动物细胞培养的准备

1、会计学1动物细胞培养的准备动物细胞培养的准备重铬酸钾（克）浓硫酸（毫升）蒸馏水（毫升）弱液1001001000次强液1202001000强液631000200组成强度用于滤过除菌的各式滤器用于滤过除菌的各式滤器滤过除菌法：培养基、血清、消化酶、抗生滤过除菌法：培养基、血清、消化酶、抗生素等。素等。高压蒸汽灭菌器高压蒸汽灭菌器联用联用细胞培养用容器及培养基细胞培养用容器及培养基Culture vessels and mediumfor animal cell culture多种多种PRPR（白蛋白、球蛋白、铁蛋白等（白蛋白、球蛋白、铁蛋白等）多种金属离子多种金属离子激素；激素；促贴附物质，如纤粘

2、蛋白、冷析球蛋促贴附物质，如纤粘蛋白、冷析球蛋白、胶原等。白、胶原等。各种生长因子各种生长因子转移蛋白转移蛋白不明成分不明成分血浆：血浆：1907年年Harrison首次使用首次使用优点：支持培养组织块，供给细胞优点：支持培养组织块，供给细胞生长物质。生长物质。 缺点：易于液化。缺点：易于液化。2、血浆、血浆干粉培养基干粉培养基商品培养液商品培养液青霉素青霉素 50100IU/ml培养液培养液链霉素链霉素 50100ug/ml培养液培养液100IU/ml（三）无血清培养基（三）无血清培养基v 19751975年，年，SatoSato首次成功地用无血清培首次成功地用无血清培养基培养了垂体细胞株，

3、近养基培养了垂体细胞株，近2020多年来已报多年来已报道了几十种细胞系在无血清培养基中成功道了几十种细胞系在无血清培养基中成功地生长和增殖。地生长和增殖。v 无血清细胞培养基的使用保证了实验无血清细胞培养基的使用保证了实验结果的准确性、可重复性和稳定性，减少结果的准确性、可重复性和稳定性，减少了细胞污染，简化了提纯和鉴定各种细胞了细胞污染，简化了提纯和鉴定各种细胞产物的程序。产物的程序。v 向无清培养液中能促进细胞系生长向无清培养液中能促进细胞系生长的补加物都是独特的。适用于某种细胞株的补加物都是独特的。适用于某种细胞株的培养液，很可能不适合另一种细胞株的的培养液，很可能不适合另一种细胞株的生

4、长。即使生长。即使同源组织的不同细胞株，所需同源组织的不同细胞株，所需补加物补加物也不同。也不同。v 商品化的无血清培养液供应。如：商品化的无血清培养液供应。如： Sigma公司的公司的MCDB131可用于培养内皮可用于培养内皮细胞细胞Biofluids公司的公司的LHC-9用于气管上用于气管上皮细胞皮细胞提高制品安全性和提高制品安全性和/或产量或产量. . 无血清培养基无血清培养基 替代血清的补充成分替代血清的补充成分 优点优点：增加确定性；：增加确定性； 性能更一致；性能更一致； 容易进行纯化和下游加工；容易进行纯化和下游加工； 缺点缺点：无血清培养基尚处于研究阶：无血清培养基尚处于研究阶段难以推广。段难以推广。 基础培养基基础培养基物理性质物理性质 1、pH值：值：正常成纤维细胞：正常成纤维细胞：pH7.47.7；转化细胞：；转化细胞：pH7.07.4。酚红的呈色：酚红的呈色： 2、缓冲盐：碳酸氢钠、缓冲