实验一 鸡胚接种

1、（一）优点（一）优点1、组织分化程度低、组织分化程度低2、可选择不同的日龄和接种途径、可选择不同的日龄和接种途径3、病毒易于增殖、病毒易于增殖4、感染病毒的组织和液体中含大量病毒、感染病毒的组织和液体中含大量病毒5、容易采集和处理、容易采集和处理6、来源充足、来源充足7、设备和操作简便易行、设备和操作简便易行（二）缺点（二）缺点1、胚内可能污染细菌和病毒、胚内可能污染细菌和病毒 沙门氏菌、禽白血病病毒、新城疫、沙门氏菌、禽白血病病毒、新城疫、禽脑脊髓炎病毒禽脑脊髓炎病毒2、母源抗体、母源抗体3、许多病毒在鸡胚中增殖缺乏特异性的、许多病毒在鸡胚中增殖缺乏特异性的感染指针感染指针 1、绒毛尿囊膜接

2、种、绒毛尿囊膜接种 2、尿囊腔接种、尿囊腔接种3、卵黄囊接种、卵黄囊接种4、静脉接种、静脉接种 蓝舌病毒蓝舌病毒5、羊膜腔接种、羊膜腔接种 正粘病毒和副粘病毒正粘病毒和副粘病毒6、脑内接种、脑内接种 狂犬病毒狂犬病毒7、眼球接种、眼球接种1 1、用检卵灯检查鸡胚活力。、用检卵灯检查鸡胚活力。2 2、用铅笔画出气室和胚胎的位置，并在、用铅笔画出气室和胚胎的位置，并在将要接种的部位做好记号。将要接种的部位做好记号。3 3、对鸡胚进行消毒。、对鸡胚进行消毒。 主要用于虫媒披膜病毒以及主要用于虫媒披膜病毒以及鹦鹉热衣原体和立克次氏体等鹦鹉热衣原体和立克次氏体等的分离和增殖。的分离和增殖。方法一：方法一

3、：1 1）取）取6-86-8日龄鸡胚，用检卵灯日龄鸡胚，用检卵灯照视画出气室和胚胎位置后，照视画出气室和胚胎位置后，垂直放置在卵座上垂直放置在卵座上( (大头向上大头向上) )2 2）用碘酊和酒精消毒气室端）用碘酊和酒精消毒气室端3 3）用钢锥在气室中央锥一小孔）用钢锥在气室中央锥一小孔 4 4）用注射器吸取病毒悬液，沿）用注射器吸取病毒悬液，沿气室端所穿小孔垂直刺入气室端所穿小孔垂直刺入3cm3cm，注入注入0.1-0.5ml0.1-0.5ml病毒液。病毒液。5 5）用熔化的石蜡封孔，置孵卵）用熔化的石蜡封孔，置孵卵箱内继续孵育，每天翻卵箱内继续孵育，每天翻卵1-21-2次，次，24h24h

4、内死亡者废弃。内死亡者废弃。方法二：方法二：1 1）2 2）同一）同一3 3）将卵横放在卵座上，胚）将卵横放在卵座上，胚胎位置向下。在卵长径的胎位置向下。在卵长径的1/21/2处用碘酊和酒精消毒。处用碘酊和酒精消毒。4 4）用钢锥打一小孔，将针）用钢锥打一小孔，将针头刺入约头刺入约1.5cm1.5cm，注入病毒，注入病毒液液0.1-0.5ml0.1-0.5ml。5 5）用熔化的石蜡封孔，置）用熔化的石蜡封孔，置孵卵箱内继续孵育，孵卵箱内继续孵育，24h24h内内死亡者废弃。死亡者废弃。主要用于痘主要用于痘V V和疱疹和疱疹V V的分的分离和增殖。离和增殖。方法一：方法一：1 1）取）取10-1

5、210-12日龄鸡胚，日龄鸡胚，画出气室部，消毒画出气室部，消毒2 2）在气室端的卵壳上开）在气室端的卵壳上开一一1.51.51.5cm1.5cm的口的口3 3）用灭菌眼科镊子撕去）用灭菌眼科镊子撕去一小片内壳膜。一小片内壳膜。4 4）滴入接种物。）滴入接种物。5 5）用胶布或透明胶纸封）用胶布或透明胶纸封闭切口。闭切口。1、鸡胚停止生长。、鸡胚停止生长。2、全身出血（头颈部，背部等）。、全身出血（头颈部，背部等）。3、尿囊液增量。、尿囊液增量。4、病毒经尿囊腔接种后、病毒经尿囊腔接种后36h，最高滴度可，最高滴度可达达107个鸡胚致死量。个鸡胚致死量。5、鸡胚死亡（病毒接种量大）。、鸡胚死亡（病毒接种量大）。 收毒前将鸡胚直立放置于收毒前将鸡胚直立放置于4冰箱半小冰箱半小时以上，冻死胚胎，防止出血。时以上，冻死胚胎，防止出血。 根据接种途径的不同，收获相应的材根据接种途径的不同，收获相应的材料料1、绒毛尿囊膜接种、绒毛尿囊膜接种 收获接种部位绒毛尿收获接种部位绒毛尿囊膜囊膜2、尿囊腔接种、尿囊腔接种 收获尿囊液（收获尿囊液（58ml）3、卵黄囊接种、