实验诊断学标本采集方法2017

1、 实验诊断学实验诊断学 标本采集注意事项标本采集注意事项 李全亭李全亭 2017.2 主要内容主要内容：v标本采集的意义标本采集的意义v标本采集的原则标本采集的原则v标本采集的方法标本采集的方法 （痰标本、血标本（痰标本、血标本 尿标本、粪标本）尿标本、粪标本） 血液血液排泄物排泄物（粪、尿）（粪、尿）分泌物分泌物（痰、鼻分泌物）（痰、鼻分泌物）呕吐物呕吐物、体液体液（胸腔积液、腹腔积液）（胸腔积液、腹腔积液）脱落细胞脱落细胞（食道、阴道）（食道、阴道） 经过经过实验诊断学实验诊断学技术和方法对其进行检验，作为技术和方法对其进行检验，作为判断患者有无异常存在的依据判断患者有无异常存在的依据 标

2、本采集：采取少许的标本采集：采取少许的实验诊断学实验室的专业设置4 标本采集的意义标本采集的意义v明确诊断明确诊断v观察病情观察病情v指导制定治疗措施指导制定治疗措施 遵照医嘱遵照医嘱 严格严格核对核对正确采集正确采集及时送检及时送检 认真认真准备准备标本采集的原则标本采集的原则v遵照医嘱遵照医嘱v认真准备：认真准备： 1）患者准备）患者准备 2）用物准备）用物准备 3）护士自身准备）护士自身准备v严格查对：严格查对：检查项目、患者姓名、床号、检查项目、患者姓名、床号、住院号住院号v正确采集：正确采集：方法、时间、量、容器方法、时间、量、容器v及时送检及时送检各种标本的采集各种标本的采集一、痰

3、标本的采集一、痰标本的采集二、咽拭子标本的采集二、咽拭子标本的采集三、尿标本的采集三、尿标本的采集四、粪便标本的采集四、粪便标本的采集五、血液标本的采集五、血液标本的采集 一、痰标本采集的区别一、痰标本采集的区别 分类分类 目的目的痰常规痰常规痰液一般形状，涂片查细胞、痰液一般形状，涂片查细胞、细菌、虫卵等细菌、虫卵等痰培养痰培养痰中的致病菌痰中的致病菌 痰标本痰标本留取留取能自理的患者：能自理的患者： 晨起后用清水漱口晨起后用清水漱口 以清晨第一口痰为宜以清晨第一口痰为宜 深吸气后用力咳出气管深处的痰液深吸气后用力咳出气管深处的痰液 不可混入漱口液、唾液、鼻涕等不可混入漱口液、唾液、鼻涕等

4、无法咳痰或不合作者：无法咳痰或不合作者： 用吸痰法收集（集痰器）用吸痰法收集（集痰器）痰标本采集注意事项痰标本采集注意事项1、不可将唾液、漱口水、鼻涕等混入痰液中、不可将唾液、漱口水、鼻涕等混入痰液中2、收集痰液宜在清晨，因此时痰量较多，痰内细、收集痰液宜在清晨，因此时痰量较多，痰内细菌也较多，提高阳性率菌也较多，提高阳性率痰培养：下呼吸道感染病原诊断细菌真菌病毒支原体、衣原体与立克次体原虫寄生虫咳痰途经口咽部咳痰途经口咽部v唾液中口咽部定植菌的浓度可达108-109/ml。v国内常规痰标本中约半数存在唾液严重污染现象。不可避免地受到污染关于咳痰标本v在抗生素应用前采集痰标本v标本采集后12h

5、内必须及时送检v取标本前应摘去牙托，清洁口腔如刷牙和漱口v深咳，采集标本过程中要有专业的医务人员指导痰培养的送检次数v对于普通细菌性肺炎，痰标本送检每天1次，连续23天。不建议24h内多次采集，除非痰液外观性状出现改变；v怀疑分枝杆菌感染者，应连续收集3天清晨痰液送检；v怀疑军团菌或深部真菌感染，痰标本理想的送检次数尚无定论。二、咽拭子标本采集二、咽拭子标本采集 目标：从目标：从咽部和扁桃体咽部和扁桃体取分泌物作细菌培取分泌物作细菌培养或病毒分离，协助诊断。养或病毒分离，协助诊断。操作步骤及要点操作步骤及要点操作前准备操作前准备 核对核对点燃酒精灯，指导患者张口发点燃酒精灯，指导患者张口发“啊

6、啊”音，音，用长棉签蘸用长棉签蘸 以敏捷、轻柔的动作擦拭以敏捷、轻柔的动作擦拭两侧腭弓、咽扁桃体上的分泌物，两侧腭弓、咽扁桃体上的分泌物，取毕，取毕，将试管口及棉塞在酒精灯火焰上消毒后将试管口及棉塞在酒精灯火焰上消毒后插入棉签，塞紧。插入棉签，塞紧。将棉签插入将棉签插入试管中送检试管中送检上呼吸道标本上呼吸道标本 咽拭子标本采集注意事项咽拭子标本采集注意事项v作真菌培养时，须在口腔溃疡面采集分泌物作真菌培养时，须在口腔溃疡面采集分泌物v避免交叉感染避免交叉感染v注意棉签注意棉签不要触及其它部位不要触及其它部位，防止污染标本，影，防止污染标本，影响其他结果响其他结果v避免在进食避免在进食2小时内

7、采集标本，以小时内采集标本，以防呕吐防呕吐抑菌区域的产生抑菌区域的产生由于棉中所含的由于棉中所含的脂肪酸以及从木脂肪酸以及从木棒中渗出的树脂棒中渗出的树脂和甲醛。和甲醛。三、尿标本的采集三、尿标本的采集 尿标本的分类尿标本的分类v尿常规标本尿常规标本v尿培养标本尿培养标本v12h或或24h尿标本尿标本1、尿常规标本、尿常规标本尿液的性状：颜色、透尿液的性状：颜色、透明度明度尿沉渣：管型、细胞、尿沉渣：管型、细胞、细菌细菌尿干化学：尿蛋白、尿尿干化学：尿蛋白、尿糖、酮体糖、酮体用物准备：一次性尿杯用物准备：一次性尿杯+尿沉渣管尿沉渣管标本量：标本量：8-10ml2、尿培养标本、尿培养标本 清洁外

8、阴、尿道口清洁外阴、尿道口嘱患者排去前段尿嘱患者排去前段尿用无菌尿杯留取用无菌尿杯留取 5-10ml中段尿液中段尿液避免污染避免污染 以晨起第一次尿液立即送检不能用尿袋内的尿液3、12h或或24h尿标本尿标本 尿生化或尿浓缩查结核杆菌尿生化或尿浓缩查结核杆菌 7pm(am)排空膀胱尿液排空膀胱尿液弃去弃去留取留取翌日翌日7am 全部留取存于带盖的清洁容器内。全部留取存于带盖的清洁容器内。 记录尿量记录尿量 混匀后混匀后 取取10ml送检送检 尿标本采集注意事项尿标本采集注意事项女患者女患者月经期月经期不宜留取尿标本不宜留取尿标本会阴部会阴部分泌物过多时分泌物过多时，应先清洁再冲洗，再收集。，应

9、先清洁再冲洗，再收集。做做早孕检查早孕检查试验应留晨尿试验应留晨尿留留取尿培养标本时，无菌操作取尿培养标本时，无菌操作留取留取12h或或24h尿标本，集尿瓶应放在阴凉处尿标本，集尿瓶应放在阴凉处 四、粪便标本采集四、粪便标本采集目的：目的：1、了解消化道炎症、梗阻、出血、寄生虫感染、了解消化道炎症、梗阻、出血、寄生虫感染2、了解消化道状况，判断胰腺的外分泌功能、了解消化道状况，判断胰腺的外分泌功能3、粪便隐血可作为消化道恶性肿瘤的筛查、粪便隐血可作为消化道恶性肿瘤的筛查4、检查粪便中有无细菌判断肠道感染、检查粪便中有无细菌判断肠道感染 种类种类 目的目的 容器容器常规常规查一般形状查一般形状便

10、盒便盒细菌培养细菌培养查致病菌查致病菌培养瓶培养瓶隐血标本隐血标本查肉眼不能察见的查肉眼不能察见的微量血液微量血液便盒便盒寄生虫或虫卵标本寄生虫或虫卵标本查寄生虫查寄生虫便盒便盒v便常规、大便培养便常规、大便培养种类种类操作要点操作要点常规标本常规标本排空膀胱。异常粪便挑取有排空膀胱。异常粪便挑取有脓血、粘液脓血、粘液的部分；外观无异常的粪便应从中央取的部分；外观无异常的粪便应从中央取材，材，2-5g大小大小细菌培养标本细菌培养标本用用无菌棉签无菌棉签取取粪便粪便中央部分或脓血、粘中央部分或脓血、粘液部分液部分2-5g致培养瓶内，塞紧瓶盖。致培养瓶内，塞紧瓶盖。隐血标本（隐血标本（OB） 检查

11、前检查前3天禁食肉类、肝、血、含大量天禁食肉类、肝、血、含大量绿叶素的食物或含铁剂药物绿叶素的食物或含铁剂药物，三天后留，三天后留取标本送检。取标本送检。寄生虫或虫卵标寄生虫或虫卵标本本虫卵：不同部位的异常粪便虫卵：不同部位的异常粪便5-10g蟯虫：用透明胶带粘肛门周围蟯虫：用透明胶带粘肛门周围阿米巴：便器加热致人体体温阿米巴：便器加热致人体体温五、血液标本的采集五、血液标本的采集v1、血液标本的种类：、血液标本的种类：全血全血、血清血清、血浆血浆v全血：全血：血常规血常规血沉血沉v血清血清：生化、免疫生化、免疫v血浆：凝血项目、血血浆：凝血项目、血流变、血栓弹力图流变、血栓弹力图v血培养：血

12、培养：血液中的致血液中的致病菌病菌30常用采血管类型 真空采血管产品基本类型真空采血管产品基本类型 头盖颜色临床用途标本类型制 备 步 骤添 加 剂 红色血清生化血清采血后轻颠倒混匀2-3次静置1小时 离心 无（内壁硅化处理，防止血液附壁） 黄色快速血清生化 血清采血后立即颠倒混匀8次静置20分钟离心 分离胶、促凝剂（内壁硅化处理，防止血液附壁） 橙色快速血清生化血清采血后立即颠倒混匀 8次静置20分钟离心促凝剂：纤维蛋白酶（内壁硅化处理，防止血液附壁） 浅蓝色血凝试验血浆采血后立即颠倒混匀 8次离心抗凝剂：柠檬酸钠与血样比为1:9 灰色血糖试验血浆采血后立即颠倒混匀 8次离心抗凝剂：EDTA

13、，氟化钠 绿色血流变、血栓弹力图试验血浆采血后立即颠倒混匀 8次离心抗凝剂：肝素锂或肝素钠 浅绿色快速血浆生化试验血浆采血后立即颠倒混匀 8次离心肝素锂 紫色血常规 血型 糖化血红蛋白全血采血后立即颠倒混匀 8次试验前混匀标本抗凝剂：EDTA-2K或EDTA-3K 黑色血沉全血采血后立即颠倒混匀 8次使用前混匀标本抗凝剂：柠檬酸钠与血样比为1：4全国临床检验操作规程推荐多管血时采集顺序33WS-T 225-2002推荐多管血时采集顺序v特别注意特别注意:vEDTA管（紫）绝对不能放在管（紫）绝对不能放在血清管前血清管前，因其中，因其中的钾可能对血清造成污染，特别会使血钾增高。的钾可能对血清造成

14、污染，特别会使血钾增高。v采血管数较多时，凝血管先采十分必要，因为随采血管数较多时，凝血管先采十分必要，因为随着采血时间的延长，凝血因子会发生变化。着采血时间的延长，凝血因子会发生变化。口服葡萄糖耐量（OGTT）试验v早餐空腹取血（空腹早餐空腹取血（空腹8-12小时后），取血后于小时后），取血后于5分钟内服完溶于分钟内服完溶于250-300ml水内的无水葡萄糖水内的无水葡萄糖75gv实验过程中不喝任何饮料，不吸烟、不做剧烈运实验过程中不喝任何饮料，不吸烟、不做剧烈运动、无须卧床动、无须卧床v从口服第一口糖水记时，于服糖后从口服第一口糖水记时，于服糖后30分钟、分钟、1小小时、时、2小时及小时及

15、3小时取血标本小时取血标本v试验前试验前3日每日碳水化合物摄入量不少于日每日碳水化合物摄入量不少于150g（3两）两）v试验前停用影响试验前停用影响OGTT的药物，如避孕药、利尿的药物，如避孕药、利尿剂、剂、-肾上腺能阻滞剂、苯妥因钠、烟酸肾上腺能阻滞剂、苯妥因钠、烟酸3-7天，天，服用糖皮质激素者不做服用糖皮质激素者不做OGTT试验试验 v血脂类测定血脂类测定v要求患者素食三天，空腹抽血，抽血前要求患者素食三天，空腹抽血，抽血前24小时小时不要做剧烈运动及饮酒不要做剧烈运动及饮酒v内分泌系列检测内分泌系列检测v注意患者生理期的变化，避免情绪过分激动，抽注意患者生理期的变化，避免情绪过分激动，

16、抽血前应休息一段时间（一般约血前应休息一段时间（一般约20分钟）分钟）血培养381.采血时机采血时机寒战和发寒战和发热初期热初期使用抗菌使用抗菌药物前药物前停药停药6-86-8小小时后或下时后或下次用药前次用药前血血培培养养的的采采集？集？39Text1Text2Text3Text4Text52.采血流程采血流程皮肤消毒皮肤消毒保持手的卫生保持手的卫生准备血培养瓶准备血培养瓶抽取血标本抽取血标本血标本采集的血标本采集的量量402.采血流程采血流程（一） 在每个血培养瓶上都有表明液体容量的刻度，在容积刻度上标明采集血液应该达到的液面高度。 8-10ml412.采血流程采血流程（二） 培养瓶消毒7

17、5%酒精酒精消毒，消毒，待干待干60s勿用含碘的勿用含碘的消毒液消毒消毒液消毒422.采血流程采血流程（三） 皮肤消毒：从穿刺部位由内向外圆圈擦拭，直径1-2英寸5-10cm穿刺部位风干，不能再触摸穿刺部位风干，不能再触摸432.采血流程采血流程（四） 采集血培养标本1）采用真空采血装置能降 低污染(持针器+采血针）2）培养瓶放在采血部位旁 边，垂直放置。3）持针器套于培养瓶颈部，将另一头穿刺针刺入培养瓶。4）采集足够血量。442.采血流程采血流程（五） 血培养瓶轻轻颠倒混匀6-8次。452.采血流程采血流程（六） 标注两组信息病人条形码信息（采血时间和部位）瓶身的条形码揭一条贴于检测申请单上

18、4647假阳性：假阳性：污染率污染率3-5%严格无菌技术操严格无菌技术操作作存在问题？存在问题？解决办法？解决办法？假阴性：假阴性：采血适应症及时采血适应症及时机机48血培养假阳性的危害 1、增加患者抗生素用量，破坏其微生态环境 2、延长了住院天数 3、延误病情诊断 4、增加经济负担 防止皮肤寄生菌或环境微生物污染493.采血套数及采血间隔 CLSI要求每次采集2-3套标本 每套应包括一个需氧培养瓶,一个厌氧培养瓶 一个静脉穿刺点只能采集1套血培养 采集第2套血培养应该选择第2个静脉穿刺点503.采血套数及采血间隔 由于多数病例中，细菌和真菌均一过性存在于血液中,单次血培养检测的敏感性有限 取

19、两对以上血培养是必要的 污染通常只出现在一个血培养瓶中；对于真正的血流感染，多个血培养瓶都会呈阳性 51血培养套数与阳性检出率（）血培养套数与阳性检出率（）6565808096969999血培养套数与阳性检出率（）血培养套数与阳性检出率（）524.血培养采血量血培养采血量 对于成人，每瓶血培养需要对于成人，每瓶血培养需要8 8-10ml-10ml血液。血液。 对于儿童，每瓶需要对于儿童，每瓶需要2-4ml2-4ml血液。血液。 对于婴幼儿，采血量不应超过患儿总血量的对于婴幼儿，采血量不应超过患儿总血量的1%1% (1 (1- -2 2mlml) )534.血培养采血量 血标本采集的量是影响检出率的最重要的因素。 成人血培养采血量在230ml之间，病原菌检出率与采血量成正比例增长。 每增加1ml的血液，病原菌的检出率增加3.2% 儿童患者因为血液中病原菌浓度较高，血培养量无需等同于成人。 对血液病患者或者血容量相对较低的患者建议使用儿童瓶来