噬菌体侵染细菌的实验

1、关于噬菌体侵染细菌的实验现在学习的是第一页，共29页噬菌体侵染细菌实验噬菌体侵染细菌实验n你记得本实验的基本操作吗？考纲要求：两个经典实验的设计思路和结论分析考情回顾：2010、2011年江苏卷、上海卷现在学习的是第二页，共29页n赫尔希通过T2噬菌体侵染细菌的实验证明DNA是遗传物质，实验包括4个步骤：n培养噬菌体(侵染细菌)，n35S和32P标记噬菌体，n放射性检测，n离心分离。n实验步骤的先后顺序为nA B n C DC现在学习的是第三页，共29页深度解读噬菌体侵染大肠杆菌的实验n1、实验者：n2、实验方法：放射性同位素标记法：用放射性同位素（如14C）掺入正常的分子中，使该分子带有放射

2、性，然后用放射自显影检测分子的分布。拓展：四本书中使用这种方法的有哪些知识？现在学习的是第四页，共29页蛋白质蛋白质外壳外壳DNA3、实验材料：噬菌体选择是关键现在学习的是第五页，共29页n解读实验材料T2噬菌体：n（1）结构：有何特点？n所用同位素究竟标记的是这两种物质的什么位置？请你写出氨基酸结构通式；画出脱氧核苷酸的结构简图；并标出同位素标记的部位。（2）生活方式：什么特点？怎样培养？（3）增殖特点：虽无细胞结构，但为生物的原因。看书P44噬菌体中60%是蛋白质,40%是DNA.现在学习的是第六页，共29页解读大肠杆菌n1、为什么不同的噬菌体会侵染不同的大肠杆菌？n2、噬菌体若想向大肠杆

3、菌中注入物质，需要先n溶解其什么结构？该结构主要成分是什么？现在学习的是第七页，共29页解读大肠杆菌n1、为什么不同的噬菌体会侵染不同的大肠杆菌？n2、噬菌体若想向大肠杆菌中注入物质，需要先n溶解其什么结构？该结构主要成分是什么？细胞表面的特异性受体决定。细胞壁；肽聚糖现在学习的是第八页，共29页4、实验设计思路-不同于体外转化实验n巧妙构思：n噬菌体只有DNA和蛋白质两种成分，n没有其它物质的干扰 。nS是蛋白质特有元素，nP是DNA特有元素，n用不同放射性同位素分别标记蛋白质和DNA，n直接地、单独地来观察它们的作用现在学习的是第九页，共29页n在“噬菌体侵染细菌”的实验中，如果放射性同位

4、素主要分布在离心管的沉淀物中，则获得侵染噬菌体的方法是()nA用含35S的培养基直接培养噬菌体nB用含32P的培养基直接培养噬菌体nC用含35S的培养基培养细菌，再用此细菌培养噬菌体nD用含32P的培养基培养细菌，再用此细菌培养噬菌体D现在学习的是第十页，共29页5、实验过程（如何标记噬菌体？）如何标记噬菌体？）n第一步：标记细菌（如何标记？）如何标记？）35S培养基+细菌35S标记的细菌32P培养基+细菌32P标记的细菌第二步：标记噬菌体（如何标记？）（如何标记？）噬菌体+ 35S标记的细菌35S标记的噬菌体噬菌体+ 32P标记的细菌32P标记的噬菌体现在学习的是第十一页，共29页n第三步：

5、标记的噬菌体侵染未标记的细菌n仔细研读课本实验有关内容n友情提示：n今年高考选修三试题基本都是课本n原话填空，所以看书必须仔细现在学习的是第十二页，共29页第四步：放射性检测-搅拌和离心短时间保温、搅拌、离心目的-现在学习的是第十三页，共29页第四步：放射性检测解读上清液：解读沉淀物：现在学习的是第十四页，共29页第四步：放射性检测解读上清液：上清液中含未侵染的T2噬菌体和侵染后的噬菌体外壳解读沉淀物：沉淀物中含有被感染的细菌现在学习的是第十五页，共29页 该实验中时间应怎样把握？ 过长过短放射性会集中于上清液还是沉淀？为什么？ 时间过长因为超过噬菌体的裂解周期，放射性集中于上清液中，过短来不

6、及侵染细菌，从而也集中于上清液中 。现在学习的是第十六页，共29页n解读放射性检测结果：n35S标记后上清液放射性高，沉淀物放射性很低（为什么沉淀物有低放射性？）n32P标记后上清液放射性很低（为什么上清液有低放射性？） ，沉淀物放射性很高。现在学习的是第十七页，共29页解读32P标记后上清液有低放射性原因n（1）保温时间过短，有一部分噬菌体还没有侵染到大肠杆菌细胞内，经离心分布于上清液中，上清液中出现放射性。n（2）噬菌体和大肠杆菌混合培养到用离心机分离，这一段保温时间过长，噬菌体在大肠杆菌内增殖后释放子代，经离心分布于上清液，也会使上清液有放射性。现在学习的是第十八页，共29页35S标记后

7、为什么沉淀物有低放射性？n由于搅拌不充分，有少量含35S的噬菌体吸附在细菌表面，随细菌离心到沉淀物中。现在学习的是第十九页，共29页实验分析：n结果分析：n细菌体内无35S，体外有35Sn细菌体内有32P，体外无32P35S标记的噬菌体外壳并没有进入细胞内部，而32P标记的噬菌体DNA进入了细菌内部实验结论：DNA是遗传物质。你认为该实验还能证明什么？DNA 分子具有相对稳定性；DNA能自我复制，保持前后代一定连续性；DNA能控制蛋白质的生物合成，但不能证明DNA分子产生可遗传的变异。现在学习的是第二十页，共29页解读子代噬菌体的组成（课本44页）n噬菌体侵染细菌后，n合成子代噬菌体的外壳的原

8、料是？n而子代噬菌体的DNA来自？现在学习的是第二十一页，共29页注意标记对象是噬菌体还是细菌，标记对象不同，结果应不同：现在学习的是第二十二页，共29页注意标记对象是噬菌体还是细菌，标记对象不同，结果应不同：现在学习的是第二十三页，共29页3535S S标记的标记的蛋白质蛋白质3232P P标记的标记的DNADNA1 1、感染、感染2 2、搅拌、搅拌3 3、离心、离心蛋白质外壳蛋白质外壳（强放射性（强放射性）细菌（强放射性）细菌（强放射性）细菌细菌蛋白质外蛋白质外壳壳现在学习的是第二十四页，共29页噬菌体（病毒）、大肠杆菌（原核生物）噬菌体（病毒）、大肠杆菌（原核生物）1 1、实验材料：、实

9、验材料：2 2、实验思路：、实验思路：4 4、实验结果：、实验结果：5 5、实验分析：、实验分析：总结蔡斯和赫尔希的实验总结蔡斯和赫尔希的实验设法把设法把DNADNA与蛋白质分开，单独与蛋白质分开，单独地直接去观察它们的作用。地直接去观察它们的作用。 用放射性同位素用放射性同位素3535S S和和3232P P分别标记噬菌分别标记噬菌体的蛋白质外壳和体的蛋白质外壳和DNADNA内核，后侵染细内核，后侵染细菌菌3 3、实验操作：、实验操作：在新噬菌体只能检测到在新噬菌体只能检测到3232P P，检，检测不到测不到3535S S在亲子代间具备连续性的是在亲子代间具备连续性的是DNADNA6 6、实

10、验结论：、实验结论：DNADNA是遗传物质是遗传物质现在学习的是第二十五页，共29页试比较肺炎双球菌转化实验和噬菌体侵染细菌的实验相同点： 1、实验思路-均使DNA和蛋白质分开，单独处理， 观察它们各自的作用，但两类实验中分开方式不同。2、实验原则-都遵循了对照原则。3、都证明了DNA是遗传物质。不同点：1、方法不同:艾弗里-分离化合物，分别与R型菌混合培养同位素标记法-分别标记DNA和蛋白质的特殊元素2、结论不同： 艾弗里-DNA是遗传物质，蛋白质等不是遗传物质 同位素标记法- DNA是遗传物质现在学习的是第二十六页，共29页噬菌体侵染细菌的动态过程：噬菌体侵染细菌的动态过程：侵入别的细菌侵入别的细菌侵入侵入合成合成吸附吸附组装组装释放释放吸附吸附侵入侵入合成合成组装组