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文档简介

1、会计学1工业微生物原生质体育种和原生质体融工业微生物原生质体育种和原生质体融合合研究第1页/共55页复筛遗传性状鉴定菌种特性和发酵特性研究第2页/共55页1mlHCP培养几种，适当稀释后分离在选择培养基上，双层平板培养，筛选转化子。第3页/共55页第4页/共55页第5页/共55页第6页/共55页第7页/共55页细胞核进行类似的合二为一的细胞核进行类似的合二为一的过程。过程。第8页/共55页第9页/共55页显微镜下的原生质体融合显微镜下的原生质体融合第10页/共55页第11页/共55页第12页/共55页作。具有全能性，能再生细胞壁。第13页/共55页第14页/共55页第15页/共55页第16页/

2、共55页第17页/共55页菌高菌高, ,酵母及霉菌稍低。酵母及霉菌稍低。过高的温度使酶失活，原生质体失活；过低的温度酶活性不高，影响原生质体细胞膜稳定性第18页/共55页第19页/共55页第20页/共55页第21页/共55页第22页/共55页第23页/共55页第24页/共55页以交换、融合。第25页/共55页第26页/共55页第27页/共55页DAPI：4，6-联脒-2-苯基吲哚是一种常用的荧光染料，它们与DNA双螺旋的凹槽部分发生相互作用，从而与DNA的双链紧密结合。结合后产生的荧光基团的吸收峰是358nm而散射峰是461nm，正好UV（紫外光）的激发波长正好是356nm，使得DAPI成为了

3、一种常用的荧光检测信号。染色标记细胞核的位置。 第28页/共55页第29页/共55页第30页/共55页第31页/共55页第32页/共55页第33页/共55页第34页/共55页第35页/共55页第36页/共55页第37页/共55页第38页/共55页第39页/共55页第40页/共55页第41页/共55页质体的再生3、操作方式涂布培养法对原生质体有损坏第42页/共55页第43页/共55页第44页/共55页第45页/共55页细胞能在无激素的培养基上生长第46页/共55页第47页/共55页第48页/共55页第49页/共55页体融合后，可以完成代谢互补，是融合子回复再生能力。第50页/共55页第51页/共55页重组子的检出方法有两种重组子的检出方法有两种： 直接法直接法 将融合液涂布在不补充亲株生长需要的生长因子的将融合液涂布在不补充亲株生长需要的生长因子的高渗再生培养基平板上，直接筛选出原养型重组子高渗再生培养基平板上，直接筛选出原养型重组子 间接法间接法 把融合液涂布在营养丰富的高渗再生平板上，把融合液涂布在营养丰富的高渗再生平板上，使亲株和重组子都再生成菌落使亲株和重组子都再生成菌落 ，然后用影印，然后用影印法将它们复制到选择培养基上检出重组子法将它们复制到选择培养基上检出重组子。 第52页/共55页融合重组的频率融合重组的频率 = = 融合重组子融合重组子 两亲株原生质体再

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