生态养殖与病害防治

1、2008年春节前后寒、雪灾造成死鱼类、伤鱼：对病原 阻断释放：携带入境 封闭暴露：寄生虫生活历史 隔离：发病对宿主 增强免疫力 伤后修复伤后修复人健康 身体 精神鱼健康 机体 品质类型大生态：海洋、江河、湖泊小生态：水库、池塘人工生态：工厂化设施诱发疾病l水生态因子调查分析结论水生态因子调查分析结论 鳜鱼对溶氧变化敏感, 池塘中对鳜鱼有毒性作用的氨氮的相关因子总铵氮与溶氧存在非线性相关，溶氧量又随藻类种群、数量的变化而波动，后者则受水中营养盐浓度、气候变化所影响。 大量的观察数据反复证明了，低溶氧是诱发鳜鱼病的首要水化因子，气候突变往往成为水生态平衡破坏的诱因。气候突变降温降水藻类种群变化营养

2、盐浓度低溶氧池塘藻相水色藻类种群组成与数量平衡控制 养殖容量 品种结构 投入品品质 生态变迁养殖规划 投入、资源利用定位与模式选择，如： 高值鱼捕捞 鳜鱼养殖/鳜鱼饵料鱼养殖 精养、混养、工厂化资源条件 环境、地质、水源 物种养殖资源 海区、河流、湖泊、水库、池塘、设施 池塘内部各种生物之间的生态关系池塘内部各种生物之间的生态关系营养输入营养输入饲料、饵料饲料、饵料 鱼鱼 类类微微 生生 物物底栖动物底栖动物浮游植物浮游植物光能输入光能输入浮游动物浮游动物底栖微生物底栖微生物珠江三角洲万亩鱼塘高产养殖技术珠江三角洲万亩鱼塘高产养殖技术池塘生态、综合养殖模式禽、鱼综合养殖禽、鱼综合养殖 模式模式

3、稻田养殖稻田养殖 河蟹生态养殖河蟹生态养殖（） 桑基、蔗基鱼塘桑基、蔗基鱼塘 生物链有机生态养殖模式的研究生物链有机生态养殖模式的研究净化净化净化鱼菜 共生杂食性鱼类鱼类爬行类甲壳类有机饲料有机饲料吃食性鱼类饵料生物粪肥系统内系统间饵料生物鱼 类植物滤食性鱼类蔬菜、花卉滤食性鱼类净化水生植物净化 提出“生物链有机生态养殖”的创新理念，旨在于养殖区域内以养殖为主，结合种植，充分利用太阳能和食物链关系，以循环利用为宗旨，养殖系统内无人工合成物投入，最终达到“立体种养，循环利用和优质安全”的目的。超高密度养殖塘微生物水处理水泵植物水处理物理水处理一年不用换水一年不用换水种群结构与分布种群结构与分布理

4、化参数理化参数生物结构生物结构植物浮游生物底栖生物有机碎屑生产力生产力生态监控生态监控湖泊水库增养殖模式湖泊水库增养殖模式池塘生态养殖模式池塘生态养殖模式投入品投入品 养殖容量 品种结构 投入品品质 生态变迁我国湖泊富营养化严重我国湖泊富营养化严重出现“水华”的湖泊中营养中营养69中营养中营养35中营养中营养15贫营养贫营养4贫营养贫营养4贫营养贫营养07070年代后期年代后期富营养富营养278080年代后期年代后期富营养富营养619090年代后期年代后期富营养富营养85虾苗数量经济效益养殖密度限制点(生长抑制、病害多)容量：虾饲料投入经济效益饲料投入 限制点（资源利用、环境质量）容量：配合饲

5、料普及率配合饲料普及率不足不足30%2640万吨11201320万吨70%以上来自饲料原料以上来自饲料原料及天然小杂鱼及天然小杂鱼2.14.11.51.81.01.3饲料系数饲料系数中国多数中国多数品种品种中国部分中国部分品种品种日本、挪威日本、挪威、美国等、美国等水产饲料水产饲料饲料转化率饲料转化率 20-30%品质：饲料蛋白质含量污染率100% 75% 50% 25% 0510152520饲料蛋白降低百分点每降低1蛋白质含量，降低污染率4。池塘有机碳流向池塘有机碳流向饵料100%养殖系统养殖系统进入环境85%(P)78%, 75%, 76%(H)76%(G)收获21.5%(P)21%, 2

6、2%, 22%(H)23%(G)溶解性碳58%, 11%(H)69%(G)有机碳(沉淀)25%, 66%(H)7%(G)P-Penczak et al. 1982；H-Hall et al. 1989； G-Gowen et al. 1988新池塘清泥清泥底质修复底质修复底质修复底质修复底质修复底质修复彻底清泥连作障碍，池塘生态漂移连作障碍，池塘生态漂移化学组成漂移、生物种群漂移化学组成漂移、生物种群漂移老塘最佳新塘大黄鱼种质衰退大黄鱼种质衰退 自20世纪80年代7尾的后代流传至今。 培苗量2000尾/M3 1-2万尾/M3 ，养殖过程大批量死亡。福建宁德三都湾大黄鱼养殖基地福建宁德三都湾大黄

7、鱼养殖基地患病案例机理机理：种质退化、环境恶化江苏：“野生甲鱼”生态型、四年上市、价格翻倍河蟹生态养殖微生物的应用时间（年）投入品量投入品量产品品质产品品质微生物微生物 河蟹生态养殖河蟹生态养殖水下森林：水草、镙、微生物河蟹河蟹药物药物广东：广东： 凡纳对虾与沙蚕、鰕虎鱼混养模式凡纳对虾与沙蚕、鰕虎鱼混养模式 虾 沙蚕 (纳水进沙蚕苗 主食底栖硅藻和有机碎屑) 鰕虎鱼 (清理病虾弱虾) 生态效益好，综合效益高湖泊渔业活动对主要经济类群的定量预测湖泊渔业活动对主要经济类群的定量预测2084610years3.02.01.00.00.01.02.03.0上层小型鱼类上层小型鱼类其它小型鱼类其它小型

8、鱼类红鳍原鲌红鳍原鲌黄颡鱼黄颡鱼沉水植物沉水植物底栖动物底栖动物虾虾鲫鲫乌鳢乌鳢鲌类鲌类鳜鳜B/B0F(F(总总) )捕捞捕捞强度强度降至降至一半一半2084610years1.51.00.50.00.01.02.03.0乌鳢乌鳢鳜鳜虾虾鲌类底栖动物底栖动物上层小型鱼类上层小型鱼类沉水植物沉水植物其它小型鱼类其它小型鱼类红鳍原鲌红鳍原鲌黄颡鱼黄颡鱼鲫鲫F( (总总) )B/B0捕捞捕捞强度强度升至升至二倍二倍湖泊鳜鱼放流增殖技术及渔业管理模型选择优质鳜鱼种质选择优质鳜鱼种质 逐步增加投放鳜鱼苗种逐步增加投放鳜鱼苗种选择适宜的放苗地点选择适宜的放苗地点 增加鳜鱼捕捞强度增加鳜鱼捕捞强度饵料生物量

9、放养鳜鱼种群动态湖泊渔业管理模型湖泊鳜鱼放流增殖技术湖泊鳜鱼放流增殖技术一年不用换水一年不用换水循环净化循环净化水族常见现象：水族常见现象： 加入新种的不适 草黄、烂 饲料引起水、浑黄能量流能量流微生物的净化微生物的净化养殖模式养殖模式 主要养虾模式（主要养虾模式（4 4种类型，种类型，1212种养虾模式）种养虾模式）（一）粗养类型（一）粗养类型原始生态养殖模式：仅利用闸门纳苗，蓄养一段时间后收获。改良式粗养：在港塭边缘建小面积的池塘，鱼、虾苗经过中间培育后，再放入港塭中。（二）半精养类型（二）半精养类型普通虾池精养模式对虾与青蟹混养模式对虾与鱼、贝、藻类混养模式分段过池养虾模式铺地膜养虾模式

10、半封闭式引淡的养虾模式 虾池在放苗前进满水，以后就很少进海水，取淡水进池，可减少海水病原感染，有利于对虾生长。（三）精养类型（三）精养类型普通高位池养虾 底部铺农用薄膜，有利于池底清污，有利于晒池，便于杀除病原。多级高位池养虾模式 分级饲养 循环水生态精养虾模式 虾池 吸污 水沟 沉淀池 水生生物沟 过滤池 微生态制剂池 虾池（四）工厂化养殖（四）工厂化养殖对虾种类：对虾种类：凡纳对虾凡纳对虾斑节对虾日本对虾长毛对虾墨吉对虾刀额新对虾近缘新对虾 有益微生物对养虾池浮游微藻种群演变的影响有益微生物对养虾池浮游微藻种群演变的影响 李卓佳等 斑节对虾养殖过程水体中浮游微藻的种群更替斑节对虾养殖过程水

11、体中浮游微藻的种群更替：浮游微藻的优势种群为硅藻，养殖中期可更替为绿藻；未施放细菌的虾塘在后期蓝藻种群大量繁殖，成为养殖水体优势种群。池池 塘塘 施施 肥肥v化学肥料化学肥料磷磷：过磷酸钙、三倍过磷酸钙、磷酸氢钙、磷酸二氢钙、磷酸氢二氨、磷酸二氢氨、工业磷酸、磷酸复合肥、偏磷酸钙。氮：氮：尿素、硝酸钙、硝酸钠、硝酸铵、硝酸钾、硫酸铵、氨水。钾钾：氯化钾、硝酸钾、硫酸钾。v次要和微量元素次要和微量元素：镁、铁、锰、硅、硼、钼、钴、铜、锌等。池塘肥水按水华类型分类池塘肥水按水华类型分类水华质量水华类型优势种属水色及水华性状透明度出现时间一等水(好水)1.鱼腥藻型螺旋鱼腥藻、拟鱼腥藻深绿或蓝绿溶液状

12、，下风呈膜状2040夏、秋2.隐藻型隐藻、蓝隐藻绿褐云雾状2535全年3.膝口藻型扁平膝口藻、隐藻绿褐云雾状2035夏、秋4.螺旋藻型螺旋藻蓝绿溶液状2040夏、秋5.血红裸藻型血红裸藻红褐膜状2550夏、秋6.团藻型衣藻、空球藻绿云雾状2035夏、秋7.金藻型单鞭金藻、棕鞭藻等鞭藻金黄云雾状3050全年8.硅藻型菱形藻、舟形藻、小环藻黄褐溶液状3550全年二等水9.绿球藻型小球藻、栅藻草绿溶液状2035全年10.绿裸藻型绿裸藻绿2050全年11.壳虫藻型壳虫藻紫褐云雾状2540全年三等水(劣水)12.微囊藻型微囊藻、囊球藻蓝绿、黄绿膜状有碎纱1020夏、秋13.颤藻型颤藻、席藻绿、紫溶液状或

13、膜状2035春、秋14.微型蓝藻型蓝球藻、平列藻蓝绿溶液状2035夏、秋某些鱼类对常规饲料原料中某些鱼类对常规饲料原料中磷的生物利用率磷的生物利用率原料 虹鳟%a 大西洋鲑%b 叉尾回%c 鲤鱼%a血粉 - 81 - -啤酒酵母 91 79 - 93酪蛋白 90 92 90d 97卵清蛋白 - - 71 -水解羽毛粉 - 77 - -米糠 19 - - 25小麦苤芽 58 - - 57 次粉 - 32 28 -破碎玉米 - - 25 - 带壳豆粕 - - 29 - 54d -去壳豆粕 - 36 29 - 54d -植酸 0e,18a 0 0 8 - 38a: Ogino et al. (197

14、9)b: Lall et al. (未发表数据), 表观消化值。c: Lovell et al. (1982), 表观消化值。 d: Wilson et al.L (1982).表观消化值。 e: Ketola (1990)不同不同加工工艺加工工艺效果比较效果比较精准农业精准农业 配方农业配方农业 精准农业是当今世界农业发展的新潮流，是由信息技术支持的、根据空间变异定位、定时、定量地实施一整套现代化农事操作技术与管理的系统。其目标是以最少的或最节省的投入达到同等收入或更高的收入，并改善环境，高效地利用各类农业资源，取得经济效益和环境效益。全球定位系统全球定位系统农田信息采集系统农田信息采集系统

15、环境监测系统环境监测系统农田遥感监测系统农田遥感监测系统农田地理信息系统农田地理信息系统智能化农机具系统智能化农机具系统精准农业由十个系统组成：精准农业由十个系统组成：系统集成系统集成网络化管理系统网络化管理系统培训系统培训系统农业专家系统农业专家系统水质监控与管理自动监测控制台自动监测控制台广东（番禺）国家罗非鱼良种场已建雏形实时监测与自动控制饲料管理平台 池塘虾群营养需要量模型 营养价值和知识数据库 基于动态信息的饲料配方软件 饲料投喂自动控制平台 饲料配方优化计算动物饲养标准参数设定价格原料营养含量营养需要模型 鳜鱼病毒病鳜鱼病毒病江苏高邮周锡勋周问周问:为什么鳜鱼对药物（特别是有机磷类

16、）比常规的四大家鱼更敏感，致死浓度更小呢？答：？答：？周体会：周体会：难怪在江苏高邮这边有些药六月中旬前用起来对鳜鱼没事，到高温季节后就容易死鱼了。 携带携带不同强度病毒不同强度病毒鳜鱼鳜鱼对生理盐水注射刺激对生理盐水注射刺激的反应性的反应性* 鳜鱼病毒强度 试验鱼尾数 10 10 10 10 死亡尾数 0 1 3 8 死亡率 0 10% 30% 80% * * 该试验在发病季节进行农作物测土配方施肥农作物测土配方施肥 不要盲目加施氮磷钾 超量施肥，蔬菜减产 化肥深施，节本五成 滴灌施肥，省肥少病 施肥精准，种稻省钱 节肥增效，配方肥是方向 20052007年累计实施测土配方施肥面积3848.

17、6万亩次，平均增产10以上，节省化肥施用量20以上，每亩节本增效69.31元。物质交换物质交换动态平衡动态平衡l新塘旺三年l新塘好养、老塘难养l养虾先养水、养水先养泥经验之谈：底栖微生物与物质循环氮循环碳循环磷循环铁循环硫循环垂直分布垂直分布厌氧微生物兼性好氧微生物微需氧微生物好氧微生物铁、锰还原细菌硫酸还原菌甲烷产生菌硝化细菌反硝化细菌氧化还原电位降低重要的物质循环反硝化的作用蛋白质NH4NO2NO3N2N2NO3NH4NO2+-2002年湛江乌石某虾场80余亩高位虾池建成，池塘投入使用时，按常规使用石灰进行“消毒”处理，连续进两批虾苗都全军覆没。 该池塘底部为潜在酸性硫酸盐土壤（红树林地带

18、的特征），池塘在建造期间暴晒导致其中的硫化物转化为硫酸。高度的酸性使浮游生物难以繁殖并导致虾苗死亡。生态监测技术生态监测技术持续性持续性瞬时性瞬时性 水质理化因子水质理化因子微型生物群落微型生物群落mg/L 鳜塘水生态因子测定结果鳜塘水生态因子测定结果 -昼夜变化曲线昼夜变化曲线水温水温pH溶氧溶氧亚硝酸盐氮亚硝酸盐氮磷酸盐磷磷酸盐磷 pHpH、CODCOD、叶绿素、叶绿素a a样本分类图样本分类图 高溶氧 低溶氧 溶氧量为目标函数， 其它因素为自变量，数学模型为多元二次非线性函数。 水生生物对水环境变化的三角鞭毛虫纤毛虫纤毛虫原生动物浮游动物养殖生物细菌藻类RAPDRAPD图谱图谱 7 6

19、5 4 3 2 1 PFUPFU采集原生动物的常用方法采集原生动物的常用方法 寻找能表达趋势性指标底栖原生动物与环境底栖原生动物与环境底栖原生动物与环境底栖原生动物与环境水质综合指数与生物多样性的关系水质综合指数与生物多样性的关系浮游生物群落浮游生物群落DNADNA序列丰富度与水质综合指数关系序列丰富度与水质综合指数关系xbayln849. 0r01.0P底栖原生动物多样性指数与水质综合指数成对数函数关系底栖原生动物多样性指数与水质综合指数成对数函数关系发病塘发病塘正常塘正常塘水质理化指标水质理化指标池塘生物多样性池塘生物多样性病害病害显著相关性显著相关性病害测报病害测报养殖过程中池塘养殖过程

20、中池塘土壤脱氢酶土壤脱氢酶变化规律的研究变化规律的研究脱氢酶活性在脱氢酶活性在养殖过程养殖过程中的变化中的变化 脱氢酶活性在脱氢酶活性在模拟试验模拟试验期间的变化期间的变化 养殖池塘的养殖池塘的底泥微生物活性底泥微生物活性脱氢酶活力脱氢酶活力是一个很好反映养殖池塘是一个很好反映养殖池塘污染污染程度的指标程度的指标。 探索养殖期间底泥脱氢酶的变化规律，为池塘老化的描述与诊断提供科学依据，分析底泥脱氢酶与底泥理化因子的联系，为养殖环境的快速检测奠定基础。 发现在投饵情况下，底泥脱氢酶活性逐渐升高，并且脱氢酶活性与水体总磷、总氮和总磷、总氮和pH都存在极显著相关关系，相关系数分别为0.825、0.7

21、26和0.847。进一步说明脱氢酶活性是一个很好的反映养殖池塘污染程度的指标。 将进一步发展试剂盒技术试纸颜色变化 氧化状态氧化状态 还原状态还原状态 氧化还原电位：高氧化还原电位：高 低低 微生物组成：好氧种群为主微生物组成：好氧种群为主 厌氧种群为厌氧种群为主主 碱化碱化 酸化酸化养殖生产阶段：污染过程养殖生产阶段：污染过程底质修复阶段：净化过程底质修复阶段：净化过程有机物积累有机物积累, ,池塘底质变化池塘底质变化底质修复pH酸交换度有机质C:NTP质地7.20.4 60%池塘 02.770.34% 8.31.5 0.0880.04% 60% 壤土40% 砂土底 质 普 查2525口塘分

22、析表明口塘分析表明: :1、传统的仅用石灰改良底质是不全面的，存在池塘中磷失活的潜在危机；2、有机物质含量偏高达2.5%以上。 九口池塘底质的九口池塘底质的pHpH、交换性酸、全氮、有机质含量以及质地、交换性酸、全氮、有机质含量以及质地序号123456789pH 值7.617.857.307.217.527.247.417.135.75交换性酸(me/100g)00.050.280.4700.2800.921.09全氮（%）0.150.110.200.150.110.160.200.130.14有机质（%）3.83.33.63.42.94.14.22.63.1质地a粘土粘土粘土粘土粘土粘土粘土

23、粘土粘土a质地是根据手感评估的。 在所检测的池塘中，底质的pH值范围在5.757.85之间，而且大部分落在最佳范围之内；多数池塘（62.5%）的交换性酸值低于0.5me/100g土；75%的池塘底质中氮的含量均属于偏低水平（0.25%以下）；所有池塘底质的有机物质含所有池塘底质的有机物质含量均超标（量均超标（2.6%2.6%5.5%5.5%）；）；以有机物质平均含碳为58%计，实验中池塘底质的碳:氮比值在10.4%17.4%间，平均为13.6%，比较理想。 分析结果表明，所有池塘底质的有机物质含量均超标，属于老化池塘属于老化池塘， 需要进行底质改良。翻耕前补充的材料池塘编号措施12345678

24、9撒石灰(kg/ha)650850硝酸氮(kg/ha)a41857021536048012045165微生物制剂(kg/ha)b153015301530153015301530153015301530底质修复方法应用干塘干塘晒塘晒塘翻耕翻耕破碎破碎热处理热处理改良剂改良剂底质修复方法研究组别组别处理方法处理方法干燥太阳下直接曝晒干燥+破碎干燥1周后，用铁锤将土壤破碎后过100目筛，太阳下暴晒碱化石灰溶于水后直接泼洒在土壤上改良剂底净宝,参照说明书施无机氮肥土壤干燥一周后，将NaNO3和10g尿素撒于土壤上并拌匀热熏土壤干燥一周后，干草闷烧不同修复方法对土壤理化性质的影响图施肥：最佳氮碳比施肥：

25、最佳氮碳比碱化需要量的确定碱化需要量的确定水中泥的pH根据在缓冲液中泥的pH 所需的CaCO3(公斤亩) 7.97.87.77.67.57.47.37.27.17.05.75.65.55.45.35.25.15.04.94.84.7 6.0 8.413.519.322.726.129.433.643.744.847.1 12.116.826.938.745.352.158.867.287.389.694.1 18.1 25.2 40.3 57.9 68.1 78.1 88.2100.8131.1134.4141.1 24.2 33.6 53.7 77.3 90.7104.1117.7134.4

26、174.7179.2188.1 30.3 42.0 67.2 96.6113.4129.9147.0168.0218.4224.0235.2 36.3 50.4 80.7115.9136.1156.3176.4201.6262.1268.8282.3 42.3 58.8 94.1135.3158.7182.3205.8235.2305.7313.6329.3 48.4 67.2107.5154.5181.5208.3235.2268.8349.5359.3376.3 54.5 75.6120.9173.9204.1234.3264.6302.4398.7403.2423.3 60.5 84.0

27、134.4193.2226.8260.4294.0336.0436.8448.0470.4 广东番禺养虾基地以水质等指标为依据投入自制微生物制剂：多功能池塘底泥修复机翻 耕破 碎耙 平开 沟高温氧化池塘底质改良效果池塘底质改良效果1号对照塘2号对照塘6号对照塘2502201510 5原生动物种类数量采样时间(周)1号实验塘2号实验塘6号实验塘4池塘底泥的改良、保养和管理池塘底泥的改良、保养和管理强化水体流转强化水体流转增氧机的使用增氧机的使用不同时间开增氧机的效果比较不同时间开增氧机的效果比较白天开机白天不开机 溶溶解解氧氧 06:00 12:00 18:00 24:00 06:00增产机增产

28、机增产机救鱼机救鱼机中层溶解氧中层溶解氧增氧设备的选择 喷气式增氧机提供水体与气体的营养交换；并有强烈的气浮作用； 水车式增氧机有比较好的水运动和循环作用； 叶轮式增氧机有比较强的提水作用； 空气压缩机有比较均匀的增氧作用。池塘底泥的改良、保养和管理池塘底泥的改良、保养和管理适时刮动底泥适时刮动底泥1升污泥1升污泥污泥微粒的吸附作用污泥微粒的吸附作用当1升污泥搅拌成直径为 0.1 毫米的微粒时，表面积达60平方米。11升 污泥微粒的表面积相当于一亩池塘的底泥面积。微粒微粒微粒在沉降过程中能吸附大量的可溶性有机物和微生物。一个污泥微粒就是一个良好的微生态系统，并且在沉降过程中不断释放微生物的代谢

29、物，同时不断吸收水中的可溶性有机物，净化效率比底泥强得多。许多微粒互相吸附形成菌胶团，又是滤食性鱼类的饵料。内部厌氧环境表面有氧环境营养交换臭 氧 处 理水流转、增氧、刮底（污泥微粒）、臭氧适时、适量？ 20022002年年6 61010月在湛江雷州市乌石镇的月在湛江雷州市乌石镇的老化对虾池塘（底、水）改良老化对虾池塘（底、水）改良，进行南美，进行南美白对虾白对虾健康养殖健康养殖。取得了全程无用任何化。取得了全程无用任何化学药物、抗生药物，学药物、抗生药物，1313口池塘共口池塘共9.99.9公顷公顷100%100%无爆发病发生。；另无爆发病发生。；另23.4323.43公顷按常规公顷按常规养

30、殖作为对照，养殖塘养成率低于养殖作为对照，养殖塘养成率低于20%20%。 环境与鱼类体质和病原之间的关系环境与鱼类体质和病原之间的关系环境恶化鱼病发生环境恶化鱼病发生体质体质病原病原环境环境病病季节季节 每年4月中下旬月中下旬水温约水温约20以上以上可发病，至11月中月中下旬下旬水温降低时。不治自愈，发病高峰期多出现在710月间月间 （ 用药的误解）用药的误解）中心封闭传染特征传染特征 水平传播：水平传播：鳜鱼暴发病由始发地经同一水源辐射状漫延以及封闭疫区水源而安全渡过发病高峰期的案例，佐证了病原经水传染经水传染的可能性94年中山市东风镇鳜鱼暴发病蔓延模式病原营养种质水质诱发、协同、加速 因子

31、限制因子引起大规模流行携带病毒鳜鱼的应激性携带病毒鳜鱼的应激性气候温度病害预警病害预警病原检测试剂盒、生态敏感指标、专家诊断系统病原检测试剂盒、生态敏感指标、专家诊断系统生态修复、改良生态修复、改良培藻剂、培菌剂、底质修复措施培藻剂、培菌剂、底质修复措施免疫免疫疫苗、增强剂量（微量营养素）疫苗、增强剂量（微量营养素）高健康种苗高健康种苗SPFSPF虾（美）、抗病品系虾（中大、华师）虾（美）、抗病品系虾（中大、华师）低毒高效药物制剂低毒高效药物制剂安全用药安全用药美国工程院院士王兆凯先生的成果：抗对虾弧菌病 养殖工程系统内：藻的种类、密度控制；藻分泌抗生素抑制弧菌。抑制抑制侵染侵染平衡平衡阶段阶

32、段1940s1970s1980s1990s21世纪初菌苗研究菌苗研究和应用和应用菌苗开始菌苗开始商品化生产商品化生产菌、病毒菌、病毒研究开发研究开发菌苗、菌苗、病毒细胞苗病毒细胞苗规模商品化生产规模商品化生产“渔用疫苗学渔用疫苗学”基础基础基因疫苗、活载体疫苗基因疫苗、活载体疫苗 多价复合疫苗多价复合疫苗 浸泡法、口服法浸泡法、口服法寄生虫疫苗寄生虫疫苗国外国内国内外水产疫苗研发状况及趋势国内外水产疫苗研发状况及趋势2001年弱毒疫苗获商业许可鲑鱼产气单胞菌苗 1975年美国疫苗有限公司1984年巴黎疫苗会，行业化针对24种病原100余种疫苗获产品证书3种草鱼人工苗草鱼组织苗19802004年

33、挪威大西洋鲑养殖产量年挪威大西洋鲑养殖产量与抗生素使用量的变化与抗生素使用量的变化近50吨不足10万吨虹彩病毒灭活疫苗区域性试验虹彩病毒灭活疫苗区域性试验试验组各周情况各试验组分布（g g）2000，海南，为日验证虹彩病毒疫苗国外主要国家商品化渔用疫苗现状国外主要国家商品化渔用疫苗现状国家或地区国家或地区商品化疫苗种类商品化疫苗种类加拿大41种美国15种挪威13种智利17种日本6种澳大利亚1种其它国家10余种合计100余种县市级的疫病诊断和病原检测仍停留在显微镜观察和经验判断的初级县市级的疫病诊断和病原检测仍停留在显微镜观察和经验判断的初级水平。水平。 我国仅我国仅3 3种水产疫苗获得新兽药证

34、书与水产养殖大国地位极不相称种水产疫苗获得新兽药证书与水产养殖大国地位极不相称嗜水气单胞菌灭活疫苗草鱼出血病细胞灭活疫苗牙鲆鱼溶藻弧菌、鳗弧菌、迟缓爱德华菌病多联抗独特型抗体疫苗 到目前为止，水产养殖疫病防控技术极其滞后。到目前为止，水产养殖疫病防控技术极其滞后。农业部水生动物疫病防控重点开放实验室2001，意大利，世界水产博览会展示2000，海南，为日验证虹彩病毒疫苗鱼鱼 类类 疫疫 苗苗 注注 射射德国群众性注射工作1990年，美国奥本大学年，美国奥本大学Dr.plumb等，对斑点叉尾回等，对斑点叉尾回鱼苗进行抗鱼苗进行抗Edwarsida Tarda 病的疫苗免疫浸泡试验。病的疫苗免疫浸

35、泡试验。草鱼疫苗在江西、广东田间试验情况草鱼疫苗在江西、广东田间试验情况（官方组织） 2006年，在农业部水产养殖业增长方式转变行动实施方案及关于做好农业部水产健康养殖示范区创建工作的通知的精神指导下，在广东省及江西省开展了草鱼免疫防治病害（草鱼出血病及细菌病）示范工作 成活率平均在80以上，一些区域高达98.3，平均成活率提高2040，保护效果良好。 草鱼疫苗的草鱼疫苗的GMP中间试制中间试制消毒器细胞培养转床细胞培养转床疫苗产品介绍草鱼出血病活疫苗草鱼出血病活疫苗流行病学流行病学 每年47月和911月份发病 水温24-30时发生流行 死亡率3060作用与用途作用与用途：预防草鱼病毒性出血病

36、免疫期免疫期：15个月。免疫产生期：第5天。保存期保存期：10 18个月；4 6个月。用法与用量用法与用量 用法：肌肉注射或腹腔注射。按瓶签注明尾份，用生理盐水稀释。 用量：体重12250g草鱼每尾用0.2ml（1尾份，即105.2TCID/0.2ml）;250-750g每尾用0.3ml。田间试验田间试验：免疫20750g体重草鱼39.59万尾，放养于0.38亩池塘，2个月后各塘随机取样各30尾攻毒，结果各塘试验鱼免疫保护率 均100，各对照塘鱼死亡率为90100。年底清塘统计，免疫鱼成活率为8796.8，比未免疫鱼成活率提高2130。区域试区域试验：免疫草鱼35.1万尾，年底起捕统计，养成草

37、鱼32.4万尾，成活率达9098，比对照塘提高2540。免疫鳜血清溶菌酶活性免疫鳜血清溶菌酶活性 免疫鳜血清超氧化物歧化酶活性免疫鳜血清超氧化物歧化酶活性 鳜血清抗体效价变化鳜血清抗体效价变化 相对免疫保护率相对免疫保护率 71.4%79.1%采集采集广东、海南和福建广东、海南和福建三省的十几个地区三省的十几个地区12种鱼种鱼类病料约类病料约500个分离病原菌个分离病原菌400余株。余株。+ += =疫苗构建疫苗构建48%39% 13% V ib rio v u ln ific u s V ib rio o rd a lii L is to n e lla a n g u illa ru m

38、V ib rio m e ts c h n ik o v ii V ib rio s a lm o n ic id a P h o to b a c te riu m d a m s e la e V ib rio p a ra h a e m o ly tic u s V ib rio a lg in o ly tic u s E c G S 0 2 1 0 0 1 V ib rio h a rv e y i E c G S 0 2 0 8 0 1 L u G Y 0 2 0 6 0 1 E c G Y 0 2 0 4 0 1 E c G S 0 2 0 8 0 5 E c G S 0 2

39、0 8 0 2 V ib rio h o llis a e V ib rio m im ic u s V ib rio c h o le ra e V ib rio fu rn is s ii V ib rio flu v ia lis V ib rio c in c in n a tie n s is 海水鱼疾病调查海水鱼疾病调查二联疫苗(浸泡)弧菌全菌苗(浸泡)100806040200R RP PS S( (% %) )相相对对保保护护率率弧弧菌菌全全菌菌苗苗( (浸浸泡泡) ), , 二二联联疫疫苗苗( (浸浸泡泡) )免免疫疫保保护护效效果果的的箱箱线线图图海水鱼弧菌病二联疫苗研究基础

40、（海水鱼弧菌病二联疫苗研究基础（1）单苗（20组数据）二联苗（41组数据）二联疫苗浸泡免疫比单苗具有更好的免疫保护效果二联灭活疫苗免疫三种实验鱼，对哈维氏弧菌SpGY020601株的免疫保护率，注射为77.8%87.5%，浸泡为60%66.7%；对溶藻弧菌EpGS021001株的免疫保护率，注射为87.5%90%，浸泡为60%66.7%。实验室疫苗的免疫效力实验室疫苗的免疫效力纳纳米米材材料料微微球球疫疫苗苗微微 囊囊 疫疫 苗苗CS-SA OmpK血清免疫应答规律血清免疫应答规律PELA OmpK血清免疫应答规律血清免疫应答规律 通过通过ELISA测定鱼体免疫应答规律及测定免疫保护率，表明注

41、射产测定鱼体免疫应答规律及测定免疫保护率，表明注射产生的抗体效价高，保护效果最好，为生的抗体效价高，保护效果最好，为85.7% ，微球疫苗微球疫苗组效价次之，组效价次之，免免疫保护率为疫保护率为62.5%。纳米疫苗和对照的免疫保护性纳米疫苗和对照的免疫保护性 疫苗类型试验时间实验地点免疫方式免疫数量免疫种类Vv-ISCOMs2007、5长乐清峰鳗场口服60万尾欧鳗Vv-ISCOMs2007、6长乐友兴鳗场口服70万尾欧鳗Vv-ISCOMs2007、6长乐友峰鳗场口服50万尾欧鳗TPS30/ZN1-ISCOMs2007、6长乐兴利鳗场口服80万尾欧鳗Vv-ISCOMs2007、8长乐清峰鳗场口服

42、40万尾美洲鳗微微 囊囊 疫疫 苗苗嗜嗜水水气气单单胞胞菌菌和和创创伤伤弧弧菌菌I IS SC CO OMsMs疫疫苗苗的的田田间间示示范范 嗜水气单胞菌和创伤弧菌嗜水气单胞菌和创伤弧菌ISCOMsISCOMs疫苗田间试验疫苗田间试验 创伤弧菌创伤弧菌ISCOMsISCOMs疫苗口服免疫鳗鱼血清疫苗口服免疫鳗鱼血清ELISAELISA测定测定 田间应用田间应用ISCOMs疫苗，疫苗，二次口服二次口服免疫鳗鲡后第免疫鳗鲡后第60天的田间免疫保护率可达天的田间免疫保护率可达76.9，比同批次、同区域未接种养殖场鳗鲡，比同批次、同区域未接种养殖场鳗鲡发病死亡率减少发病死亡率减少10.7-15.7%，

43、初步，初步确定疫苗确定疫苗免疫期在免疫期在60天以上天以上。93.33040Live attenuated strainInactived vaccine 0 20 40 60 80 100 Survival rate减毒株免疫效力初步评价试验减毒株免疫效力初步评价试验免疫靶动物：大菱鲆（平均体长10cm），试验尾数60尾，每组20尾给药剂量：腹腔注射，106cfu/fish攻毒剂量：腹腔注射，108cfu/fish 通过对大菱鲆初步免疫试验证实，在免疫剂量为通过对大菱鲆初步免疫试验证实，在免疫剂量为106cfu/fish的尾的尾部肌肉注射给药下，部肌肉注射给药下，4周后对迟钝爱德华氏菌野生毒

44、株的攻毒周后对迟钝爱德华氏菌野生毒株的攻毒（108cfu/fish）免疫保护力为免疫保护力为93.3。重复免疫效力试验及浸泡免疫。重复免疫效力试验及浸泡免疫效力的试验正在进行中。效力的试验正在进行中。 迟迟钝钝爱爱德德华华氏氏菌菌基基因因缺缺失失减减毒毒活活菌菌疫疫苗苗水产弱毒疫苗及其安全性评价技术水产弱毒疫苗及其安全性评价技术 rifampicinEdwardsiella ictaluriLive VaccineEdwardsiella Ictalurii Vaccine, Live Culture, Code 1531.00 ( 25JAN99 ) Arthrobacter Vaccine

45、, Live Culture, Code 1K11.00 (19APR01) Flavobacterium Columnare Vaccine, Avirulent Live Culture, Code 17F1.00(24MAR05)Flavobacterium ColumnarerifampicinampicillinLive Vaccineimmersionimmersion 目前美国有3种渔用弱毒疫苗获得商业许可，开创了国际渔用弱毒疫苗商业许可的先河。美国批准上市的活疫苗在美国、加拿大、智利等国广泛应用以来，取得了良好的免疫保护效果。嗜热四膜虫表达小瓜虫抗原技术嗜热四膜虫表达小瓜虫抗原

46、技术 1.单细胞真核模式生物单细胞真核模式生物2.蛋白分泌到培养基中蛋白分泌到培养基中3.遗传性简单遗传性简单4.培养简便培养简便5.体表有大量的纤毛，体表有大量的纤毛， 适合商业疫苗生产适合商业疫苗生产6. 保存简单保存简单感染小瓜虫的斑点叉尾感染小瓜虫的斑点叉尾鮰鮰体外培养困难体外培养困难抗原复杂抗原复杂特殊的翻译密码子特殊的翻译密码子 由于寄生虫的翻译密码子与其他生物不同，所以用大肠杆菌或酵母表达系统表达的寄生虫蛋白为小段的不完整肽链，不具有免疫原性。为解决这个问题，美国Cornell大学率先成功研究出采用嗜热四膜虫作为表达载体，表达小瓜虫阻动抗原，用于治疗鱼类小瓜虫病。 灌装机洁净车间

47、灭活罐将成为我国渔用疫苗从实验室研究走向将成为我国渔用疫苗从实验室研究走向产业化产业化发展的过程发展的过程中的一个里程碑中的一个里程碑 我国第一个符合我国第一个符合GMP标准的渔用疫苗中试基地。标准的渔用疫苗中试基地。 建设建设面积面积达达3600m2 ,水、电、汽、净化等工程齐全完备。水、电、汽、净化等工程齐全完备。建有细菌灭活疫苗、细菌亚单位疫苗、细胞培养弱毒疫苗、建有细菌灭活疫苗、细菌亚单位疫苗、细胞培养弱毒疫苗、细胞培养灭活疫苗细胞培养灭活疫苗4条中试生产线条中试生产线。我国一流的渔用疫苗研究我国一流的渔用疫苗研究平台平台。 500升发酵罐制水系统生化菌监仪病体症状病菌分离血清学技术微

48、量生化试剂盒 PCR技术电镜观察病原菌：病原菌：特异特异 繁琐繁琐 省力省力 特异特异 灵敏灵敏性差性差 费时费时 省时省时寄生虫：寄生虫：镜检肉眼病毒病毒电镜观察BiologSerologyFAMErRNASeq.AFLPCommercial databaseCommercial databaseGenBankNew databaseNew databasePolyphasic approach to fish pathogen identification1Department of Fisheries and Allied Aquacultures. Auburn University2

49、Aquatic Animal Health Research Unit. ARS/USDA. Auburn, AL, and 3Chestertown, MD构建智能化数据库疫病诊断技术发展趋势疫病诊断技术发展趋势p多品种、智能、准确、快速 p快速检测试剂盒产品p现场快速检测技术p计算机识别技术p浮游生物、底栖原生动物 多样性检测技术病原快速检测技术病原快速检测技术生态预警方法生态预警方法疫病专家诊断系统疫病专家诊断系统对虾白斑病核酸探针试剂盒分子杂交推广中国水科院黄海水产研究所所对虾白斑(WSSV)PCR检测试剂盒PCR推广中国水科院黄海水产研究所所 国家海洋局第三海洋研究所中科院南海海洋研

50、究所 中山大学对虾桃拉(TSV)PCR检测试剂盒RT-PCR推广中国水科院黄海水产研究所 中科院南海海洋研究所对虾传染性皮下和造血组织坏死病毒(IHHNV) PCR检测试剂盒PCR推广中国水科院黄海水产研究所 中科院南海海洋研究所对虾肝胰腺细小病毒(HPV) PCR检测试剂盒PCR推广中国水科院黄海水产研究所斑节对虾杆状病毒(MBV) PCR检测试剂盒PCR推广中国水科院黄海水产研究所对虾杆状病毒(BP) PCR检测试剂盒PCR推广中国水科院黄海水产研究所对虾黄头病病毒(YHV)PCR检测试剂盒PCR推广中国水科院黄海水产研究所锦鲤疱疹病毒PCR检测试剂盒PCR推广中国水科院珠江水产研究所鳜鱼

51、病毒病PCR检测试剂盒PCR推广中山大学已建立中国水科院珠江水产研究所海水鱼类虹彩病毒 PCR检测试剂盒PCR推广/实验室中国水科院黄海水产研究所/水科院珠江水产研究所海水鱼淋巴囊肿病毒PCR检测试剂盒PCR推广/已建立中国水科院黄海水产研究所/国家海洋局第一海洋研究所实验室中国水科院珠江水产研究所淡水鱼鲤春病毒血症病毒PCR检测试剂盒PCR推广中国水科院黄海水产研究所栉孔扇贝急性病毒性坏死症病毒血清学检测试剂免疫推广中国水科院黄海水产研究所嗜水性气单胞菌免疫诊断试剂盒免疫已建立/推广南京农大/水科院珠江水产研究所嗜水性气单胞菌PCR诊断试剂盒PCR已建立南京农大鱼类致病性气单胞菌DOT-EL

52、ISA诊断试剂盒免疫已建立南京农大海水鱼神经坏死病毒检测试剂盒RT-PCR已建立中山大学鳗弧菌PCR检测试剂盒PCR已建立中国科学院海洋研究所对虾桃拉(TSV)PCR检测试剂盒PCR已建立中国水科院珠江水产研究所淡水鱼迟缓爱德华氏菌病检测试剂盒免疫实验室中国水科院珠江水产研究所温和气单胞菌检测试剂盒免疫实验室中国水科院珠江水产研究所弧菌检测试剂盒生化实验室中国水科院珠江水产研究所草鱼出血病病毒PCR检测试剂盒RT-PCR实验室中国水科院珠江水产研究所目前我国水产病原检测试剂盒目前我国水产病原检测试剂盒研究状况研究状况18种病原、24种检测方法病害预警技术鱼病诊断平台解决问题否解决问题否?解决问

53、题解决问题?是是是是否否否否解决问题解决问题?是是否否远程诊断远程诊断呼叫咨询呼叫咨询专家在线专家在线专家会诊专家会诊专家系统手机江苏：仅专家在线，未智能化数据库系统功能：系统功能： 图像采集 病例管理 图像处理 报告打印 辅助诊断 远程会诊 疫情分析捷安捷安显微形态分析系统配置：显微形态分析系统配置：计算机显示器打印机医学专用采集卡，支持远程会诊传输显微镜远程传输附件：系列鱼病图谱捷安显微形态分析系统软件包水产动物病害防治专家系统 系统主要由四个部分组成： 第一部分：疾病诊断 第二部分：常见病害防 治技术 第三部分：药物推荐 第四部分：病历查询 生态预警软件原理图预警系统建立预警软件开发原理

54、图预警软件界面点预测模块面预测模块专专 家家 库库 病害防治系统工程鱼类疫苗池塘内部理化生物因子刺激因子气候药物水质改良剂生态监测指标底质改良剂原生动物监测技术水源管理病原检测技术底质理化检测技术水营养级别检测技术饵料鱼不用单用池塘底质池塘底质检测检测pH、C/N调整调整干燥、翻耕干燥、翻耕氧化处理氧化处理热熏处理热熏处理改善结构改善结构补充外源微补充外源微生物种群生物种群回水回水培水培水水质、底质水质、底质生物监测生物监测水质调控水质调控水产品上市水产品上市微生物制剂微生物制剂制备制备健康亲虾健康亲虾健康虾苗健康虾苗合理混养合理混养浮游植物调节浮游植物调节生物肥料生物肥料干塘收获干塘收获石灰

55、、化肥、微量元素石灰、化肥、微量元素泥水界泥水界面管理面管理解毒解毒 缺什么，补什么 配方制管理海岸带资源海岸带资源 环境容量环境容量 规划适度的养虾规模规划适度的养虾规模良种体系良种体系病害监控体系病害监控体系饲料饲料改革改革放养密度放养密度渔业法制建设渔业法制建设 养殖证管理制度行为 从业人员准入制度素质 种苗生产管理质量 养殖用药管理安全生态环境生态环境修复与改良修复与改良养成养成对虾健康养殖基本条件：对虾健康养殖基本条件：系统思考SPF亲本优质大规格的商品虾小区化养殖管理模式养殖小区质量检验合格推荐质量检验合格推荐合格企业准入备合格企业准入备养殖合格付饲料款原料合格收购合同产品抽检合格准许质量检验合格推荐质量检验合格推荐适当饥饿有利健康预报系统的建立安全生产是对虾养殖业发展的必由之路。在安全生产过程中，病害的预测预报是十分重要的。由于预测预报需要相应的科学技术和检测