到新环境的适应期。此时菌体增大、代谢活跃、合成所需酶系统。RNA含量明显增多，DNA5变化，此时细菌数并不增加。l-4h。对数期：细菌迅速分裂繁殖，活菌数以恒定的几何级数增长，生长曲线近斜线。该期病原菌致病力最强，其形态染色及生理均较典型，对抗菌药物等的作用较为敏感。6-10ho稳定期：因营养消耗、代谢产物蓄积等，此时新繁殖的活菌与死菌平衡，活菌数最多。该期形态染色不特异。产生毒素等代谢产物。一般持续时间8h。衰亡期：细菌死亡速度加大，繁殖速度变小。如不移植到新培养基，最终可全部死亡。此期菌体变形或自溶，染色不典型，难以鉴定。注：此过程只

13、在体外人工条件下可观察到。8 .细菌生长繁殖需要哪些条件？答：人工培养细菌，除需要提供充足的营养物质外，商需有合适的酸碱度，适宜的温度及必要的气体环境，(1)营养物质包括碳源，氮源，无机盐，生长因子，水(2)不同细菌对温度有不同的适应范围，各种细菌又有各自的可生长温度范围及最适温度(3)PH影响微生物的生长，每种细菌均有一个可适应的PH范围及最适生长PH(4)根据细菌对氧的要求，可将其分为需氧菌，厌氧菌及兼行厌氧菌9 .试述湿热灭菌的原理和种类答：原理：高温对微生物具有明显的致死作用，但不同微生物对热的敏感性有明显差异，细菌的繁殖体最为敏感，其次是真菌和病毒，细菌芽抱对热有很强的抵抗力。用高温

14、处理微生物时，可对菌体蛋白质、核酸酶系统等产生直接破坏作用，热力可使蛋白质中的氢键破坏，使之变性或凝固，使双股DN的开为单股，受热而活化的核酸酶使单股DNA断裂，导致菌体死亡。种类：煮沸法巴氏消毒法(主要用于牛乳等消毒)流通蒸汽消毒法(常压蒸汽消毒法)流通蒸汽灭菌法(间歇消毒法)(5)高压蒸汽灭菌法10 .简述基因水平的柯赫法则答：(1)应在治病菌株中检出某些基因或其产物，而无毒力菌株中没有(2)如有毒力菌株的某个基因被破坏，则菌株的毒力应减弱或消除。或者将此基因克隆到无毒菌株内，后者成为有毒力菌株。(3)将细菌接种动物时，这个基因应在感染的过程中表达(4)在接种动物检测到这个基因产物的抗体，

15、或产生免疫保护该法也适用于细菌以外的微生物，如病毒。11.试述内毒素与外毒素的区别项目外毒素内毒素产生菌革兰氏阳性菌为主革兰氏阴性菌化学成分蛋白质脂多糖(LPS致热性通常不耐热极为耐热制病特异性不1司外国素各不相同不1司病原菌内耳素作用基本相同恚性强，往往致死弱，很少死亡抗原性完全抗原，抗原性强不完全抗原抗原性弱制成类毒素能，用甲醛处理不能热稳定比pi耐热性强12.试述细菌毒力减弱的方法答：(1)长期在体外人工培养基上继代培养(2)在高温最适生长温度条件下培养(3)在含有特殊化学物质的培养基中培养(4)在特殊气体条件下培养(5)通过不易感动物(6)通过基因工程方法13.常见的细菌变异现象有哪些

16、？答：(1)形态和结构变异：细菌外形(杆状一圆球形，有鞭毛一无鞭毛)(2)菌落形态变异：a.S-R变异正常的光滑型菌落可能变成粗糙型称为S-R变异，它往往伴随着其他重要特性的改变，包括毒力的丧失和抗原结构的改变b.粗糙型转变为光滑性称为FHS回归变异(3)毒力变异：病原菌的毒力可以由强变弱或由弱变强，在自然情况下和人工诱变都可以发生(4)耐药性变异：临床上选用敏感药物，合理使用抗生素(5)代谢变异：细菌在代谢过程中原来能合成某种营养成分的特性，会变异失去这种能力，成为所谓营养缺陷型，有利于人为提供该种营养成分(6)抗原性变异：在环境条件的影响下，一些细菌失去某种抗原或增添某种抗原14 .何为基

17、因重组？细菌基因转移和重组有几种方式？答：基因重组是由于不同DNA!的断裂和连接而产生DNAt段的交换和重新组合，形成新的DN6子的过程。主要方式：转化，转导，接合，原生质体融合和转染15 .试述人工培养细菌的用途及其意义？答：用人工的方法提供细菌在动物体内生长繁殖需要的基本条件，达到培养细菌，进行鉴定及进一步利用的目的。因此，细菌的人工培养技术是微生物学研究和实践的十分重要的手段。表现在医学中的应用，在工农业产生中的应用，在基因工程中的应用。16 .试述正常菌群对机体的作用？、答：(1)营养：消化道正常菌群不仅从宿主消化道获取营养，而且通过帮助消化、合成维生素等对宿主起营养作用.(2) 免疫

18、：正常菌群对其宿主的体液免疫、细胞免疫和局部免疫均有一定影响，尤其是对局部免疫的影响更大.(3)生物拮抗：正常菌群对其包括致病菌在内的外籍菌入侵动物有一定程度的拮抗.17 .细菌性病料如何进行微生物学诊断？答:(1)形态观察：涂片、染色，将病料涂片(触片)染色，镜检(2)分离培养鉴定：适宜培养基培养与分离，观察菌落形态。进一步鉴定，还要做生化鉴定、血清学鉴定(血清学鉴定包括凝集反应、琼扩反应、标记抗体等)(3)动物实验：选择敏感动物接种18 .金黄色葡萄球菌的致病因素及所致疾病.答:毒力因子：毒素(a毒素、肠毒素)酶(凝固酶、耐热核酸酶)(1) a毒素：对多种哺乳动物红细胞有溶血作用，其原理是

19、毒素分子插入红细胞膜疏水区，形成微孔，红细胞溶解。引起小血管收缩，导致局部缺血、坏死。(2)肠毒素：外毒素，耐热100c30min,抵抗消化道蛋白酶的水解作用，引起人类中毒，大多数动物对此毒素又很强的抵抗力，血清型A.B.C1.C2.C3.D.E.G.H均可引起急性胃肠炎即食物中毒。(3)凝固酶：凝固酶是鉴别葡萄球菌有无致病性的重要指标。作用：能使含有抗凝剂的人兔血浆发生凝集特点：耐热；已被蛋白酶分解破坏分类：1.游离凝固酶一类似凝血酶原样物质，经激活后可使血浆中纤维蛋白原变成纤维蛋白。保护病菌免受血清中杀菌物质的破坏，痛是可使葡萄球菌感染易于局限化。2.结合凝固酶一结合在菌体表面，与血浆中纤

20、维蛋白结合后是血浆凝固在菌体表面，阻止吞噬细胞的吞噬，即使被吞噬也不易被杀灭(4)耐热核酸酶：1.此酶能迅速分解核酸，利于病原菌扩散2.目前也将该酶的检测作为鉴定致病菌株的重要指标之一。19 .试述肠杆菌科细菌的特性？答：肠杆菌科细菌的共同特性：(1)形态与结构：中等大小的两端钝圆的革兰氏阴性杆菌，多数有鞭毛、菌毛，少数有荚膜，无芽抱(2)培养特性：本菌为兼性厌氧菌，在普通培养基上生长良好，最适生长温度为37。C,最适生长PH为7.2-7.4,麦康凯上形成形成红色菌落；在伊红美蓝上呈黑色带金属闪光的菌落；在SS琼脂上一般不生长或生长较差，生长者呈红色。一些致病菌在绵阳血平板上呈B溶血20 .猪

21、丹毒杆菌的微生物学诊断要点有那些？1显微镜检查：可采取高热期病猪耳静脉血作涂片，染色、镜检。死后可采取心血及新鲜肝、脾、肾、淋巴结等制成涂片，可革兰氏染色镜检，革兰氏阳性，蓝色。如发现少量典型杆菌，可初步确诊。如为慢性心内膜炎病例，可用心脏瓣膜增生物涂片，镜检。羔羊患关节炎病时，可检查关节滑膜囊液。2.分离培养分离培养时可用含有0.2%(W/V)的葡萄糖或5%-10%6菌马血清(W/V)的半固体琼脂培养基。在血琼脂平皿经37C,24h培养可形成透明、灰白色、露珠样小菌落，并形成a溶血环。在麦糠凯上不生长，明胶穿刺生长特殊，沿着穿刺线向四周生长，如试管刷状，不液化明胶。3细菌鉴定：主要考虑与李氏

22、杆菌鉴别诊断。4.血清型鉴定：将待鉴定菌株的纯培养物加入1%ff醛灭活，经洗涤、高压、离心处理后制成沉淀原，与模式菌株的高免血清做琼脂扩散试验。21、试述炭疽芽抱杆菌的生物学特性。形态及染色特性本菌为G吠型杆菌；无鞭毛不能运动，芽胞椭圆形。 动物组织内，此菌单在或连成25个的短链，相连的菌端平截而呈竹节状。炭疽杆菌在组织内可形成荚膜。 炭疽杆菌只有当暴露空气中的O后，方能形成芽胞。在人工培养基中，本菌常形成长链。培养特性：需氧，对营养要求不高，普通培养中即能生长良好。在固体培养基表面：强毒菌株的菌落表现为粗糙型，菌落大而扁平，灰白色，不透明，表面较干而粗糙，边缘呈卷发状。在血琼脂上一般不溶血

23、在普通肉汤中培养24h后，培养液仍然透明，管底有白色絮状沉淀。液面无菌膜或菌环形成。生化特性：发酵葡萄糖，产酸而不产气，不发酵阿拉伯糖、甘露糖、木糖、VP试验阳性、不产生叫|珠和硫化氢。抵抗力：炭疽杆菌繁殖体的抵抗力不大，60c经3060分钟，一般浓度的常用消毒剂，能于短时内将其杀死。在未解剖的尸体中，细菌可随腐败而迅速死亡。芽胞的抵抗力特别强大，在干燥状态下可长期存活。炭疽芽胞需经煮沸12h,121c高压灭菌510min,或160C干热灭菌2h方被杀死。常用的有效消毒剂是新配的20%石灰乳或20%漂白粉作用48h0抗原结构：炭疽杆菌有下列四种主要抗原成分。菌体多糖抗原：这是细胞壁内存在的一种

24、半抗原，与细菌毒力无关，性质稳定，经高温高压后，抗原性不被破坏，用于此菌鉴定和诊断。荚膜多肽抗原：仅见于有毒菌株，与毒力有关。保护性蛋白质抗原：这是炭疽杆菌生活过程中产生的细胞外蛋白质之一，具有免疫原性，能使机体产生抗炭疽感染的保护力。芽抱抗原：是芽抱的外膜层含有的抗原决定簇，构成特异性抗原，具有免疫原性和血清学诊断价值致病性：炭疽杆菌可引起各种家畜、野兽和人类的炭疽，牛、绵羊、鹿等易感性最强，引起败血症。犬猫食肉动物等有相当大的抵抗力，禽类一般不感染。毒力主要与荚膜和毒素有关。毒素由水月中因子、致死因子、以及保护性抗原3种亚单位构成。22、病毒的基本特征有哪些？病毒的基本特征：病毒一般以病毒

25、颗粒(viralparticle)或病毒子(virion)的形式存在，具有一定的形态、结构以及传染性。病毒粒子极其微小，测定其大小的单位通常用纳米(nm),在电镜下才能观察。病毒的形态：多形性。各种病毒颗粒形态不一，但都具有蛋白质的衣壳及其包裹的核酸芯髓，衣壳与芯髓共同构成核衣壳。有的病毒核衣壳外还有囊膜及纤突。衣壳由壳粒组成，呈20面体对称或螺旋状对称，少数为复合对称。结构：完整的病毒主要由核酸和蛋白质组成。每种病毒只含一种核酸，或是DNA,或是RNA;每种核酸有双股与单股、线状与环状、分节段与不分节段之分。病毒的蛋白质也有结构蛋白和非结构蛋白之分。脂质与糖是构成是囊膜与纤突的组分，可被氯仿

26、或乙醴等脂溶剂破坏。寄生生活没有核糖体和酶系统，不能独立进行代谢活动，必须在易感活细胞内寄生,利用宿主细胞的代谢系统，以核酸复制的方式增殖，有严格的细胞内寄生性。不能进行二分裂，通过特有的复制方法进行繁殖。病毒对抗生素不敏感、干扰素能抑制其增殖病毒无细胞结构23、试述病毒与其他微生物的主要区别。种类/性状结构病毒非细菌单支原体单立克次体单衣原体单螺旋体|起线菌_于细困与原虫之介于细国与真苗之间真国学、多核酸DNA/KNADAN、RNA5AN.就上DAN、RNADAN、RNADAN.RNADAN、RNADAN.RNA繁殖方式复制二分裂分裂件;二分裂二分裂二分裂二分裂上芽产或寸洁细庖培养+-对抗生

27、素的敬度+才牛扰第的敢度+一24、画出病毒颗粒的基本结构模式图25、试述病毒分离培养的方法。实验动物：病毒必须在活细胞中方能进行生命活动，因此早期对病毒生物学特性的研究主要通过动物接种（小鼠、大鼠、家兔、家禽等。）以培养病毒。目前动物接种仅限于研究病毒或毒株的致病性或为确切诊断某种病毒为病原体。鸡胚接种个别病毒（如流感病毒）必须在鸡胚中进行分离培养。受精鸡胚的羊膜腔和尿囊腔均可用以分离流感病毒。组织细胞：静置、旋转其中细胞培养是培养病毒最常见的技术。26、何为病毒的一步生长曲线？一步生长曲线即以感染时间为横坐标，病毒效价为纵坐标，绘制出的病毒特征曲线。感染比（MOD是指在一个系统中感染病毒的细

28、胞数与细胞总数之比。在人工培养的细胞中，接种高MOI的病毒，所有细胞几乎同时受到病毒感染，如分析该培养系统的单个细胞，就可以代表病毒在病毒在整个体系中所有细胞的生长情况。应用这一方法，就可获得病毒一步生长曲线的结果，观察到病毒具有复制周期。一个完整的复制周期包括吸附、传入与脱壳、生物合成、组装与释放等步骤。27、病毒的复制周期包括哪些步骤？吸附：吸附敏感的宿主细胞是病毒复制的第一步。此过程包含静电吸附和特异性受体吸附两个阶段。病毒的配体位点与细胞表面的特异受体的结合穿入与脱壳：动物病毒穿入宿主细胞并脱壳的过程可分为：在胞浆膜穿入并脱壳、在内吞小体脱壳、在核膜脱壳生物合成：病毒的生物合成发生在隐

29、蔽期，非常活跃，包括mRN的转录、蛋白质或RNA勺合成等组装与释放：无囊膜病毒：简单的20面体病毒产生的壳粒可自我组装形成衣壳，进而包装核酸形成核衣壳。大多数无囊膜的病毒蓄积在胞浆或核内，当细胞完全裂解时，释放出病毒颗粒。有囊膜病毒：有囊摸的病毒以出芽的方式成熟，有细胞膜出芽及胞吐两种形式。28、试述细胞培养的特点。细胞培养中的每个细胞的生理特性基本一致，对病毒的易感性也相等。一块很小的组织可以制备过个细胞培养瓶，每瓶代表一个实验动物或鸡胚，而且有标准的一致性，无实验动物的个体差异性，从而对病毒的生长具有高度的准确性和可重复性。细胞培养本身就能显示病毒的生长特性（如细胞产生病变）因此在很多情况

30、下不需要用其他系统来证明病毒的确实生长。 细胞培养可以排除特异性抗体或者非特异性抑制因子的干扰。 细胞培养技术可以严格执行无菌操作。 在细胞培养中可以进行许多实验项目。 应用细胞培养的空斑技术可以进行病毒的克隆化。原代细胞动物组织经胰蛋白酶等消化、分散，获得单个细胞，再生长于细胞培养皿中，原代细胞一般对病毒较易感，尤其是来源于胚胎或幼畜组织的细胞。最好用SPF动物的组织，以免携带潜伏的病毒，否则会影响所需病毒的生长。二倍体细胞株：将长成的原代细胞消化分散成单个细胞，继续培养传代。传代细胞系：这类细胞在体外可无限分裂，即可无限制传代。有的来源于月中瘤组织或转化的细胞.缺点：实验室传代日久，可污染

31、支原体或隐性感染的病毒。由于担心致月中瘤的潜在危险，传代细胞系一般不能用于制备疫苗。29、病毒的分离与鉴定包括哪些内容？一、病毒的分离培养（一）标本的采集、运送及处理1、标本的采集（1）采样的时间（发病的初期）（2）采集标本的容器（无菌）（3）标本的选择（感染的部位）2、标本的运送和处理尽早送到实验室，并立即处理和接种。较长时间冻存的标本，置于-70Co研磨法处理细胞以释放病毒3、检样接种与感染表现将处理好的标本以适当途径接种与宿主、鸡胚或培养细胞。观察噬菌斑（Plaque）或细胞病变效应（CPE）经第一次接种未出现病变时，需进行重复接种，即盲传，若盲传多代仍无表现，可判定为阴性。（二）培养方

32、法1、组织培养：将人或动物离体或组织或分散的活细胞，模拟体内的生理条件在试管或培养瓶加以培养，使之生存和生长，成为组织培养。（目前多指单层细胞培养）传代细胞系：这是能在体外无限期传代的细胞系，来源与月中瘤细胞或细胞株传代过程中变异的细胞系。2、鸡胚接种：鸡胚对多种病毒敏感。一般采用孵化914天的鸡胚，根据病毒种类不同，将病毒标本接种于鸡胚的不同部位，最常用的鸡胚接种部位有：羊腹腔、尿囊腔、绒毛尿囊膜和卵黄囊等。二、病毒的感染性测定1、噬斑计数（用于噬菌体的感染性测定）2、蚀斑测定3、终点法（TCID50）三、病毒的纯化与鉴定（一）形态学鉴定：电镜观察（二）纯化：超速离心、电泳、免疫学方法对细菌

33、进行纯化（三）理化特性测定：如病毒的囊膜可用氯仿、乙醴等有机溶剂溶解使病毒失去活性（四）免疫学诊断（病毒的血清学鉴定）1、补体结合试验2、中和试验3、血凝抑制试验4、间接免疫荧光检测5、酶联免疫吸附试验（五）、分子生物学方法（病毒的分子生物学鉴定）：聚合酶链式反应、核酸杂交、DNA芯片30、举例说明痘病毒感染的宿主谱类型。天花病毒，主要宿主：人，宿主范围窄，全球已消灭；痘苗病毒，主要宿主：人、牛、水牛、猪、兔，宿主范围宽，全世界均有分布。牛痘病毒，主要宿主：牛、人、大鼠、猫、沙鼠、大型猫科动物、象、犀牛宿主范围宽。分布于欧洲、亚洲。山羊痘病毒，主要宿主：绵羊、山羊。宿主范围窄。分布于亚非洲。3

34、1、试述新城疫病毒的检测手段和预防措施。诊断：必须作病毒分离及血清学试验或RT-PCR可取脾、脑或肺匀浆，接种10日龄鸡胚尿囊腔分离病毒。病毒能凝集鸡、人及小鼠等红细胞，再作血吸附及HI试验鉴别。当存在循环抗体时，可以从肠道分离病毒。气管切片或抹片做免疫荧光染色诊断快速，但不太敏感。抗体检测只适用于对未进行免疫接种鸡群的诊断，可用HI试验。在慢性新城疫流行的地区，可用HI实验作为监测手段。分离株有必要进一步测定其毒力，如ICPI>0.7,必须向OIE申报疫情。预防与控制：新城疫是OIE规定的A类疫病，许多国家都有相应的立法。控制措施包包括良好卫生及免疫。免疫通常采用由天然弱毒活毒苗及强毒

35、株的油乳剂灭活苗。弱毒只可采用饮水、气雾、滴眼或滴鼻途径。小鸡7-10d一免、20-25d二免、50-60d三免，免疫后约3-7d可产生免疫保护，产蛋母鸡应每4个月免一次，实际生产中，弱毒苗雨灭活苗配合使用，方能收到较好的免疫效果。由于鸡在免疫接种后15d人能排除疫苗毒，因此有些国家规定在免疫接种后21d后才可调运。32、试述狂犬病毒的致病机理及综合性的预防措施。致病机理：传播：主要传播途径为被带毒动物咬伤，是否发病取决于咬伤的部位与程度以及带毒动物的种类，病犬唾液具有高度传染性。病毒复制：病毒特异结合神经肌肉结合处的乙酰胆碱受体及神经节甘脂等受体。在伤口附近的肌细胞内复制，而后侵入外周神经系

36、统，沿神经轴索上行至中枢神经系统，在脑的边缘系统大量复制，导致脑组织损伤，行为失控出现症状。病毒从脑沿传出神经扩散至唾液腺等器官，在其内复制，并以很高的滴度分泌到唾液中。在出现狂暴症状乱咬时，唾液具有高度感染性。免疫原性：病毒蛋白有很强的免疫原性。但在病毒从咬伤部位向中枢系统扩散的过程中，既不出现体液免疫应答，也不出现细胞免疫应答。综合性预防措施：采取“管、免、灭”的方针管理家犬-登记对家养犬、猫进行弱毒疫苗免疫接种。注意监测带毒的野生动物。发达国家投放含弱毒疫苗的食饵控制狐狸和狼的狂犬病，对臭鼬和浣熊，则计划使用金丝雀痘病毒为载体表达狂犬病毒糖蛋白的基因工程重组疫苗。应及时扑灭狂犬病患畜。3

37、3、试述流感病毒的主要生物学特性。主要特性：病毒颗粒多形性，多球形，直径80-120nm,有囊膜及纤突，甲、乙型病毒纤突上有两种糖蛋白（棒状的凝血素蛋白H、蘑菇状的神经氨酸酶蛋白N）。基因组为8节段线状负股单股RNA病毒颗粒多形性，多球形，直径80-120nm核酸类型为单股负股RNA分八个节段（丙型为七个节段），每一段RNA*一个基因，复制时发生节段之间的基因重组而导致变异，出现新的亚型。病毒结构由内向外分三层，内层是核心，中层为内膜蛋白，外层为脂质双层包膜，其间插有血凝素和神经氨酸酶两种刺突。抵抗力较弱，对干燥、紫外线、酸及一般化学消毒剂敏感，高温易失活，但低温下可生存数周。病毒分离采取鸡胚

38、羊腹腔或尿囊腔接种；通过血凝试验和血凝抑制试验鉴定病毒是否生长及型别。如禽流感病毒（AIV）:禽流感的高致病力毒株对鸡有致病性，旧称“真性鸡瘟”，现名高致病性禽流感（HPAD,是OIE规定的通报疫病。高致病力毒株主要有H5N1和H7N71型的某些毒株。禽流感病毒能感染人，某些毒株甚至可不经过猪体混合再传染的过程，直接感染人。未裂解的H无传染性，只有在靶器官呼吸道及肠道组织的相应的蛋白酶作用下，日裂解为H1和H2,暴露融合肽段，通过融合进入宿主细胞。高致病力毒株与低致病力毒株的H裂解位点的氨基酸序列有差异。传播：大量病毒可通过粪排出，在环境中长期存活，尤其是在低温的水中。病毒通过野禽传播，特别是

39、野鸭，即使在迁徙及越冬时也是如此。鸟也可带毒造成鸡群禽流感的流行。34、如何检测及控制流感病毒？诊断：分离病毒非常必要，对鉴定病原及其毒力均不可少。病料：一般从泄殖腔内采样，也可才肝、脾、血液、肺等。分离：接种8-10日龄鸡胚尿囊腔。鉴定：取尿囊液用鸡红细胞作HA-HI或ELISA等。进一步鉴定亚型需送国家级指定实验室完成。毒力分析：可将分离株接种鸡，或用分离毒作空斑试验，检测其毒力，有毒株能产生空斑，无毒株则否。预防与控制：预防措施应包括在国际、国内及局部养禽场3个不同水平。高致病力禽流感被OIE列为A类疫病，一旦发生应立即通报。国内措施主要为防止病毒传人及蔓延。养禽场还应侧重防止由野禽传给

40、家禽，要有隔离设施阻挡野禽。一旦发生高致病力禽流感，应采取断然措施防止扩散。灭活疫苗可作预防用。35、口蹄疫病毒有哪些血清型？解释其易发生抗原性漂移的原因。口蹄疫病毒有7个血清型，分别命名为QA、C、SATl、SAT2SAT3及亚洲1型，每个型又可划分亚型。由于不断发生抗原漂移，因此并不能严格区分亚型。抗原性漂移是由编码vp1和/或vp2和/或vp3蛋白的基因发生点突变引起的，是在免疫群体中筛选变异体的反应，它可引起致病性更强病毒的出现36、阐述口蹄疫病毒的流行、致病特点及对策。口蹄疫是全球性最重要的动物疫病，常在牛群、猪群大范围流行。多种偶蹄动物都易感。感染率很高，致死率较低。人类偶能感染，

41、表现发热、食欲差及口、手、脚产生水泡。致病机理症状：病畜口、鼻、蹄等部位出现水泡为主要症状，且可能跛行。怀孕母牛可能流产，而后导致繁殖力降低。猪则以跛蹄为最主要的症状。羊症状通常比牛温和。感染：反刍类动物感染的主要途径是呼吸道，也可通过采食或接触污染物感染。经呼吸道感染时，最初在咽复制，而后传播到其他组织。病毒排出：患畜通过分泌物、奶、飞沫大量排出病毒。某些康复动物的咽部长时间存在。牛在感染后可长达两年，绵羊可达6个月。传播：病毒可长距离经气雾传播，吹风（低温、高湿、阴暗）有利于其传播。免疫：康复牛对同型病毒感染的免疫力可维持1年或稍长。诊断中报：被列为必须申报的疾病，诊断只能在指定的实验室进

42、行。送检：样品包括水泡液、剥落水泡痂、抗凝血或血清等。死亡动物则可采淋巴结、扁桃体。样品应冰冻保存，或置于pH7.6的甘油缓冲液中。检测方法：OIE推荐使用商品化及标准化的ELISA试剂盒用于诊断，数小时出结果。也用细胞培养分离病毒，分离的病毒通过LLISA或者中和试验加以鉴定。预防与控制控制：由于病毒高度的传染力，控制措施必须非常周全和严格。无病地区严禁从疫区调运牲畜。消灭：一旦发病，应立即封锁现场，焚毁或深埋病畜。疫区周边的畜群应接种疫苗，建立免疫防护带。疫苗：弱毒疫苗可能散毒，不安全。推荐使用浓缩的灭活疫苗37、比较猪水疱病毒与口蹄疫病毒的异同。不同：猪水疱病在家畜中仅猪感染发病，不感染

43、牛和羊。如果周围牛、羊有发病者，即可诊断为口蹄疫；口蹄疫导致的幼畜死亡，剖检时有虎斑心”样变化，猪水疱病则无；患畜，尤其是仔畜的死亡率不一样。感染途径不一样：口蹄疫：反刍类动物感染的主要途径是呼吸道，也可通过采食或接触污染物感染。经呼吸道感染时，最初在咽复制，而后传播到其他组织。猪水疱病毒：通过皮肤的伤口感染，也可经过消化道感染，但需要较高滴度的病毒。相同：都是OIE规定的通报疾病；猪水疱病毒感染的症状与口蹄疫相似，发热，蹄冠部发生水疱。均可以用ELISA和采用RT-PCR佥测。38、试述猪瘟病毒的传播特点及检测手段。猪瘟病毒(CSFV)是世界范围内最重要的猪病病毒。亚洲、非洲、中南定洲仍然不断发生猪瘟。美、力口、澳及欧洲若干国家已消灭本病。 .症状：典型的猪瘟为急性感染，伴有高热、厌食、萎顿及结膜炎。潜伏期2-4d病猪白佃胞严重减少。仔猪可无症状而死亡，成年猪往往因细菌继发感染在1周内死亡。死亡率可高达100%。亚急性型及慢性型的潜伏期及病程均延长，其病毒毒力减弱。此种毒株感染怀孕母者导致死胎、流产、木乃伊胎或死产，所产仔猪不死