第八章外源化学物致突变作用

1、第第8 8章章 外源化学物的致突变作用外源化学物的致突变作用 v1 1 概述概述v2 2 致突变作用致突变作用 类型类型v3 3 致突变作用致突变作用 机制与后果机制与后果v4 4 机体对致突变作用的影响机体对致突变作用的影响v5 5 致突变作用致突变作用 研究方法研究方法 1 1 概述概述v1.1 1.1 基本概念基本概念v1.2 1.2 遗传学基础遗传学基础遗传结构本身的变化及引起的变异。遗传结构本身的变化及引起的变异。突变实际上是遗传物质的一种可遗传的突变实际上是遗传物质的一种可遗传的变异。变异。突突 变变自发突变自发突变（spontaneous mutation） 是指在自然条件下发生

2、的突变。是指在自然条件下发生的突变。 诱发突变诱发突变（induced mutation） 是指人为地造成突变是指人为地造成突变 。有利突变有利突变 中性突变中性突变有害突变有害突变1.1 1.1 基本概念基本概念1 1 概述概述概 述有利突变有利突变中性突变中性突变小麦耐盐突变小麦耐盐突变不影响或基不影响或基本不影响蛋本不影响蛋白质的活性，白质的活性， 不表现出明不表现出明显的性状变显的性状变化化人类、动物、植物的白化突变人类、动物、植物的白化突变有害突变有害突变概 述遗传机构改变遗传机构改变遗 传 性 疾 病遗 传 性 疾 病癌症癌症动脉粥样硬化动脉粥样硬化糖尿病糖尿病衰老衰老环境因素环境

3、因素 连续分裂的细胞从上一次有丝分裂结束到下一次有丝连续分裂的细胞从上一次有丝分裂结束到下一次有丝分裂完成所经历的整个过程。分裂完成所经历的整个过程。1.2 1.2 细胞周期与细胞分裂细胞周期与细胞分裂M期（细胞分裂期）期（细胞分裂期）体细胞与生殖细胞体细胞与生殖细胞体细胞：多是二倍体细胞，含有两组完全相同的染色体，其体细胞：多是二倍体细胞，含有两组完全相同的染色体，其 遗传损伤不会遗传给下一代。遗传损伤不会遗传给下一代。生殖细胞：是单倍体，其染色体改变及突变可传给下一代。生殖细胞：是单倍体，其染色体改变及突变可传给下一代。生殖细胞的成熟过程生殖细胞的成熟过程2 2 致突变作用致突变作用 类型

4、类型v基因是基因是DNADNA链上的片段序列。链上的片段序列。v化学毒物引起基因突变作用的类型有：化学毒物引起基因突变作用的类型有：v2.1 2.1 基因突变基因突变v2.2 2.2 染色体畸变染色体畸变v2.3 2.3 染色体数目异常染色体数目异常2.1 2.1 基因突变基因突变v包括三种类型包括三种类型: :v碱基置换碱基置换v移码移码v大段损伤大段损伤碱基对替换（碱基置换、碱基取代）碱基对替换（碱基置换、碱基取代）指指DNA分子中一个或几个碱基对被另一个或几个碱基对替换。分子中一个或几个碱基对被另一个或几个碱基对替换。转换转换 （实线，对角线）（实线，对角线）颠换颠换 （虚线，纵横线）（

5、虚线，纵横线）碱基对替换（碱基置换、碱基取代）碱基对替换（碱基置换、碱基取代）指指DNA分子中一个或几个碱基对被另一个或几个碱基对替换。分子中一个或几个碱基对被另一个或几个碱基对替换。TTA GGG GAC GCG CAT GAAAAT CCC CTG CGC GTA CTTTTA GAG GAC GCG CAT GAAAAT CTC CTG CGC GTA CTTTTA GGG GAC GCG CAT TAAAAT CCC CTG CGC GTA ATT转换转换颠换颠换碱基对替换产生的后果碱基对替换产生的后果同义突变同义突变错义突变错义突变无义突变无义突变延长突变（终止密码突变）延长突变（终

6、止密码突变）同义突变同义突变 是指没有改变基因产物氨基酸的序列。是指没有改变基因产物氨基酸的序列。碱基对替换产生的后果碱基对替换产生的后果错义突变错义突变是指碱基序列的改变引起了产物氨基酸序列的改变。是指碱基序列的改变引起了产物氨基酸序列的改变。碱基对替换产生的后果碱基对替换产生的后果甘氨酸甘氨酸精氨酸精氨酸无义突变（链终止突变）无义突变（链终止突变）是指某个碱基的改变使代表某个氨基酸的密码子变是指某个碱基的改变使代表某个氨基酸的密码子变为蛋白质合成的终止密码子，导致多肽链在成熟之为蛋白质合成的终止密码子，导致多肽链在成熟之前终止合成的一类突变。前终止合成的一类突变。碱基对替换产生的后果碱基对

7、替换产生的后果亮氨酸亮氨酸延长突变（终止密码突变）延长突变（终止密码突变）是指终止密码子因突变而为氨基酸编码，结果产生是指终止密码子因突变而为氨基酸编码，结果产生过长的肽链的现象。过长的肽链的现象。碱基对替换产生的后果碱基对替换产生的后果遗传毒性的类型正常、圆饼形正常、圆饼形异常、镰刀形异常、镰刀形镰刀形细胞贫血症镰刀形细胞贫血症移码突变（移码框突变）移码突变（移码框突变）指发生一对或几对（指发生一对或几对（3对除外）的碱基减少或增加，以致从受对除外）的碱基减少或增加，以致从受损点开始碱基序列完全改变，形成错误的密码，并转译成为不损点开始碱基序列完全改变，形成错误的密码，并转译成为不正常的氨基

8、酸。正常的氨基酸。遗传毒性的类型基因突变大段损伤（大段损伤（DNA重排）重排）指指DNA序列上有较长的一段序列的重排分布，包括大段（一个碱序列上有较长的一段序列的重排分布，包括大段（一个碱基至数千个碱基）的插入、缺失、取代、复制、放大和倒位。基至数千个碱基）的插入、缺失、取代、复制、放大和倒位。遗传毒性的类型一、基因突变一、基因突变二、染色体畸变二、染色体畸变三、染色体数目异常三、染色体数目异常四、四、DNA损伤损伤遗传毒性的类型由于染色体或染色单体断裂，造成染色体或染色单体缺失，由于染色体或染色单体断裂，造成染色体或染色单体缺失，或引起各种重排，从而出现染色体结构异常的称为或引起各种重排，从

9、而出现染色体结构异常的称为染色体畸染色体畸变或染色体结构畸变变或染色体结构畸变。畸变涉及在染色复制体中两条染色单。畸变涉及在染色复制体中两条染色单体中的一条，称为体中的一条，称为染色单体型畸变染色单体型畸变，而涉及两条染色单体，而涉及两条染色单体，称为称为染色体型畸变染色体型畸变。染色体畸变染色体畸变chromosome aberration 遗传毒性的类型染色体畸变染色体畸变chromosome aberration 分类：分类： 缺缺 失失 重重 复复 倒倒 位位 易易 位位遗传毒性的类型猫叫综合征猫叫综合征成因成因: : 5 5号染色体短臂部分或全部缺失号染色体短臂部分或全部缺失2.3

10、2.3 染色体数目异常染色体数目异常v正常动物的染色体都是双倍体（人正常动物的染色体都是双倍体（人2323对）。对）。v染色体数目异常可以表现为整倍性畸变和非染色体数目异常可以表现为整倍性畸变和非整倍性畸变。整倍性畸变。v整倍性畸变整倍性畸变：染色体成对增减。：染色体成对增减。v非整倍性畸变非整倍性畸变：染色体奇数条增减。：染色体奇数条增减。3倍体倍体A triploid infant, showing the characteristic enlarged head.21三体综合征（先天愚型）三体综合征（先天愚型）trisomy 21 syndrome（Down Syndrome，DS）3.

11、 3. 突变的后果突变的后果v体细胞突变体细胞突变：引起个体病变如肿瘤、畸形、：引起个体病变如肿瘤、畸形、动脉粥样硬化、糖尿病、衰老、高血压等，动脉粥样硬化、糖尿病、衰老、高血压等，但不影响下代但不影响下代 。v生殖细胞突变生殖细胞突变：可影响下代和遗传。根据对：可影响下代和遗传。根据对人类影响程度分：对机体无影响；对机体健人类影响程度分：对机体无影响；对机体健康无影响的遗传学变异；遗传易感性改变；康无影响的遗传学变异；遗传易感性改变；遗传性疾病；致死性突变。遗传性疾病；致死性突变。一、体细胞突变的后果一、体细胞突变的后果（一）肿瘤（一）肿瘤 体细胞突变的后果中最受关体细胞突变的后果中最受关注

12、的是肿瘤。注的是肿瘤。 体细胞突变是肿瘤发生的重体细胞突变是肿瘤发生的重要基础，在许多肿瘤细胞中，都要基础，在许多肿瘤细胞中，都同时观察到基因突变导致的原癌同时观察到基因突变导致的原癌基因的活化和抑癌基因的失活，基因的活化和抑癌基因的失活，并存在缺失、倒位、易位等染色并存在缺失、倒位、易位等染色体畸变。体畸变。 研究证实化学物的致突变作研究证实化学物的致突变作用与其致癌作用存在着较高的相用与其致癌作用存在着较高的相关性，并且在关性，并且在DNA损伤修复缺陷损伤修复缺陷的人群中，肿瘤的发生也明显增的人群中，肿瘤的发生也明显增高。高。 一、体细胞突变的后果一、体细胞突变的后果（二）发育毒性（二）发

13、育毒性 孕体的体细胞（胚胎细胞）由孕体的体细胞（胚胎细胞）由受精卵起至器官形成期的细胞，因受精卵起至器官形成期的细胞，因外来化合物引起突变，就有可能使外来化合物引起突变，就有可能使新生儿存在外观或内脏的畸形。也新生儿存在外观或内脏的畸形。也可能发生着床前死亡、流产、死胎可能发生着床前死亡、流产、死胎和新生儿死亡，而活胎则可能有发和新生儿死亡，而活胎则可能有发育迟缓。育迟缓。浙江某药厂一女工产后浙江某药厂一女工产后100天的女孩天的女孩只有一个半手指（只有一个半手指（2003）一、体细胞突变的后果一、体细胞突变的后果（三）动脉粥样硬化（三）动脉粥样硬化 动脉粥样硬化是心血管疾病动脉粥样硬化是心血

14、管疾病的一个主要病理生理过程。的一个主要病理生理过程。 1973年年Benditt等人根据有关等人根据有关动脉粥样硬化斑内细胞是单克隆动脉粥样硬化斑内细胞是单克隆性的发现提出了一种假说，即动性的发现提出了一种假说，即动脉粥样硬化斑可被看作动脉壁的脉粥样硬化斑可被看作动脉壁的一种单克隆的良性赘生物。认为一种单克隆的良性赘生物。认为动脉粥样硬化起始于某一突变或动脉粥样硬化起始于某一突变或病毒感染，然后转化单一、分离病毒感染，然后转化单一、分离的平滑肌细胞成为增殖克隆的祖的平滑肌细胞成为增殖克隆的祖细胞。目前已得到间接证据的支细胞。目前已得到间接证据的支持。持。一、体细胞突变的后果一、体细胞突变的后

15、果（四）衰老（四）衰老 衰老机制复杂，涉及面广。衰老机制复杂，涉及面广。目前有遗传基因说、体细胞突变目前有遗传基因说、体细胞突变说、差错积累说等多种学说，尚说、差错积累说等多种学说，尚未形成共识。未形成共识。 支持体细胞突变和衰老两者支持体细胞突变和衰老两者之间因果关系的一个主要论据是之间因果关系的一个主要论据是DNA作为主要信息生物分子的作作为主要信息生物分子的作用和突变的不可逆性，即序列信用和突变的不可逆性，即序列信息的改变。息的改变。二、生殖细胞突变的后果二、生殖细胞突变的后果（一）（一）遗传病遗传病 遗传病是指个体生殖细胞遗传病是指个体生殖细胞或受精卵的遗传物质发生突变或受精卵的遗传物

16、质发生突变所引起的疾病。所引起的疾病。 遗传病一般可分为染色体遗传病一般可分为染色体病和基因病。染色体病是由于病和基因病。染色体病是由于染色体畸变引起的疾病，包括染色体畸变引起的疾病，包括染色体数目和结构异常而产生染色体数目和结构异常而产生的疾病。基因病是由于基因突的疾病。基因病是由于基因突变引起的疾病，包括单基因病变引起的疾病，包括单基因病和多基因病。和多基因病。二、生殖细胞突变的后果二、生殖细胞突变的后果（二）影响遗传负荷（二）影响遗传负荷 在人类许多复杂疾病中，遗传因素也起着部分作用，在人类许多复杂疾病中，遗传因素也起着部分作用，基因突变可增加下一代基因库的遗传负荷。基因突变可增加下一代

17、基因库的遗传负荷。基因库基因库指某一物种在特定时期中能将遗传信息传至下一代指某一物种在特定时期中能将遗传信息传至下一代的处于生育年龄的群体所含有的基因总和。的处于生育年龄的群体所含有的基因总和。遗传负荷遗传负荷指一种物种的群体中每一个携带的可遗传给下一指一种物种的群体中每一个携带的可遗传给下一代的有害基因的平均水平。代的有害基因的平均水平。二、生殖细胞突变的后果二、生殖细胞突变的后果（二）影响遗传负荷（二）影响遗传负荷 根据基因突变对遗传负荷的影响，即对后代增加危险性的程度，常根据基因突变对遗传负荷的影响，即对后代增加危险性的程度，常将基因突变分为三类：将基因突变分为三类： 第一类为第一类为显

18、性致死突变显性致死突变，引起受精卵或胚胎发生变化，受精卵或胚，引起受精卵或胚胎发生变化，受精卵或胚胎在胎儿成熟前死亡，显性致死突变引起的胎儿或受精卵的死亡或不孕，胎在胎儿成熟前死亡，显性致死突变引起的胎儿或受精卵的死亡或不孕，对基因库不会有影响；对基因库不会有影响； 第二类为第二类为显性存活突变显性存活突变，这类突变不会引起胚胎死亡，可在子一代，这类突变不会引起胚胎死亡，可在子一代表现出来，也就是通常所说的显性遗传，一般连续几代，每代都出现患表现出来，也就是通常所说的显性遗传，一般连续几代，每代都出现患者，男女双方患病几率相等，这类突变可传给后代，能影响基因库者，男女双方患病几率相等，这类突变

19、可传给后代，能影响基因库; 第三类为第三类为隐性突变隐性突变，也就是通常说的隐性遗传，即在杂合子不能表，也就是通常说的隐性遗传，即在杂合子不能表现出来，必须在纯合子时才能出现疾病，如其隐性基因病患者（现出来，必须在纯合子时才能出现疾病，如其隐性基因病患者（aa），），同正常人（同正常人（AA）婚配，子女全部是正常表型，但）婚配，子女全部是正常表型，但AA与与Aa各占一半，大各占一半，大大增加人群中致病基因的携带者，影响人类素质，增加遗传负荷，影响大增加人群中致病基因的携带者，影响人类素质，增加遗传负荷，影响人类基因库。人类基因库。遗传毒性的后果二、生殖细胞突变的后果二、生殖细胞突变的后果（三）

20、生殖毒性（三）生殖毒性 突变还可造成生殖毒突变还可造成生殖毒性，包括生殖器官、相关性，包括生殖器官、相关的内分泌系统和妊娠结局的内分泌系统和妊娠结局的改变，表现为对性成熟的改变，表现为对性成熟、配子发生及其转运、性、配子发生及其转运、性周期、性行为、受精、着周期、性行为、受精、着床、胚胎形成与发育、妊床、胚胎形成与发育、妊娠、分娩和哺乳过程等的娠、分娩和哺乳过程等的不良影响或依赖于生殖系不良影响或依赖于生殖系统完整性的其他功能的改统完整性的其他功能的改变。变。4 4 机体对致突变作用的影响机体对致突变作用的影响v机体机体对突变对突变DNADNA具有修复机制。具有修复机制。v机体机体对致突变作用

21、的影响相当复杂对致突变作用的影响相当复杂, ,其中重要的因其中重要的因素是遗传因素，包括代谢酶遗传多态性和修复功能素是遗传因素，包括代谢酶遗传多态性和修复功能的个体差异。的个体差异。v4.1 DNA4.1 DNA损伤的修复损伤的修复v4.2 4.2 遗传因素对致突变作用的影响遗传因素对致突变作用的影响5 5 致突变作用研究方法致突变作用研究方法v5.1 5.1 致突变试验目的及指示生物致突变试验目的及指示生物v5.2 5.2 常用致突变试验常用致突变试验v5.3 5.3 致突变应注意的问题致突变应注意的问题5.1 5.1 致突变试验目的及指示生物致突变试验目的及指示生物v目的：目的：评定外源化

22、学物对生殖细胞及体细胞评定外源化学物对生殖细胞及体细胞的突变性，对致癌、致畸和遗传危害的潜在的突变性，对致癌、致畸和遗传危害的潜在可能作出初步评价。可能作出初步评价。v指示生物：指示生物：细菌、病毒、真菌、昆虫、哺乳细菌、病毒、真菌、昆虫、哺乳动物及其体外培养细胞和植物。动物及其体外培养细胞和植物。5.2 5.2 常用致突变试验常用致突变试验v细菌回复突变试验（细菌回复突变试验（AmesAmes试验）试验）v哺乳动物细胞基因突变试验哺乳动物细胞基因突变试验v微核试验（微核试验（MNTMNT）v染色体畸变试验染色体畸变试验v显性致死试验显性致死试验v程序外程序外DNADNA合成（合成（UDSUD

23、S）试验）试验v姐妹染色单体交换试验姐妹染色单体交换试验v果蝇伴性隐性致死试验果蝇伴性隐性致死试验v单细胞凝胶电泳（单细胞凝胶电泳（SLRLSLRL）试验）试验v荧光原位杂交（荧光原位杂交（FISHFISH）试验）试验v转基因动物致突变试验转基因动物致突变试验细菌回复突变试验细菌回复突变试验v细菌回复突变试验细菌回复突变试验是以营养缺陷型的突变体为指示是以营养缺陷型的突变体为指示生物，观察受试物是否纠正或补偿突变体所携带的生物，观察受试物是否纠正或补偿突变体所携带的突变发生改变的体外试验。突变发生改变的体外试验。v原理原理是利用鼠伤寒菌的组氨酸营养缺陷型菌株，因是利用鼠伤寒菌的组氨酸营养缺陷型

24、菌株，因其突变丧失合成组氨酸的能力而在无组氨酸培养基其突变丧失合成组氨酸的能力而在无组氨酸培养基中不能存活，若受试物可使该菌发生回复突变，则中不能存活，若受试物可使该菌发生回复突变，则其该菌在无组氨酸培养基中能存活。说明受试物有其该菌在无组氨酸培养基中能存活。说明受试物有致突变作用。致突变作用。 v菌株中菌株中AT97AT97、AT98AT98可检测移码突变，可检测移码突变，AT100AT100可检测可检测置换突变。置换突变。哺乳动物细胞基因突变试验哺乳动物细胞基因突变试验v它是体外培养哺乳动物细胞的野生型基因失它是体外培养哺乳动物细胞的野生型基因失活的正向突变试验。活的正向突变试验。v利用培

25、养的哺乳动物细胞系如小鼠淋巴细胞利用培养的哺乳动物细胞系如小鼠淋巴细胞系（系（L5178yL5178y）、中国仓鼠肺细胞株（）、中国仓鼠肺细胞株（V97V97）和）和卵巢细胞株（卵巢细胞株（AS52AS52），观察接触受试物后特），观察接触受试物后特定基因座位上是否诱变产生突变体。定基因座位上是否诱变产生突变体。微核试验微核试验v是观察受试物是否引起动植物细胞产生微核是观察受试物是否引起动植物细胞产生微核的试验。的试验。v原理是：细胞经过突变后，染色体和染色单原理是：细胞经过突变后，染色体和染色单体的无着丝点片段或因纺锤丝受损而丢失，体的无着丝点片段或因纺锤丝受损而丢失，使整个染色体在细胞有丝

26、分裂后期不能进入使整个染色体在细胞有丝分裂后期不能进入子代细胞的细胞核中，而在间期的子代细胞子代细胞的细胞核中，而在间期的子代细胞浆内形成一个或几个规则的次核，即微核。浆内形成一个或几个规则的次核，即微核。染色体畸变试验染色体畸变试验v染色体畸变试验是通过镜下观察（设备有流染色体畸变试验是通过镜下观察（设备有流式细胞仪）染色体形态和数目改变的试验。式细胞仪）染色体形态和数目改变的试验。v本试验灵敏度高。本试验灵敏度高。v染色体形态改变可见裂隙、断裂、断片、无染色体形态改变可见裂隙、断裂、断片、无着丝粒环、双或多着丝粒染色体、射体和染着丝粒环、双或多着丝粒染色体、射体和染色体破碎。色体破碎。v注

27、意：因其改变具有时相变化，应在培养中注意：因其改变具有时相变化，应在培养中多次检测。多次检测。程序外程序外DNADNA合成试验合成试验v是通过观察培养细胞在细胞增殖周期内是通过观察培养细胞在细胞增殖周期内S S期以期以外时相外时相DNADNA合成情况的试验。合成情况的试验。v当细胞当细胞DNADNA受损后，受损后，DNADNA的修复合成可发生在的修复合成可发生在S S期外时相，即程序外期外时相，即程序外DNADNA合成。因此，该试验合成。因此，该试验可反映可反映DNADNA受损情况。受损情况。v具体实验方法可利用放射自显影或闪烁计数具体实验方法可利用放射自显影或闪烁计数法。法。v试验具有简便、

28、经济和快速。试验具有简便、经济和快速。 在在DNADNA合成期，所有染色体均进行复制，复制后形成两条合成期，所有染色体均进行复制，复制后形成两条姐妹染色单体。姐妹染色单体交换是一个染色体的两个姐妹姐妹染色单体。姐妹染色单体交换是一个染色体的两个姐妹染色单体的同源片段间发生交换。姐妹染色单体交换可能与染色单体的同源片段间发生交换。姐妹染色单体交换可能与DNADNA的断裂和重接有关，故可间接反映的断裂和重接有关，故可间接反映DNADNA损伤。损伤。 同染色体畸变试验一样，姐妹染色单体交换试验可进行同染色体畸变试验一样，姐妹染色单体交换试验可进行体外试验，也可进行体内试验。体外试验可用细胞株或人外体

29、外试验，也可进行体内试验。体外试验可用细胞株或人外周血淋巴细胞，体内试验可用骨髓细胞或睾丸生殖细胞进行。周血淋巴细胞，体内试验可用骨髓细胞或睾丸生殖细胞进行。姐妹染色单体交换试验姐妹染色单体交换试验BrdU：溴化脱氧尿嘧啶核苷溴化脱氧尿嘧啶核苷 果蝇伴性隐性致死试验果蝇伴性隐性致死试验v果蝇伴性隐性致死试验是利用隐性基因在伴性遗传中具有交果蝇伴性隐性致死试验是利用隐性基因在伴性遗传中具有交叉遗传的特征而进行的试验。叉遗传的特征而进行的试验。v当基因发生点突变、小缺失（当基因发生点突变、小缺失（DNADNA大段损伤）、重组等各类大段损伤）、重组等各类基因突变的隐性致死效应，将伴性遗传传给基因突变

30、的隐性致死效应，将伴性遗传传给F1F1雌性动物，再雌性动物，再由其传给由其传给F2F2雄性动物。雄性动物。 因因F1F1雌性动物为杂合子，不能表达。雌性动物为杂合子，不能表达。而而F2F2雄性动物为半合子，将表达出来。雄性动物为半合子，将表达出来。v该试验利用黑腹果蝇试验，其具有世代周期短、繁殖率高、该试验利用黑腹果蝇试验，其具有世代周期短、繁殖率高、饲养方便、经济、判断终点客观、不需活化等优点。但染毒饲养方便、经济、判断终点客观、不需活化等优点。但染毒方式与剂量计算与哺乳动物差异较大。方式与剂量计算与哺乳动物差异较大。u利用隐性基因在伴性遗传中具有交叉遗传特征，选择利用隐性基因在伴性遗传中具

31、有交叉遗传特征，选择黑腹果蝇为实验动物，给予雄蝇受试物，如雄蝇的黑腹果蝇为实验动物，给予雄蝇受试物，如雄蝇的X X染色体有突变，传给染色体有突变，传给F1F1代雌蝇，再通过代雌蝇，再通过F1F1代雌蝇传给代雌蝇传给F2F2代雄蝇，使位于代雄蝇，使位于X X染色体上的隐性基因在半合型雄染色体上的隐性基因在半合型雄蝇表现出来。即由于致死突变不出现，会有明显标记蝇表现出来。即由于致死突变不出现，会有明显标记的野生型雄蝇出现。的野生型雄蝇出现。 果蝇伴性隐性致死试验果蝇伴性隐性致死试验单细胞凝胶电泳试验单细胞凝胶电泳试验v单细胞凝胶电泳试验是用单细胞凝胶电泳试验是用凝胶电泳的方法观凝胶电泳的方法观察细

32、胞察细胞DNADNA受损情况的试验。受损情况的试验。v其原理是在其原理是在DNADNA损伤时，断裂的损伤时，断裂的DNADNA片段比大片段比大片段片段DNADNA迁移的更快，电泳后出现彗星状，即迁移的更快，电泳后出现彗星状，即可判断可判断DNADNA损伤。损伤。荧光原位杂交试验荧光原位杂交试验v荧光原位杂交试验荧光原位杂交试验是一种在保持组织、细胞或染色体原有形是一种在保持组织、细胞或染色体原有形态结构的基础上，对其内部特殊核苷酸顺序进行检测及定位态结构的基础上，对其内部特殊核苷酸顺序进行检测及定位的试验。的试验。v荧光原位杂交技术荧光原位杂交技术是用生物荧光来标记的各类是用生物荧光来标记的各

33、类DNADNA和和RNARNA进行进行原位杂交，即可使被观察的特定原位杂交，即可使被观察的特定DNADNA序列显现荧光。序列显现荧光。v该法具有操作、分析简便、立体分辨率高、准确迅速、安全该法具有操作、分析简便、立体分辨率高、准确迅速、安全性高等优点。性高等优点。转基因动物致突变试验转基因动物致突变试验v转基因动物致突变试验转基因动物致突变试验是用转基因动物致突变系统是用转基因动物致突变系统来检测基因突变的试验。来检测基因突变的试验。v转基因动物致突变技术转基因动物致突变技术是利用穿梭载体于原核和真是利用穿梭载体于原核和真核之间往返转移，并带可回收靶基因载体的转基因核之间往返转移，并带可回收靶基因载体的转基因动物提供哺乳动物体内基因的检测系统。动物提供哺乳动物体内基因的检测系统。v它可在它可在动物整体水平动物整体水平研究突变的器官、组织的特异研究突变的器官、组织的特异性。并可通过从动物基因中重新回收的基因进行基性。并可通过从动物基因中重新回收的基因进行基因突变的组织专一性和顺序变化的序列分析研