微生物学周德庆版课后答案

1、绪论 1.什么是微生物?它包括哪些类群? 答:微生物是一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称. 包括原核类的细菌放线菌蓝细菌支原体立克次氏体和衣原体;真核类的真菌原生动物和显微藻类,以及属于非细胞类的病毒和亚病毒. 2.微生物有哪五大共性？其中最基本的是哪一个？为什么？ 答：.体积小，面积大；.吸收多，转化快；.生长旺，繁殖快；.适应强，易变异；.分布广，种类多。其中，体积小面积大最基本，因为一个小体积大面积系统，必然有一个巨大的营养物质吸收面、代谢废物的排泄面和环境信息的交换面，并由此而产生其余 4 个共性。3. .试述微生物的多样性。 答：.物种的多样性，.生理代谢类型的多样性,.代谢产物

2、的多样性,遗传基因的多样性,生态类型的多样性.4. 什么是微生物学?学习微生物学的任务是什么? 答:微生物学是一门在细胞、分子或群体水平上研究微生物的形态构造、生理代谢、遗传变异、生态分布和分类进化等生命活动基本规律，并将其应用于工业发酵、医药卫生、生物工程和环境保护等实践领域的科学，其根本任务是发掘、利用、改善和保护有益微生物，控制、消灭或改造有害微生物，为人类社会的进步服务。5、巴斯德曲颈瓶实验说明了什么？1862年，巴斯德设计出一个巧妙的曲颈瓶试验。他给烧瓶安装了一像横着眼放的S形状的长颈，当把烧瓶中的肉汤煮沸时，不仅瓶中的微生物被杀死了，水蒸汽把瓶颈中的微生物也杀死了。等到汤放凉时，新

3、鲜的空气就可以通过瓶颈自由进到瓶子中，而带菌的灰尘由于比空气重，在长颈向下弯曲处就被拦截住了。经过这样处理的培养液放许多天也不会变质。而如果把培养液倾斜，让它通过长颈的弯曲部，或者把长颈打断，培养液中很快就会充满了微生物。这样就令人信服地证明了，是空气中的微生物使汤腐败的，而不是汤腐败产生微生物。6、科赫法则是什么1 在每一病例中都出现相同的微生物，且在健康者体内不存在；2 要从寄主分离出这样的微生物并在培养基中得到纯培养（pure culture）；3 这种微生物的纯培养接种健康而敏感的寄主，同样的疾病会重复发生； 4 试验发病的寄主中能再度分离培养出这种微生物来。第十章 微生物的分类和鉴定

4、1.微生物分类学有哪3项具体任务？分类（宏观的战略性工作）分类的任务是解决从个别到一般或从具体到抽象的问题，亦即通过收集大量描述有关个体的文献资料，经过科学的归纳和理性的思考，整理成一个科学的分类系统鉴定（微观的战术性工作）鉴定的任务与分类恰恰相反，它是一个从一般到特殊或从抽象到具体的过程，亦即通过详细观察和描述一个未知纯种微生物的各种性状特征，然后查找现成的分类系统，以达到对其知类、辨名的目的。命名（开拓性的创新工作）命名的任务是为一个新发现的微生物确定一个新学名，亦即当你详细观察和描述某一具体菌种后，经过认真查找现有的权威性分类鉴定手册，发现这是一个以往从未记载过的新种，这时，就得按微生物

5、的国际命名法规给予一个新学名。3. 什么是种？种：种是最基本的分类单位,它是一大群表型特征高度相似，亲缘关系极其相近，与同属内其它种有着明显差异的菌株的总称。4、双名法：指一个物种的学名由前面一个属名和后面一个种名加词两部分组成。学名=属名+种名加词+（首次定名人）+现名定个人+现名定各年份 排斜体字 排正体字（一般省略） 三名法：学名=属名+种名加词+符号subsp或var+亚种或变种的加词 排斜体 排正体（可省略） 排斜体（不可省略）5、菌株（品系）：表示任何由一个独立分离的单细胞繁殖而成的纯种群体极其一切后代；实际上是一个微生物达到遗传性纯的标志。一种微生物的每一不同来源的纯培养物或纯分

6、离物均可称为某菌种的一个菌株。克隆：若菌落是由一个单细胞发展而来的，则它就是一个纯种细胞群或克隆。菌落：在适宜的培养条件下，微生物在固体培养基表面（有时为内部）生长繁殖，形成以母细胞为中心的一堆肉眼可见的、有一定形态构造的子细胞集团，这就是菌落。菌苔：如果将某一纯种的大量细胞密集地接种到固体培养基表面，结果长成的各“菌落”互相连成一片，这就是菌苔。7.何谓三域学说？提出此学说的依据？20世纪70年代末由美国伊利诺斯大学的C.R.Woese等人对大量微生物和其他生物进行16S和18S  rRNA的寡聚核苷酸测序，并比较其同源性水平后，提出了一个与以往各种界级分类不同的新系统，

7、称为三域学说。三域指细菌域、古生菌域和真核生物域。对大量微生物和其他生物进行16S和18SrRNA的寡核苷酸测序，并比较其同源性水平第一章 原核生物的形态.构造和功能1试设计一张表格，比较以下6个大类原核生物的主要特性。2. G+和 G-细菌细胞壁的主要构造异同。 答： G+细菌与 G-细菌的细胞壁都含肽聚糖和磷壁酸；不同的是含量的区别：如下表3. 什么是缺壁细菌？ 4类缺壁细菌 答：在自然界长期进化中和实验室菌种的自发突变中都会产生少数缺细胞壁的种类，或是用人为的方法通过抑制新生细胞壁的合成或对现成细胞壁进行酶解而获得人工缺壁的细菌统称为缺壁细菌。L型细菌 （L-formofbacteria

8、）原生质体 （protoplast）球状体 (sphaeroplast) 支原体 (mycoplasma)4. 试述革兰氏染色法的机制并说明此法的重要性。革兰氏染色步骤。 答：革兰氏染色的机制为：通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细菌的细胞膜内可形成不溶于水的结晶紫与碘的复合物。G+由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次多和交联致密，故遇脱色剂乙醇处理时，因失水而使网孔缩小，在加上它不含类脂，故乙醇的处理不会溶出缝隙，因此能把结晶紫与碘的复合物牢牢留在壁内，使其保持紫色。反之，G-细菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄和交联度差，遇脱色剂乙醇后，以类脂为主的外膜迅速溶解，这时薄而松散的肽聚糖网不能

9、阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此细胞退成无色。这时，在经沙黄等红色染料复染，就使G-细菌呈红色，而 G+细菌则仍保留最初的紫色。 此法证明了 G+和 G-主要由于起细胞壁化学成分的差异而引起了物理特性的不同而使染色反应不同，是一种积极重要的鉴别染色法，不仅可以用与鉴别真细菌，也可鉴别古生菌。革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是： 1）涂片固定。 2）草酸铵结晶紫染1分钟。 3）自来水冲洗。 4）加碘液覆盖涂面染1分钟。 5）水洗，用吸水纸吸去水分。 6）加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，30秒后水洗，吸去水分。 7）蕃红梁色液（稀）染10秒钟后，自来水冲洗。

10、干燥，镜检。 染色的结果，革兰氏正反应菌体都呈紫色，负反应菌体都呈红色。5. 渗透调节皮层膨胀学说是如何解释芽孢耐热机制的？ 答：渗透调节皮层膨胀学说认为：芽孢的耐热性在于芽孢衣对多价阳离子和水分的透性很差 皮层的离子强度很高，从而使皮层产生极高的渗透压夺取芽孢核心的水分，结果造成皮层的充分膨胀。而核心部分的细胞质却变得高度失水，因此，具极强的耐热性。关键是芽孢有生命的部位即核心部位的含水量很稀少，为10%25%，因而特别有利于抗热。6细菌分类形态上的分类鉴定指标？个体：细胞形态 大小 排列 运动性 特殊构造 染色反应等群体：群体形态 在半固体或液体培养基中的生长状态7、 细菌的分裂方式有哪些

11、？裂殖：二分裂 三分裂 复分裂 芽殖 劈裂8、放线菌的结构和繁殖方式？放线菌菌丝可分为基内菌丝、气生菌丝和孢子丝三种。放线菌的繁殖方式：借孢子：分生孢子、孢囊孢子（无鞭毛、有鞭毛）借菌丝：基内菌丝断裂、任何菌丝片段9、荚膜的功能：（1）保护作用，其上大量极性集团可保护菌体免受干旱损伤；可防止噬菌体的吸附和裂解；一些动物致病菌的荚膜还可以保护他们免受宿主白细胞的吞噬。 （2）贮藏养料，以备营养缺乏是重新利用 （3）做为透性屏障和离子交换系统，以保护细菌免受重金属离子的毒害。（4）表面附着作用（5）细菌间的信息识别作用（6）堆积代谢废物10、蓝细菌的形态和繁殖方式：形态 ：1、又二分裂形成的单细胞

12、 2、又复分裂形成的单细胞 3、有异形胞形成的菌丝 4、无异形胞菌丝 5、分支状菌丝繁殖方式：一为营养繁殖，包括细胞直接分裂（即裂殖）、群体破裂和丝状体产生藻殖段等几种方法，另一种为某些蓝藻可产生内生孢子或外生孢子等，以进行无性生殖。孢子无鞭毛。11、异形孢的固氮防氧机制异形胞的体积较一般营养细胞大，细胞外有一层由糖脂组成的片层式较厚外膜，它具有阻止氧气进入细胞的屏障作用；异形胞内缺乏产氧光和系统加上脱氢酶和氧化酶的活性高，使异形胞能维持很强的还原态；其中超氧化物歧化酶的活性高，有解除氧毒害的功能；此外异形胞还有比邻近营养高细胞高出2倍的呼吸强度，借此可消耗过多的氧并产生对固氮必须的ATP。1

13、2、三体的概念和主要特征？支原体：一类无细胞壁、介于独立生活和细胞内寄生生活间的最小型原核生物特点：1、细胞很小，直径一般为150300nm，多数为250nm左右 2、细胞内含甾醇，比其他原核生物的膜要坚韧 3、因无细胞壁故成革兰氏阴性，形态易变，对渗透压敏感，对抑制细胞壁合成的抗生素不敏感 4、菌落小，在固体培养及表面呈特有的“油煎蛋”形状 5、以二分裂和出芽等方式繁殖 6、能在含血清、酵母膏和甾醇等营养丰富的培养基上生长 7、多数能以糖类作为能源，能在有氧或无氧的条件下进行氧化型或发酵型产能代谢； 8 基因组狠小，仅在0.61.1mb左右 9、对能抑制蛋白质合成的抗生素和破坏含甾体的细胞膜

14、结构的抗生素都很敏感立克次氏体：一类专性寄生于真核细胞内的革兰氏阴性原核生物特点：1、细胞很大，直径在0.30.6×0.82.0m 2、细胞形态多样，自然状，双球状、杆状至丝状等 3、有细胞壁，革兰氏阴性 4、除少数外，均在真核细胞内营细胞内专性寄生 5、以二分裂方式繁殖 6、对四环素和青霉素等抗生素敏感 7、存在不完整的产能代谢途径，不能利用葡萄糖或有机酸，只能利用谷氨酸和谷氨酰胺产能 8 基因组狠小 9、对热敏感，一般在56以上经30min即被杀死。 10、一般可培养在鸡胚、敏感动物或Hela细胞株（子宫颈癌细胞）的组织培养物上衣原体：一类在真核细胞内营专性能量寄生的小型革兰氏阴

15、性原核生物。特点：1、有细胞构造 2、细胞内同时含有RNA和DNA两种核酸 3、有细胞壁（但是缺少肽聚糖）革兰氏阴性 4、有核糖体 5、缺少产生能量的酶系，需严格细胞内寄生 6、以二分裂方式生殖 7、对抑制细菌的抗生素和药物敏感 8、只能用鸡胚卵黄囊膜、小白鼠腹腔或Hela细胞组织培养物等活体培养13、古细菌细胞壁上的差异 细胞壁是由假肽聚糖、糖蛋白、蛋白质 假肽聚糖：N-乙酰葡糖胺和N-乙酰塔罗糖胺糖醛酸构成 以-1，3-糖苷键交替连接而成连在后一氨基酸上的肽尾由L-Glu L-Ala L-Lys 三个L型氨基酸组成，肽桥则由L-Glu 1个氨基酸组成 第二章 真核微生物的形态.构造和功能1

16、. 什么是单细胞蛋白（SCP）？ 答：单细胞蛋白又叫微生物蛋白、菌体蛋白。按生产原料不同，可以分为石油蛋白、甲醇蛋白、甲烷蛋白等；按产生菌的种类不同，又可以分为细菌蛋白、真菌蛋白等 。2. 试简介菌丝，菌丝体，菌丝球，真酵母，假酵母，芽痕，蒂痕，真菌丝，假菌丝等名词答：菌丝：单条管状细丝，为大多数真菌的结构单位。由许多菌丝相互交织而成的一个菌丝集团称菌丝体。酵母菌中尚未发现其有性阶段的被称为假酵母，有的酵母菌子代细胞连在一起成为链状，称为假丝酵母。3. 霉菌的营养菌丝和气生菌丝各有何特点？它们分别可分化出哪些特化构造。 答：当其孢子落在固体培养基表面并发芽后，就不断伸长，分枝并以放射状 向内层

17、扩展，形成大量色浅，较细的具有吸收营养和排泄代谢废物功能的基内菌丝又称营养菌丝。同时在其上又不断向空间方向分化出颜色较深，直径较粗的分枝菌丝，叫气生菌丝。气生菌丝分化成孢子丝。6. 什么叫锁状联合？ 答：锁状联合即形成喙状突起而连合两个细胞的方式不断使双核细胞分裂，从而使菌丝尖端向前延伸。7. 试比较细菌，放线菌，酵母菌和霉菌细胞壁成分的异同，答：细菌细胞壁主要成分为肽聚糖，具有固定细胞外形和保护细胞不受损伤。 细菌原生质体的制备：溶菌酶（lysozyme） 、自溶酶（autolyticenzyme） 酵母菌细胞壁主要成分甘露聚糖（mannan）（外层）；蛋白质（protein） （中层）；葡

18、聚糖（glucan）（内层）类脂，几丁质4. 试列表比较各种真菌孢子的特点。 5. 细菌，放线菌，酵母菌和霉菌四类微生物的菌落有何不同？为什么？ 答：酵母菌菌落一般较细菌菌落大且厚，表面湿润，粘稠，易被挑起，多为乳白色，少数呈红色。霉菌菌落由粗而长的分枝状菌丝组成，菌落疏松，呈绒毛状、絮状或蜘蛛网状，比细菌菌落大几倍到几十倍，有的没有固定大小 放线菌菌落能产生大量分枝和气生菌丝的菌种（如链霉菌） 菌落质地致密，与培养基结合紧密，小而不蔓延，不易挑起或挑起后不易破碎。 不能产生大量菌丝体的菌种（如诺卡氏菌） 粘着力差，粉质，针挑起易粉碎 细菌的菌落一般呈现湿润，较光滑，较透明，较粘稠，易挑取，质

19、地均匀以及菌落正反面或边缘与中央部位的颜色一致。 细菌属单细胞生物，一个菌落内无数细胞并没有形态.功能上的分化，细胞间充满着毛细管状态的水。多数放线菌有基内和气生菌丝的分化，气生菌丝成熟时又会进一步分化成孢子丝并产生成串的干粉状孢子，它们伸展在空间，菌丝间没有毛细管水积存。酵母菌的细胞比细菌的大，细胞内有许多分化的细胞器，细胞间隙含水量相对较少，以及不能运动等特点。霉菌的细胞呈丝状，在固体培养基上生长时又有营养和气生菌丝的分化，气生菌丝间没毛细管水。8、试举例真菌都有那些无性孢子和有性孢子？真菌的主要无性孢子有芽孢子、粉孢子、后膜孢子、游动孢子和孢囊孢子及分生孢子。真菌的主要有性孢子有接合子、

20、卵孢子、接合孢子、子囊孢子、担子孢子。9、真核微生物有哪些类群？真核微生物：植物界：显微藻类 动物界：原生动物 菌物界：粘菌 假菌 真菌 （单细胞真菌酵母菌 丝状真菌霉菌 大型子实体真菌蕈菌）10、酵母菌的一般特点1、个体一般以单细胞状态存在 2 、多数营出芽生殖 裂殖：既有有性生殖又有无性生殖 3、能发酵糖类产能 4、细胞壁常含有甘露聚糖 5、常生活在含糖量较高、算独大的水生环境中11、酵母菌的繁殖方式及生活p495212、什么叫半知菌？半知菌是一群只有无性阶段或有性阶段未发现的真菌。它们当中大多属于子囊菌，有些属于担子菌，只是由于未观察到它们的有性阶段，无法确定分类地位，因此归于半知菌。第

21、三章 病毒和亚病毒什么是真病毒？什么叫亚病毒？ 真病毒是至少含有核酸和蛋白质两种组份的分子病原体。 亚病毒是凡在核酸和蛋白质两种成分中只含有其中之一病原体。2病毒的大小直径多数在100nm上下。最大的病毒是直径为200nm的牛痘苗病毒，最小病毒之一是脊髓灰质炎病毒，其直径仅为28nm。3.病毒粒有哪几种对称形式？ 有螺旋对称（TMV）、二十面体对称（腺病毒）、复合对称（T偶数噬菌体），每种对称形式又有有包膜和无包膜之分。4. 包涵体是指细菌表达的蛋白在细胞内凝集，形成无活性的固体颗粒。噬菌斑：噬菌体即细菌病毒侵染细菌细胞,导致寄主细胞溶解死亡.因而在琼脂培养基表面形成的空斑.枯斑：5.什么叫烈

22、性噬菌体？简述其裂解性生活史。 能在短时间内完成吸附、侵入、增殖、成熟和裂解5个阶段，而实现其繁殖的噬菌体成为烈性噬菌体。它的裂解生活史大致为：1 尾丝与宿主细胞特异性吸附 2 病毒核酸侵入宿主细胞内 3 病毒核酸和蛋白质在宿主细胞内的复制和合成4病毒核酸和蛋白质装配5 大量子代噬菌体裂解释放到宿主细胞外6.什么事效价？答： 效价表示每毫升试样中所含有的具有侵染性的噬菌体粒子数。7. 什么是一步生长曲线？它分几期？各期有何特点？ 定量描述烈性噬菌体生长规律的实验曲线，称为一步生长曲线。 它包括 1潜伏期：细胞内已经开始装配噬菌体粒子并可用电镜观察到 2裂解期：宿主细胞迅速裂解溶液中噬菌体粒子急

23、剧增多。 3平稳期：感染后的宿主细胞已全部裂解，溶液中的噬菌体效价达到最高点。8.解释溶源性、溶源菌、温和噬菌体。 温和噬菌体侵入相应宿主细胞后由于前者的基因组整合到后者的基因组上并随后者的复制而进行同步复制，因此温和噬菌体的这种侵入并不引起宿主细胞裂解，这就是溶源性。 溶源菌是一类能与温和噬菌体长期共存，一般不会出现有害影响的宿主细胞。 温和噬菌体是指不能完成复制循环具有溶源性不发生烈性裂解的噬菌体。前病毒：整合到细菌细胞染色体上的病毒称为“前病毒”或“前噬菌体”。溶源性循环:即整合到宿主的核基因组上，以前噬菌体形式长期潜伏。9. 什么的病毒多角体？它有何实际应用？ 多种昆虫病毒可在宿主细胞

24、内形成光镜下成多角形的包含体，称为多角体。 可以制作生物杀虫剂NPV 核型多角体病毒：一类在昆虫细胞核内增殖的、具有蛋白质包涵体的杆状病毒，数量最多CPV质型多角体病毒：一类在昆虫细胞质内增殖的、可形成蛋白质包涵体的球状病毒10. 什么是类病毒、拟病毒和朊病毒？ 类病毒是一类只含有RNA一种成分，专心寄生在活细胞内的分子病源体。 拟病毒是指一类包裹在真病毒粒中的有缺陷的类病毒。 沅病毒是一类不含核酸的传染性蛋白质分子。11、真病毒的典型结构核酸在中心，成为核心或基因组，蛋白质包围在核心周围，形成衣壳12、病毒的一般特征1、体积极其微小 2、没有细胞构造，主要成分仅为核酸和蛋白质两种，故又称为“

25、分子生物” 3、每一种病毒只含一种核酸，不是DNA就是RNA 4、既无产能酶系，也无蛋白质和核酸的合成酶系，只能利用宿主活细胞内现成的代谢系统合成自身的核算和蛋白质 5、一核算和蛋白质等“元件”的装配实现其大量繁殖 6、在离体条件下，能已无生命的生物大分子状态存在，并可长期保持其侵染活性 7、对一般抗生素不敏单，但对干扰素敏感 8、有些病毒的核酸还能整合到宿主的基因组中，并诱发潜伏性感染。9、严格寄生13植物病毒和昆虫病毒的代表植物：TMV 烟草花叶病毒昆虫：棉铃虫、粘虫和桑毛虫的核型多角病毒 质型多角病毒 颗粒体病毒14 HIV：人类免疫缺陷病毒 CPV：质型多角病毒 TMV：烟草花叶病毒

26、GV：颗粒体病毒 CaMV：甘蓝花叶病毒第四章 微生物的营养和培养基2、什么是氮源？试从元素水平、分子水平和培养基水平列出微生物的氮源谱。凡能提供微生物生长繁殖所需氮元素的营养源，称为氮源。微生物的氮源谱如下；类型元素水平化合物水平培养基原料水平有机氮N.C.H.O.X复杂蛋白质、核酸等牛肉膏、酵母膏、饼粕粉、蚕蛹粉等N.C.H.O尿素、一般氨基酸、简单蛋白质等尿素、蛋白胨、明胶等无机氮N.H氨、铵盐等硫酸铵等N.O硝酸盐等硝酸钾等N氮气空气1、什么叫碳源？试从元素水平、分子水平和培养基水平列出微生物的碳源谱。一切能满足微生物生长繁殖所需碳元素的营养物称为碳源。碳源谱见下图：类型元素水平化合物

27、水平培养基原料水平有机碳C.H.P.N.X复杂蛋白质、核酸等牛肉膏、蛋白胨、花生饼粉等C.H.O.N多数氨基酸、简单蛋白质等一般氨基酸、明胶等C.H.O糖、有机酸、醇、脂类等葡萄糖、蔗糖、各种淀粉、糖蜜等C.H烃类天然气、石油及其不同馏分、石蜡油无机碳CC.O二氧化碳二氧化碳C.O.X碳酸盐类碳酸氢钠、碳酸钙、白垩等3、什么是氨基酸自养微生物？ 不需要利用氨基酸做氮源，能把尿素、铵盐、硝酸盐、甚至氮气等简单氮源自行合成所需要的一切氨基酸，为氨基酸自养微生物。4营养类型分类:以能源分：化能营养型（自养和异养型） 光能营养型（自养和异养型）5.什么叫自养微生物?自养微生物：以无机碳源作主要碳源的微

28、生物。蓝细菌，藻类，硝化细菌等6. 、什么叫生长因子？它包括哪几类化合物？生长因子是一类调节微生物正常代谢所必需，但不能用简单的碳、氮源自行合成的有机物。广义的生长因子包括维生素、碱基、卟啉及其衍生物、甾醇、胺类、C4C6 的分支或直链脂肪酸，有时还包括氨基酸营养缺陷突变株所需要的氨基酸在内，而狭义的生长因子一般仅指维生素。7、什么叫单功能营养物、双功能营养物和多功能营养物？各举一例说明。 只具有一种营养功能的营养物称为单功能营养物，如光辐射能源；同时具有两种营养功能的称为双功能营养物，如铵根离子；同时具有三种营养功能的营养物称为三功能营养物，如氨基酸。8. 、什么是选择培养基？试举一例并分析

29、其原理。 选择培养基是一类根据某微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基，具有使混合菌样中的劣势菌变成优势菌的功能，广泛用于菌种筛选等领域。如酵母富集培养基中的孟加拉红抑制细菌的生长而对酵母菌无影响，偏酸性的环境有利于酵母菌的生长。9、什么是鉴别培养基？试以 EMB为例，分析其鉴别作用原理。 鉴别培养基是一类在成分中加有能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂，从而达到只须用肉眼鉴别颜色就能方便地从近似菌落中找到目的菌菌落的培养基。EMB 培养基中的伊红和美蓝可抑制革兰氏阳性菌和一些难养的革兰氏阴性菌。产酸菌由于产酸能力不同，菌体表面带质子，与伊红美蓝结合从而有不同的

30、颜色反应，可用肉眼直接判断。10. 培养基中各营养要素的含量间一般遵循何种顺序？试言之。 在大多数化能异养微生物培养基中，除水分外，碳源含量最高，其后依次是氮源、大量元素和生长因子，它们间大体存在着十倍序列的递减趋势。11、什么叫碳氮比？试对5种分子式清楚的常用氮源按其含氮量的高低排一个顺序。 碳源与氮源含量之比即为碳氮比 氨气尿素硝酸铵碳酸铵硫酸铵12、选择和设计培养基是应遵循的原则和方法原则：目的明确 营养协调 理化适宜 经济节约方法：生态模拟 参阅文献 精心设计 试验比较13、培养细菌 放线菌 霉菌的培养基（没找到）细菌：牛肉膏蛋白胨培养基14、简述培养基类型：按对培养基成分的了解分类：

31、天然培养基 组合培养基 半组合培养基按培养基外观的的物理状态：液体培养基 固体培养基（固化培养基 非可逆性固化培养基 天然固态培养基 滤膜） 半固体培养基 脱水培养基按培养基对微生物功能分类：选择性培养基 鉴别性培养基 第五章微生物的新陈代谢1、新陈代谢：简称代谢，是推动生物一切生命活动的动力源，通常泛指发生在活细胞中的各种分解代谢和合成代谢的总和。2、试述EMP途径在微生物生命活动中的重要性？ 供应ATP形式的能量和NADH2形式的还原力 是连接其他几个重要代谢途径的桥梁，包括三羧酸循环（TCA）.HMP途径和ED途径等 为生物合成提供多种中间代谢物； 通过逆向反应可进行多糖合成3、试述HM

32、P途径在微生物生命活动中的重要性？ 供应合成原料：为核酸、核苷酸、NAD(P)+、FAD(FMN)和CoA等的生物合成提供戊糖-磷酸；途径中的赤藓糖-4-磷酸是合成芳香族、杂环族氨基酸（苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸和组氨酸）的原料。 产还原力：产生大量NADPH2形式的还原力，不仅可供脂肪酸、固醇等生物合成之需，还可供通过呼吸链产生大量能量之需。 作为固定CO2的中介：是光能自养微生物和化能自养微生物固定CO2的重要中介。 扩大碳源利用范围：为微生物利用C3C7多种碳源提供了必要的代谢途径。 连接EMP途径：通过与EMP途径的连接，可为生物合成提供更多的戊糖。4、试述TCA循环在微生物产能和发酵生

33、产中的重要性。 TCA位于一切分解代谢和合成代谢中的枢纽地位，产能效率极高，不仅可为微生物的生物合成提供各种碳架原料，而且还与人类的发酵生产紧密相关。5、无氧呼吸（厌氧呼吸）：指一类呼吸链末端的氢受体为外源无机氧化物（少数为有机氧化物）的生物氧化。6.试比较呼吸、无氧呼吸、发酵的异同点。产能呼吸无氧呼吸环境条件有氧无氧无氧终电子受体来源环境，外源性环境，外源性胞内、内源性性质分子氧化合物（通常为无机物）代谢中间物能进行代谢产能方式的微生物专性好氧微生物、兼性好氧微生物、微嗜氧微生物专性厌氧微生物、兼性好氧微生物兼性好氧微生物、耐氧厌氧微生物、专性厌氧微生物6、发酵 广义：泛指任何利用

34、好氧性或厌氧性微生物来生产有用代谢产物或食品、饮料的一类生产方式。狭义：指在无氧等外源氢受体的条件下，底物脱氢后所产生的还原力H未经呼吸链传递而直接交某一内源性中间代谢物接受，以实现底物水平磷酸化产能的一类生物氧化反应。7、丙酮酸出发的6种发酵类型及其各自的发酵产物见书114页表8、V.P.实验原理：E.aerogenes（产气肠杆菌）能产生3-羟基丁酮（乙酰甲基甲醇），它在碱性条件下可被氧化成二乙酰，若用有胍基的精氨酸与二乙酰反应，就可产生特征性的红色反应（即V.P.阳性），而与E.aerogenes近缘的E.coli呈V.P.阴性，故极易区别两菌。9、异型和同型乳糖发酵比较见书上116页表

35、10、细菌的酒精发酵途径如何？它与酵母菌的酒精发酵有何不同？细菌的酒精发酵有何优缺点？细菌的酒精发酵途径ED, 酵母菌的酒精发酵EMP a.优点：代谢速率高；产物转化率高；菌体生成少；代谢副产物少；发酵温度高；不必定期供氧；细菌为原核生物，易于用基因工程改造菌种；厌氧发酵，设备简单。b.缺点：生长pH为5，较易染菌；细菌耐乙醇力较酵母菌为低（细菌7%乙醇，酵母菌耐8-10%乙醇）；底物范围窄（葡萄糖、果糖）。  11、Sticklandf反应：以一种氨基酸作底物脱氢（即氢供体），而以另一种氨基酸作氢受体而实现生物氧化产能的独特发酵类型12、循环光合磷酸化：一种存在于光合细菌

36、中原始光合作用机制，因可在光能驱动下通过电子的循环式传递而完成磷酸化产能反应，故名。非循环光合磷酸化：是各种绿色植物，藻类和蓝细菌所共有的利用光能产生ATP的磷酸化反应。13、CO2固定途径：Calvin循环；厌氧乙酰-CoA途径；逆向TCA循环途径和羟基丙酸途径14、什么是生物固氮作用？能固氮的微生物有哪几类？生物固氮：指大气中的分子氮通过微生物固氮酶的催化而还原成氨的过程，生物界中只有原核生物才具有固氮能力。134页分类：自生固氮菌 生物固氮反应6要素：1ATP的供应 共生固氮菌 2.还原力H及其传递载体 联合固氮菌 3.固氮酶 4.还原底物N2 5.镁离子 6.严格的厌氧微生物环境15固

37、氮酶：固氮酶是一种复合蛋白，由固二氮酶和固二氮酶还原酶两种相互分离的蛋白质构成。16、测定固氮酶活力的方法：粗放的微量克氏定氮法和烦琐的同位素法。乙炔还原法17、好氧性自生固氮菌的抗氧保护机制：呼吸保护 指固氮菌科的菌种能以极强的呼吸作用迅速将周围环境中的氧消耗掉，使细胞周围微环境处于低氧状态，借此保护固氮酶； 构象保护 在高氧分压条件下，Azotobacter vinelandii（维涅兰德固氮菌）和A. chroococcum（褐球固氮菌）等的固氮酶能形成一个无固氮活性但能防止氧害的特殊构象，称为构象保护。18、次生代谢：；微生物在一定的生长期里合成的一些对微生物本身无明显作用的物质代谢

38、19、异形胞（heterocyst）某些丝状蓝藻所特有地变态营养细胞,是一种缺乏光合结构、通常比普通营养细胞大地厚壁特化细胞。 类菌体（bacteroids）：根瘤菌进入宿主根部皮层细胞后，分化成膨大、形状各异、无繁殖能力、具有很强固氮活性的细胞，称类菌体。豆血红蛋白：豆科植物根瘤中的血红蛋白，亦称为根瘤血红蛋白。它是一种红色的含铁蛋白，在根瘤菌和豆科植物两者共生时，由双方诱导合成。第六章微生物的生长及其控制1. 名词解释生长：分个体生长和群体生长两类，个体生长指微生物细胞因同化作用超过异化作用的速度，造成原生质总量不断增长的现象；群体生长是指某一微生物群体中因个体的生长、繁殖而导致该群体的总

39、重量、体积、个体浓度增长的现象。 繁殖：在各种细胞组份呈平衡增长的情况下，个体的体积或重量达到某一限度时，通过细胞分裂，引起个体数目增加的现象。 菌落形成单位（cfu） ：用平板菌落计数法对活菌进行计数十的计数单位。对充分分散、稀释度合适的单细胞微生物来说， 一个菌落形成单位表示样品中有一个活细胞， 但对成团或成链状或丝状生长的微生物来说，菌落形成单位值并非一个活细胞。 同步生长：是通过获得同步培养物的手段。使微生物细胞群体内的各个个体都处于同一细胞分裂周期的特殊生长状态。恒化器：通过保持有一种生长限制因子的培养液的流速不变，可使微生物始终处在低于其最高生长速率的条件下进行生长繁殖的连续培养器

40、。 连续发酵：当微生物以单批培养的方式培养到指数期后期时一方面以一定速度连续流入新鲜培养基和通入无菌空气并立即搅拌均匀，另一方面利用溢流的方式以同样的流速不断流出培养物的培养方法。 最适生长温度：某菌分裂代时最短或生长速率最高时的培养温度。耐氧菌：是一类可在有氧条件下正常生长却不需要氧而仅借发酵和底物水平磷酸化产能的微生物。巴氏消毒法：是由巴斯德发明的一种低温湿热灭菌法，一般在 6085下处理 30min至1.5s，主要用于牛奶、果酒等液态风味食品的消毒。间歇灭菌法：一种适用于不耐热培养基的灭菌方法。一般将培养基放在 100蒸煮 15min，然后置 37下过夜（诱使残留芽孢发芽），次日再重复蒸

41、煮、过夜，如此重复 3d即可。石炭酸系数：在一定时间内，某化学药剂能杀死全部供试菌的最高稀释度与达到同效的石炭酸（苯酚）的最高稀释度之比，称为石炭酸系数。一般规定处理时间为 10min，供试菌为伤寒沙门氏菌。（抗生素）效价：效价表示抗生素抑菌强度的名词，其计量一般用“单位”表示。除青霉素外，一般每毫克抗生素纯品相当于1000单位。2.什么叫典型生长曲线？它可分几期？划分的依据是什么？各期特征？定量描述液体培养基中，微生物群体生长规律的实验曲线，称为生长曲线。 分为延滞期、指数期、稳定期和衰亡期。 根据它们每小时分裂次数的不同。延滞期：（1）生长速率常数为 0（2）细胞形态变大或增长(3)细胞内

42、的 RNA 尤其是 rRNA 含量增高，原生质呈嗜碱性(4)合成代谢旺盛(5)对外界不良条件如 NaC1溶液浓度、温度和抗生素等理、化因素反应敏感。指数期：1生长速率常数最大2细胞进行平衡成长3酶系活跃，代谢旺盛稳定期：a.生长速率常数为零；b.菌体产量达到最高；c.活菌数相对稳定；d.细胞开始贮存贮藏物；e.芽孢在这个时期形成；f.有些微生物在此时形成次生代谢产物。衰亡期：a.细胞形态多样；b.出现细胞自溶现象；c.有次生代谢产物的形成；d.芽孢在此时释放。 3生长速率常数（R）即每小时分裂次数代时（G）细胞每分裂一次所需要的时间4.什么叫连续培养？有何优点？连续培养：指微生物接种

43、到培养基里以后的整个生长期间，微生物能持续地以比较恒定的生长速率常数进行生长，从而导致微生物的生长过程能“不断”地进行下去的一种培养方法。优点：（1）高效 2 自控 3产品质量较稳定 4 节约了大量动力人力水和蒸汽，且使水气电的负荷均衡合理5.目前，一般认为氧对厌氧菌毒害的机制是什么？ 氧分子形成超痒化物阴离子自由基， 超痒化物阴离子自由基因为有基数电子故带负电荷， 它既有分子性质，又有离子性质，其性质极不稳定，化学反应能力极强，在细胞内可破坏各种重要生物大分子和膜结构，还可形成其他活性氧化物，故对生物体的毒害非常大。厌氧菌不能合成 SOD不能使超氧阴离子自由基歧化成过氧化氢，因此在氧存在时超

44、痒化物阴离子自由基使厌氧菌受到毒害。耐氧的机制是细胞内存在SOD和过氧化物酶（但缺乏过氧化氢酶）6.微生物培养过程中pH变化的规律如何？如何调整？ 升高或降低 微生物的生命活动过程中会自动地改变外界环境的pH，其中发生pH改变有变酸和变碱两种过程，在一般微生物的培养中往往以变酸占优势，因此，随着培养时间延长，培养基的pH会逐渐下降。的变化还与培养基的组分尤其是碳氮比有很大关系，碳氮比高的培养基经培养后pH会明显下降；相反，碳氮比低的培养基经培养后，其pH常会明显上升。加入生理酸性盐或生理碱性盐，作为其培养基成分PH调节 治标 过酸时 ：加氢氧化钠、碳酸钠等碱液中和 过碱时： 加硫酸，

45、盐酸等酸液中和 治本 过酸时： 加适当氮源：加尿素，硝酸钠氢氧化铵或蛋白质等 提高通气量释放CO2 过碱时： 加适当碳源：加糖，乳酸，醋酸，柠檬酸或油脂等 降低通气量7.试比较灭菌、消毒、防腐和化疗的异同。 灭菌是指采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施。 消毒是指采用较温和的理化因素，仅杀死物体表面或内部一部分对人体或动、植物有害的病原菌而对被消毒对象基本无害的措施。 防腐是指利用某种理化因素完全抑制霉腐微生物的生长繁殖的措施。 化疗是指利用对病原菌具有高度毒力而对其宿主基本无毒的化学物质来抑制宿主体体内病原微生物的生长繁殖，借以达到治疗该宿主传染病的一种

46、措施。 灭菌完全杀死微生物，而其它方法则是抑制微生物的生长繁殖。8利用加压蒸汽对培养基进行灭菌时，常易带来哪些不利影响？如何避免？在加压蒸汽灭菌的同时，高温，尤其是长时间的高温除对培养基中淀粉处女股份有促进糊化和水解等有利影响外,一般会对培养基的成分带来很多不利的影响高温的有害影响 形成沉淀物； 破坏营养，提高色泽； 改变培养基的PH； 降低培养基浓度防止法：1 采用特殊加热灭菌法 2 过滤除菌法 3 其他方法如消毒防腐剂9.影响湿热灭菌效果的主要因素有哪些？在实践中应如何正确对待？ 1.灭菌物体含菌量越高需要灭菌的时间越2 各类空气排出程度，空气要全部排尽 3灭菌对象PH，PH<6.0

47、微生物已死亡 PH 在 6.0-8.0 之间微生物不会死亡 4 灭菌对象的体积，大容积培养基灭菌时必须延长灭菌时间 5加热与散热速度，会影响培养基成分的破坏程度，应适当控制。10抗菌谱：各种抗生素有其不同的制菌范围，此即抗菌谱。例如青霉素和红霉素主要抗G+细菌;链霉素和新霉素以抗G-细菌为主，也抗结核分枝杆菌；庆大霉素，万古霉素和头孢霉素兼抗G+和G-细菌；而氯霉素，四环素，金霉素和土霉素等因能同时抗G+G-细菌以及立克次氏体和衣原体故称广谱型抗生素；放线菌酮，两性霉素B，灰黄霉素和制霉菌素对真菌有抑制作用11什么叫抗药性？其产生途径有哪些？抗药性又称耐药性。生物（尤指病原微生物）对抗生素等药

48、物产生的耐受和抵抗能力。抗药性主要通过遗传途径产生，例如基因突变，遗传重组或质粒转移等产生原因：1 产生一种能使药物失去活性的酶2 把药物作用的靶位加以修饰和改变3 形成救护途径4 使药物不能透过细胞膜5 通过主动外排系统吧进入细胞内的药物泵出细胞外6 缺乏某类药物作用的结构12半致死量：是评定某药物毒性强弱的指标，之在一定条件下，某化学药剂能杀死50%试验动物时的剂量。13根据微生物与氧关系分几类？专性好氧菌，兼性厌氧菌，微好氧菌，耐氧菌和厌氧菌表面消毒剂：是指对一切活细胞都有毒性，不能作用活细胞或机体内治疗用的化学药剂。举例：石炭酸化学治疗剂：用于化学治疗目的的化学物质 举例：磺胺类第七章

49、微生物的遗传变异和育种1.名词解释 遗传型：又称基因型，指某一生物个体所含有的全部遗传因子即基因组所携带的遗传信息。 表型 ：特定环境中生物体表现出的种种形态与生理特征。 变异：指生物体在某种外因或内因的作用下所引起的遗传物质结构或数量的改变，即遗传型的改变。 饰变：指外表的修饰性改变，即一种不涉及遗传物质结构改变而只发生在转录、转译水平上的表型改变。突变率：突变率是指一个细胞在一个分裂世代中发生突变的可能机率。染色体畸变：是指 DNA的大段变化(损伤)现象，表现为染色体的添加(即插入)、缺失、易位和倒位。转座因子：凡具有转座作用的一段DNA序列，称转座因子。光复活作用：把经UV照射后的微生物

50、立即暴露于可见光下时，就可出现明显降低其死亡率的现象，此即光复活作用。诱变剂：凡是能引起生物体遗传物质发生突然或根本的改变，使其基因突变或染色体畸变达到自然水平以上的物质，统称为诱变剂。营养型缺陷：野生型菌株经诱变剂处理后，由于发生了丧失某酶合成能力的突变，因而只能在加有该酶合成产物的培养基中才能生长的突变菌株。野生型 ：指从自然界分离到的任何微生物在其发生人为营养缺陷突变前的原始菌株。原养型 ：一般指营养缺陷型突变株经回复突变或重组后产生的菌株。基本培养基 ：仅能满足某些微生物的野生型菌株生长所需要的最低成分的组合培养基完全培养基 ：凡满足一切营养缺陷型菌株营养需要的天然或半组合培养基。补充

51、培养基 ：凡只能满足相应的营养缺陷型突变株生长需要组合或半组合培养基。感受态是指受体细胞最易接受外源DNA片段并能实现转化的一种生理状态。 转导 ：通过完全缺陷或部分缺陷噬菌体的媒介，把供体细胞的 DNA 小片段携带到受体细胞中，通过交换与整合，从而使后者获得前者部分遗传性状的现象。转化 ：受体菌直接吸收了来自供体菌的 DNA 片段，通过交换与整合，从而获得部分新 的遗传性状的现象。转染：指用提纯的病毒核酸去感染其宿主细胞或其原生质体，可增殖出一群正常病毒后代的现象。溶源转变：当正常的温和噬菌体感染其宿主而使其发生溶源化时，因噬菌体基因整合到宿主的核基因组上，而使宿主获得了除免疫性外的新遗传性

52、状的现象，称溶源转变。接合 ：供体菌通过性菌毛与受体菌直接接触，把 F 质粒或其携带的不同长度的核基因组片段传递给后者，使后者获得若干新遗传性状的现象。性导：细菌细胞在接合时，携带的外源DNA整合到细菌染色体上的过程。衰退：是指由于自发突变的结果，而使某物种原有一系列生物学性状发生量变或质变的现象。复壮： 狭义的复壮:是在菌种已发生衰退的情况下，通过纯种分离和 测定生产性能等方法，从衰退的群体中找出尚未衰退的个体，以达到恢复该菌原有性状的一种措施；广义的复壮:指在菌种的生产性能尚未衰退前，有意识地进行纯种分离和生产性能的测定工作，以期菌种的生产性能逐步有所提高。 2.微生物遗传物质存

53、在7个水平：细胞水平、细胞核水平、染色体水平、核算水平、基因水平、密码子水平、核苷酸水平3、什么是质粒？它有哪些特点？主要质粒有几类？凡游离于原核生物核基因组以外，具有独立复制能力的小型共价闭合环状的dsDNA分子，即cccDNA就是典型的质粒。质粒具有许多有利于基因工程操作的优点：1） 体积小，便于DNA的分离和操作；2） 呈环状，使其在化学分离过程中能保持性能稳定；3） 有不受核基因组控制的独立复制起始点；4） 拷贝数多，使外源DNA可很快扩增；5） 存在抗药性基因等选择性标记，便于含质粒克隆的检出和选择。质粒种类1） 结合性质粒：例如E.coli的F质粒 决定性别并有转移能力2） 抗药性

54、质粒（抗各种抗生素，抗重金属等离子）：例如R质粒3） 产细菌素和抗生素质粒：例如Col质粒（大肠杆菌素质粒）4） 具生理功能的质粒：例如Ri质粒（侵染双子叶植物的根部，整合到宿主的核基因组中，生出可再生新植株的毛状根）；mega质粒（巨大质粒 其上有一系列与共生固氮相关的基因）；降解性质粒。5） 产毒质粒：例如Ti质粒（诱癌质粒）4、诱变育种的基本环节有哪些？关键是什么?诱变育种几个原则和基本策略基本环节课本214页基本环节：诱变存活率突变率正变率高产率投产率原则：1.选择简便有效的诱变剂2.挑选优良的出发菌株3.处理单细胞或单孢子悬液4.选用最适的诱变剂量5.充分利用复合处理的协同效应6.利用和创造形态、生理与产量间的相关指标7.设计高效筛选方案8.创造新型筛选方法5、.什么是F质粒？ F质粒是存在于细菌染色体外或附加于染色体上控制性接合的物质。 由共价闭合环状双螺旋 DNA分子构成。分子量较染色体小。它的消失不影响细菌的生存。5.原生质体融合：通过人为的方法，使遗传性状不同的两个细胞的原生质体进行融合，借以获得兼有双亲遗传性状的稳定重组子的过程，称为原生质体融合。6、准性生殖：是一种类似于有性生殖，但比它更为原始的两性生殖方式，这是一种在同种而不同菌株的体细胞间发生的融合，它可不借减数分裂而导致低频率基因重组并发生重组子。7