选修Ⅰ《生物技术

1、生物材料汇总：生物材料汇总：马铃薯：马铃薯：检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质（马铃薯匀浆）、检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质（马铃薯匀浆）、探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化（无菌马铃薯培养液）探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化（无菌马铃薯培养液）生物体维持生物体维持pH稳定的机制稳定的机制洋葱：洋葱：观察观察DNA、RNA在细胞中的分布（洋葱鳞片叶内表皮细胞）、在细胞中的分布（洋葱鳞片叶内表皮细胞）、探究实验：植物细胞的吸水和失水（紫色洋葱鳞片叶）、探究实验：植物细胞的吸水和失水（紫色洋葱鳞片叶）、观察根尖分生组织细胞的有丝分裂（洋葱根尖分生区）、观察根尖分生组织细胞的有丝分裂（洋葱

2、根尖分生区）、低温诱导植物染色体数目的变化（洋葱根尖分生区）、低温诱导植物染色体数目的变化（洋葱根尖分生区）、DNA的粗提取与鉴定的粗提取与鉴定生物材料汇总：生物材料汇总：菠菜：菠菜：用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体（菠菜叶稍带叶肉的下表皮）、用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体（菠菜叶稍带叶肉的下表皮）、绿叶中色素的提取和分离、绿叶中色素的提取和分离、探究环境因素对光合作用强度的影响探究环境因素对光合作用强度的影响新鲜肝脏研磨液：新鲜肝脏研磨液：检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质、检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质、比较过氧化氢在不同条件下的分解速率、比较过氧化氢在不同条件下的分解速率、生物体维持生

3、物体维持pH稳定的机制稳定的机制人口腔上皮细胞：人口腔上皮细胞：使用高倍显微镜观察几种细胞、使用高倍显微镜观察几种细胞、观察观察DNA、RNA在细胞中的分布、在细胞中的分布、用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体哺乳动物成熟的红细胞：哺乳动物成熟的红细胞：体验制备细胞膜的方法、血红蛋白的提取和分离体验制备细胞膜的方法、血红蛋白的提取和分离在实验中始终保持细胞活性的有在实验中始终保持细胞活性的有观察植物细胞的质壁分离和质壁分离复原观察植物细胞的质壁分离和质壁分离复原用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体探究酵母菌呼吸方式探究酵母菌呼吸方式探究植物生长调

4、节剂对扦插枝条生根的作用探究植物生长调节剂对扦插枝条生根的作用教材中必须使用光学显微镜的实验有教材中必须使用光学显微镜的实验有（1）使用高倍显微镜观察几种细胞）使用高倍显微镜观察几种细胞（2）检测生物组织中的脂肪）检测生物组织中的脂肪-花生子叶中脂肪的鉴定花生子叶中脂肪的鉴定（3）观察）观察DNA、RNA在细胞中的分布在细胞中的分布（4）体验制备细胞膜的方法）体验制备细胞膜的方法（5）用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体）用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体（6）探究实验：植物细胞的吸水和失水）探究实验：植物细胞的吸水和失水 （使用低倍镜就可以观察到）（使用低倍镜就可以观察到）（7）观察根尖分生组织细胞的

5、有丝分裂）观察根尖分生组织细胞的有丝分裂（8）观察蝗虫精母细胞减数分裂固定装片）观察蝗虫精母细胞减数分裂固定装片（9）低温诱导植物染色体数目的变化）低温诱导植物染色体数目的变化（10）探究实验：培养液中酵母菌种群数量的变化）探究实验：培养液中酵母菌种群数量的变化 -抽样检测法（显微镜直接计数法）抽样检测法（显微镜直接计数法）只有探究酵母菌呼吸方式是对比实验只有探究酵母菌呼吸方式是对比实验可在显微镜下，持续观察细胞的动态变化可在显微镜下，持续观察细胞的动态变化: 探究实验：体验制备细胞膜的方法、植物细胞的吸水和失水探究实验：体验制备细胞膜的方法、植物细胞的吸水和失水各种微生物培养基的具体配方不同

6、，但一般都含有水、碳源、各种微生物培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。氮源和无机盐。离体的植物组织和细胞常用的培养基是离体的植物组织和细胞常用的培养基是MS培养基，其主要成培养基，其主要成分包括大量元素、微量元素、有机物（维生素、蔗糖等），分包括大量元素、微量元素、有机物（维生素、蔗糖等），常常需要添加植物激素等常常需要添加植物激素等动物细胞培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、动物细胞培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，通常加血清、血浆。微量元素等，通常加血清、血浆。胚胎早期培养液成分：胚胎早期培养液成分：两盐（有机盐、无机盐）两盐（有机盐、无

7、机盐）两酸（核苷酸、氨基酸）两酸（核苷酸、氨基酸）两素（维生素、激素），两素（维生素、激素），以及血清等物质以及血清等物质选修选修生物技术实践生物技术实践考点考点1、与传统发酵有关的几类微生物的比较、与传统发酵有关的几类微生物的比较酵母菌酵母菌醋酸菌醋酸菌毛霉毛霉乳酸菌乳酸菌生物学分类生物学分类生活方式生活方式异养兼性厌异养兼性厌氧氧适宜温度适宜温度2020左右左右3030353515151818 室温室温主要生殖方式主要生殖方式适宜条件下适宜条件下出芽生殖出芽生殖二分裂生殖二分裂生殖孢子生殖孢子生殖 二分裂生殖二分裂生殖主要用途主要用途 2、果酒和果醋制作原理和发酵条件的比较、果酒和果醋制作

8、原理和发酵条件的比较比较比较果酒制作果酒制作果醋制作果醋制作制作原理制作原理酵母菌先在有氧条件酵母菌先在有氧条件下大量繁殖，再在无下大量繁殖，再在无氧条件下进行酒精发氧条件下进行酒精发酵酵醋酸菌在氧气、糖源充足时，醋酸菌在氧气、糖源充足时，将糖分解成醋酸；将糖分解成醋酸；当缺少糖源时，将乙醇变为当缺少糖源时，将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸乙醛，再将乙醛变为醋酸反应式反应式C C6 6H H1212O O66 2C 2C2 2H H5 5OHOH2CO2CO2 2C C6 6H H1212O O6 62O2O22 2CH 2CH3 3COOHCOOH2CO2CO2 22H2H2 2O O C

9、C2 2H H5 5OHOHO O22CHCH3 3COOHCOOHH H2 2O O最适发酵最适发酵温度温度对氧的对氧的需求需求前期：需氧前期：需氧 后期：不需氧后期：不需氧需充足氧需充足氧pHpH酸性环境酸性环境(3.3(3.33.5)3.5)酸性环境酸性环境(5.4(5.46.3)6.3)发酵时间发酵时间101012 d12 d7 78 d8 d3、酿酒和酿醋发酵装置的相关考点：、酿酒和酿醋发酵装置的相关考点：(1)各部位的作用各部位的作用充气口：充气口： 。排气口：排气口： 。出料口：出料口： 。(2)该装置的使用方法：使用该装置制酒时，应该关该装置的使用方法：使用该装置制酒时，应该关

10、闭闭 ；制醋时，应将充气口连接；制醋时，应将充气口连接 ，输，输入入 。4、使用带盖的瓶子制葡萄酒时为什么要每隔、使用带盖的瓶子制葡萄酒时为什么要每隔12h左右左右将瓶盖拧松一次？为什么不是打开瓶盖？将瓶盖拧松一次？为什么不是打开瓶盖？5、用酒精消毒时，、用酒精消毒时，70%的酒精杀菌效果最的酒精杀菌效果最 好，原因是：好，原因是：6、酿酒时先将米煮熟的目的是：、酿酒时先将米煮熟的目的是：7、腐乳制作的原理：、腐乳制作的原理：8、腐乳制作过程中盐可起到抑制杂菌生长的、腐乳制作过程中盐可起到抑制杂菌生长的 作用，由于越接近瓶口，微生物污染作用，由于越接近瓶口，微生物污染 越越 ，故豆腐加盐时，越

11、近瓶口处盐用量，故豆腐加盐时，越近瓶口处盐用量 越多。越多。9、制作泡菜的过程中，有机物干重、制作泡菜的过程中，有机物干重 ，有，有 机物种类机物种类 。10、泡菜腌制过程中亚硝酸盐含量变化的趋势：、泡菜腌制过程中亚硝酸盐含量变化的趋势： 泡菜中亚硝酸盐的含量在整个发酵过程中的变化泡菜中亚硝酸盐的含量在整个发酵过程中的变化趋势：趋势： 。 随着腌制时间的延长，随着腌制时间的延长， 抑制抑制亚硝酸盐还原亚硝酸盐还原菌菌的繁殖，致使泡菜中亚硝酸盐含量下降。的繁殖，致使泡菜中亚硝酸盐含量下降。11、亚硝酸盐对人体有什么危害？、亚硝酸盐对人体有什么危害？12、因为发酵不同时期亚硝酸盐含量会发生变化，、

12、因为发酵不同时期亚硝酸盐含量会发生变化， 及时检测是为了把握取食的最佳时机（及时检测是为了把握取食的最佳时机（一般发 酵 口感最好）。）。 亚硝酸盐的测定亚硝酸盐的测定- 法法-玫瑰红色染料玫瑰红色染料氢氧化铝胶体能吸附泡菜汁液中氢氧化铝胶体能吸附泡菜汁液中的杂质，使泡菜汁透明澄清，以便进行后续的显的杂质，使泡菜汁透明澄清，以便进行后续的显色反应。色反应。13、注意：发酵、注意：发酵无氧呼吸无氧呼吸 发酵是通过微生物的培养来大量生产各种代谢产发酵是通过微生物的培养来大量生产各种代谢产 物的过程，包括有氧发酵（如醋酸发酵、谷氨酸物的过程，包括有氧发酵（如醋酸发酵、谷氨酸发酵）和无氧发酵（如酒精发

13、酵），发酵）和无氧发酵（如酒精发酵）， 不能认为只有微生物的无氧呼吸才叫发酵。不能认为只有微生物的无氧呼吸才叫发酵。14、选择培养基：、选择培养基： 培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长；培养、生物的生长，促进所需要的微生物的生长；培养、分离出特定微生物分离出特定微生物 (如培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入青霉素；如培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入青霉素；培养金黄色葡萄球菌，可在培养基中加入高浓度培养金黄色葡萄球菌，可在培养基中加入高浓度食盐食盐)鉴别培养基：鉴别培养基： 根据微生物的代谢特点，在培养基中加

14、入某种指示剂或化根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品鉴别不同种类的微生物，学药品鉴别不同种类的微生物，如可用伊红如可用伊红美蓝培养基美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌(若有，菌落呈深若有，菌落呈深紫色，并带有金属光泽紫色，并带有金属光泽) -鉴别培养基因含琼脂，故为固体培养基鉴别培养基因含琼脂，故为固体培养基判断培养基中是否有杂菌污染，判断培养基中是否有杂菌污染，需将未接种的培需将未接种的培养基同时进行培养。养基同时进行培养。判断选择培养基是否具有筛选作用，判断选择培养基是否具有筛选作用，需设立牛肉需设立牛肉膏蛋白胨培养基进行接种

15、后培养，观察两种培养膏蛋白胨培养基进行接种后培养，观察两种培养基上菌落数目，进行对比得出结论。基上菌落数目，进行对比得出结论。15、无菌技术的种类、无菌技术的种类条件条件结果结果常用方法常用方法消消毒毒较为温较为温和的物和的物理或化理或化学方法学方法仅杀死物体表面或内仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害部一部分对人体有害的微生物（不包括芽的微生物（不包括芽孢和孢子）孢和孢子）煮沸消毒法、煮沸消毒法、 巴氏消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药紫外线或化学药剂消毒法剂消毒法灭灭菌菌强烈的强烈的理化因理化因素素杀死物体内外所有的杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和微生物，包括芽孢和孢子孢子灼烧灭菌、灼

16、烧灭菌、干热灭菌、干热灭菌、 高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌（1）灼烧灭菌：）灼烧灭菌： 接种用具和接种过程中的试管口或瓶口放在酒精灯火接种用具和接种过程中的试管口或瓶口放在酒精灯火焰的充分燃烧层（酒精灯外焰）中进行灼烧灭菌。焰的充分燃烧层（酒精灯外焰）中进行灼烧灭菌。（2）干热灭菌：）干热灭菌： 将玻璃器皿、金属用具等能耐高温并需要保持干燥的将玻璃器皿、金属用具等能耐高温并需要保持干燥的物品放到干热灭菌箱内，在物品放到干热灭菌箱内，在160170OC中加热中加热12h即可。即可。（3）高压蒸汽灭菌：）高压蒸汽灭菌： 将需灭菌的物品放到盛有水的高压灭菌锅内煮沸，待将需灭菌的物品放到盛有水的高压灭菌锅

17、内煮沸，待冷空气排尽后，密闭继续加热至锅内压力到冷空气排尽后，密闭继续加热至锅内压力到100kPa，温度到温度到121OC后，维持后，维持1530min即可。即可。16、对实验操作的空间、操作者的衣着和手、对实验操作的空间、操作者的衣着和手 进行清洁进行清洁 ； 将培养皿、接种用具进行将培养皿、接种用具进行 ；接种的过程要在酒精灯附近进行。接种的过程要在酒精灯附近进行。紫外线灭菌的原因：紫外线灭菌的原因：消毒和瞬时灭菌的目的是消毒和瞬时灭菌的目的是17、细菌纯化的原理：、细菌纯化的原理： 菌落：菌落：18、大肠杆菌具有、大肠杆菌具有 ，结构简单，结构简单， 容易选择容易选择，易培养，易培养，

18、等优点，因此常等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。作为遗传学研究的实验材料。19、纯化大肠杆菌的方法：平板划线法、稀、纯化大肠杆菌的方法：平板划线法、稀释涂布平板法。释涂布平板法。（1）平板划线法：（只能）平板划线法：（只能 ，不能，不能 ）第一次划线及每次划线之前都需要灼烧接第一次划线及每次划线之前都需要灼烧接种环灭菌。种环灭菌。灼烧接种环之后，要冷却后才能伸入菌液，灼烧接种环之后，要冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。以免温度太高杀死菌种。划线时最后一区域不要与第一区域相连。划线时最后一区域不要与第一区域相连。划线用力大小要适当，防止用力过大将培划线用力大小要适当，防止用力过大将

19、培养基划破。养基划破。（2）稀释涂布平板法（既能）稀释涂布平板法（既能 ，也能，也能 。但只。但只 能计活菌数）能计活菌数）-也叫间接计数法也叫间接计数法(活菌计数法活菌计数法) 操作步骤：操作步骤：. 操作操作. 操作操作 每个稀释度均用每个稀释度均用 个选择培养基，个选择培养基， 培养后再选择菌落数在培养后再选择菌落数在 的平板进行计数。的平板进行计数。20、显微镜直接计数法：利用特定细菌计数板、显微镜直接计数法：利用特定细菌计数板 或或 计数板计数板，在显微镜下计算一定容积的，在显微镜下计算一定容积的 样品中微生物数量。样品中微生物数量。缺点：不能区分死菌与活菌。缺点：不能区分死菌与活菌

20、。21、细菌的数目还可以通过滤膜法来测定、细菌的数目还可以通过滤膜法来测定-以以测定饮测定饮用水中大肠杆菌的数目用水中大肠杆菌的数目为例。将已知体积的水过滤为例。将已知体积的水过滤后，将滤膜放在后，将滤膜放在 培养基培养基上培养。在培养基上，上培养。在培养基上，大肠杆菌的菌落呈现黑色。可根据培养基上黑色菌大肠杆菌的菌落呈现黑色。可根据培养基上黑色菌落的数目，计算出水样中大肠杆菌的数量。落的数目，计算出水样中大肠杆菌的数量。22、菌种的保存、菌种的保存（1）试管低温临时保存：将菌种接种到试管的固体斜面）试管低温临时保存：将菌种接种到试管的固体斜面培养基上，培养成菌落后，置于培养基上，培养成菌落后

21、，置于 OC的冰箱中保存的冰箱中保存（每隔（每隔36个月要重新接种培养后再保存）。个月要重新接种培养后再保存）。（2） 长期保存：在长期保存：在3mL的甘油瓶中加入的甘油瓶中加入1mL的甘的甘油，高压灭菌。将油，高压灭菌。将1mL培养的菌液转移到甘油瓶中，培养的菌液转移到甘油瓶中，充分混合后，置于充分混合后，置于 OC的冷冻箱中保存。的冷冻箱中保存。23、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数筛选的原理：、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数筛选的原理：在在 的配方中，把尿素作为培养基中的唯一氮源，的配方中，把尿素作为培养基中的唯一氮源，原则上只有能够利用尿素的微生物才能够生长。细菌原则上只有能够利用尿

22、素的微生物才能够生长。细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，会使培养基的合成的脲酶将尿素分解成氨，会使培养基的pH升高。升高。在培养基中加入在培养基中加入 ，利用此培养基进行细菌培养，利用此培养基进行细菌培养，观察培养基的颜色变化。观察培养基的颜色变化。24、分解纤维素的微生物的分离纤维素酶是一种、分解纤维素的微生物的分离纤维素酶是一种复合酶，它包括复合酶，它包括C1酶、酶、CX酶和葡萄糖苷酶，具酶和葡萄糖苷酶，具有催化分解纤维素的作用有催化分解纤维素的作用 刚果红能与纤维素形成红色复合物刚果红能与纤维素形成红色复合物，而不与水，而不与水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。解后的纤维二糖和葡萄糖发生这

23、种反应。 用加入刚果红的纤维素培养基去培养微生物时，用加入刚果红的纤维素培养基去培养微生物时，如果培养基中出现以菌落为中心的如果培养基中出现以菌落为中心的 时，可时，可说明该菌落是纤维素分解菌，因为它已将被刚说明该菌落是纤维素分解菌，因为它已将被刚果红染成红色的纤维素分解了果红染成红色的纤维素分解了25、外植体：外植体：从活植物体上切下进行培养的那部分组织从活植物体上切下进行培养的那部分组织或器官或器官脱分化：脱分化：就是让已经分化的细胞，经过诱导后，失去其就是让已经分化的细胞，经过诱导后，失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞的过程。特有的结构和功能而转变成未分化细胞的过程。再分化：再分化

24、：脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官，这个过程叫再分化。重新分化成根或芽等器官，这个过程叫再分化。愈伤组织：愈伤组织：细胞排列疏松而无规则，是一种高度液泡化细胞排列疏松而无规则，是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞。的呈无定形状态的薄壁细胞。 愈伤组织常用做诱变育种的理想材料，因为愈伤组织愈伤组织常用做诱变育种的理想材料，因为愈伤组织是一群具有分裂能力的细胞，是一群具有分裂能力的细胞，DNA在细胞分裂时结构在细胞分裂时结构最不稳定，最易发生基因突变。最不稳定，最易发生基因突变。26、植物组织培养的材料选择：、植物组织培养的

25、材料选择：（1）菊花的组织培养实验中，应选择）菊花的组织培养实验中，应选择 ； （2）花药的培养实验中，）花药的培养实验中， 应选择应选择 的花粉进行培养。的花粉进行培养。 选择花药一般通过选择花药一般通过镜检镜检来确定其中的花粉是来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期，确定花粉发育时期最否处于适宜的发育期，确定花粉发育时期最常用方法：醋酸洋红法（红色）；焙花青常用方法：醋酸洋红法（红色）；焙花青铬矾法（铬矾法（蓝黑色蓝黑色） 。27、为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难？、为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难？花瓣松动后，微生物就可能侵入到花药，给花瓣松动后，微生物就可能侵入到花药，给材料的消

26、毒带来困难。材料的消毒带来困难。 28、激素使用的先后顺序及其用量比例对、激素使用的先后顺序及其用量比例对 细胞分裂和分化的影响如下表：细胞分裂和分化的影响如下表：使用顺序使用顺序实验结果实验结果先使用生长素，先使用生长素，后使用细胞分裂素后使用细胞分裂素先使用细胞分裂素，先使用细胞分裂素，后使用生长素后使用生长素同时使用同时使用生长素生长素/ /细胞分裂素比值与结果细胞分裂素比值与结果比值高时比值高时比值低时比值低时比值适中比值适中29、植物组织培养的应用、植物组织培养的应用（1） ：快速繁殖优良品种的植物组：快速繁殖优良品种的植物组 织培养技术。因此，也叫做快速繁殖技术。织培养技术。因此，

27、也叫做快速繁殖技术。 特点特点: （2）作物脱毒原理：）作物脱毒原理： （3）生产细胞产品（从）生产细胞产品（从 组织提取）组织提取）（4）制造人工种子）制造人工种子（5）用于转基因植物的培育）用于转基因植物的培育30、使用果胶酶和纤维素酶能够提高、使用果胶酶和纤维素酶能够提高 并使并使果汁变得果汁变得 。 果胶酶和纤维素酶都是果胶酶和纤维素酶都是 酶，并不特指某一种酶，并不特指某一种酶而是酶而是 的总称。的总称。 纤维素酶至少包括三种组分，即纤维素酶至少包括三种组分，即C1酶、酶、Cx酶和葡萄酶和葡萄糖苷酶。糖苷酶。 果胶酶包括果胶酶包括多聚半乳糖醛酸酶多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯果

28、胶分解酶和果胶酯酶酶等。等。31、酶的活性与影响酶活性的因素、酶的活性与影响酶活性的因素(1)酶的活性：酶的活性： 。酶活性的高低可以用酶活性的高低可以用 来表示来表示。酶反应速度：用酶反应速度：用 来表来表示。示。32、固定化酶和固定化细胞技术：利用物理或化、固定化酶和固定化细胞技术：利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术。学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术。使酶既能与反应物接触，又能与产物分离，同使酶既能与反应物接触，又能与产物分离，同时，固定在载体上的酶还可以被反复利用的技时，固定在载体上的酶还可以被反复利用的技术。即：术。即： 。33、将酶或细胞固定化的方法：、将酶或细

29、胞固定化的方法： 34、酶更适合采用、酶更适合采用 固定，固定，而细胞多采用而细胞多采用 固定。固定。 这是因为细胞个大，而酶分子很小，个大的细这是因为细胞个大，而酶分子很小，个大的细胞难以被吸附或结合，而个小的酶容易从包埋胞难以被吸附或结合，而个小的酶容易从包埋材料中漏出。材料中漏出。35、PCR扩增技术和扩增技术和DNA复制的比较复制的比较DNADNA复制复制PCRPCR扩增技术扩增技术场所场所原理原理酶酶条件条件原料原料特点特点延长延长方向方向都是从子链的都是从子链的 端到端到 端端36、DNA的粗提取与鉴定的原理、方法和目的的粗提取与鉴定的原理、方法和目的基本原理基本原理方法方法目的目

30、的DNA在不同浓度的在不同浓度的NaCl溶液中的溶解溶液中的溶解度不同，在度不同，在 mol/L的的NaCl溶液溶液中的溶解度最低中的溶解度最低溶于溶于NaCl溶溶液中并稀释液中并稀释NaCl溶液为溶液为 mol/L时，时，DNA溶解，而部分蛋白质发生盐析而溶解，而部分蛋白质发生盐析而生成沉淀，通过过滤可除去部分生成沉淀，通过过滤可除去部分蛋白质及不溶于蛋白质及不溶于NaCl溶液的杂质溶液的杂质当当NaCl溶液稀释至溶液稀释至 mol/L时时，DNA析出，过滤可除去溶于析出，过滤可除去溶于NaCl中的部分蛋白质和其他杂质中的部分蛋白质和其他杂质DNA 被蛋白酶被蛋白酶所水解所水解加入嫩肉粉加入

31、嫩肉粉嫩肉粉中含木瓜蛋白酶，水解蛋嫩肉粉中含木瓜蛋白酶，水解蛋白质白质DNA 溶于酒精溶于酒精溶液溶液加入冷却酒加入冷却酒精精(95%)DNA析出，除去溶于酒精的蛋白析出，除去溶于酒精的蛋白质质DNA可被可被 染成染成蓝色蓝色加入二苯胺，加入二苯胺，并并 鉴定鉴定DNA（二苯胺需（二苯胺需 ）37、DNA的粗提取的实验材料的粗提取的实验材料(1)动物：动物：鸡血红细胞、白细胞中都含有细胞核，含大量鸡血红细胞、白细胞中都含有细胞核，含大量 的的DNA，既经济又易取，既经济又易取 人和哺乳动物成熟的红细胞中不含人和哺乳动物成熟的红细胞中不含 ，也没有，也没有 ，不适于作不适于作DNA提取的材料，但却是提取提取的材料，但却是提取 的理想材料。的理想材料。(2)植物：植物：新鲜菜花（花椰菜）、蒜黄、菠菜等。新鲜菜花（花椰菜）、蒜黄、菠菜等。 (使用洗涤剂溶解使用洗涤剂溶解 )38、实验步骤：、实验步骤：提取血细胞核物质提取血细胞核物质(蒸馏水涨破蒸馏水涨破)溶解溶解( mol/L的的NaCl)过滤过滤(除杂质除杂质)析出析出(滴蒸馏水，滴蒸馏水，降降NaCl浓度至浓度至 mol/L)过滤过滤再溶解再溶解( mol/L的的NaCl)过滤过滤进一步提纯进一步提纯(体积分数为体积分数为 的的 酒酒精精)鉴定。鉴定。39、凝胶色谱法分离蛋白质的原理、凝胶色谱法分离蛋白质的原理 蛋白质蛋白质比较比