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文档简介
1、临床检验标本采集手册莱西市夏格庄中心卫生院34目 录第一章 概述2第二章 检验科标本采集原则及注意事项4第三章 标本采集方法9一 血液检验标本采集方法14二 尿液常规检验标本采集15三 粪便常规检验标本采集17四 浆膜腔积液检验标本采集12五 微生物检验标本采集12第四章 标本正确采集的医学意义19莱西市夏格庄中心卫生院检验项目目录23前 言 随着现代科学技术的迅猛发展,大量新技术、新设备、新方法引入到临床实验室,检验项目、检验方法不断更新和发展,检验医学在临床诊疗中的作用日益突出。为了进一步提高临床检验质量,更好地为临床服务,特编写此手册,旨在为临床提供标本采集、检验项目、临床意义
2、等信息,有助于临床医生更准确的选择检验项目,促进标本采集的规范化,使临床检验在临床疾病诊断治疗中发挥更大的作用。提高检验质量是我们始终不谕的目标,临床和患者的满意是我们永远的追求。 莱西市夏格庄中心卫生院检验科2011年1月25日第一章 概述实践证明,为保证临床检验质量,必须做到全过程质量控制,即对实验室检查的全过程进行全面的质量控制和质量管理。这里包括:实验前(分析前) 、实验中(分析中) 和实验后(分析后)三个阶段的质量控制,其中实验前质量控制是全面质量控制的前提。国内外均有报道,检验结果误差中70%左右来自实验前(分析前),而且实验前(分析前)误差是仪器、试剂、质控品和标准品等再好也无法
3、解决的。因此,必须注意做好实验前质量管理。一 、实验前质量控制主要包括:(一)患者的准备根据所采标本的类型和所分析的物质而定。标本采集前患者的状态对检测结果有一定的影响,不同检测项目对标本采集前患者的状态有不同的要求。许多非疾病因素,如是否空腹、精神状况、体力活动、使用药物等都可能影响检验结果。因此,在标本采集前,要根据需要对患者做好相应的准备。一般要求患者处于安静状态;晨起时的精神、体力、情绪等因素的影响较小,是大部分标本采集的最佳时间;如可能,患者最好停服干扰检测的药物;根据项目和标本类别选择相应的容器。许多检测对饮食、饮水和药物有特殊要求,如:静脉采血前至少要空腹 8小时;血脂测定须禁食
4、 12-14h后采血;情绪紧张会使血糖升高;吗啡、可卡因可使淀粉酶(AMY)升高;微生物培养最好在使用抗生素之前;采血样之前按摩前列腺可引起酸性磷酸酶的升高;醛固酮检测要在起床活动前取卧位血,起床后活动 2 小时取立位血;尿液检查按不同项目分别留取晨尿、随机尿、计时尿;大便潜血检查前要素食,禁食含动物血的食物等。具体要求后述。(二)标本的采集 1、正确的采集标本是保证检验质量的基础。要注意以下问题:(1)避免干扰物污染,特别是定量分析标本;(2)标本采集部位和方法要正确;(3)标本标识一定要清晰无误;(4)无人为的溶血和混浊因素:如收集标本用力震荡或用玻璃棒及木棍搅拌会导致溶血;餐后采血会出现
5、脂血而致血清、血浆混浊;(5)合理使用抗凝剂及防腐剂;(6)收集区温度最好不超过20;(7)微生物检验标本采集严格无菌概念;(8)标本采集后要尽快送至实验室。2、标本采集时间:(1)空腹标本:一般指空腹8h后采集的标本。清晨空腹血液标本常用于临床生化定量测定,受饮食、体力活动、生理活动等的影响较小,易于发现和观察病理情况,而且重复性较好。(2)随时或急诊标本:指无时间限制或无法规定时间而必须采集的标本,被检者一般无法进行准备。随时或急诊标本主要用于体内代谢比较稳定以及受体内因素干扰少的物质的检查,或者急诊、抢救病人必须做的检查。(3)指定时间标本:即指定采集时间的标本,根据不同的检测要求有不同
6、的指定时间,如 24h 尿蛋白定量、葡萄糖耐量试验、内分泌腺的兴奋或抑制试验、肾脏清除率试验等。3.采集方法:具体方法见第二部分内容。(三)标本的储存标本采集后应尽快送至实验室,若不能及时送检,已采集的标本要按检验规定的贮存条件,如室温、冷藏、冰浴、温浴或防腐贮存,将标本直立置于稳定、干燥、避光、密闭的环境中,避免振摇,以免标本渗漏或溶血影响检测结果。血液标本采集后应及时分离血清或血浆,否则可发生红细胞与血清之间成分的相互转移,或红细胞中的某些酶分解待测物等,从而影响检验结果。中心已检标本的保存条件和保存时间明细表请见附录1。(四)标本的运送必须保证运送后标本所分析的结果与刚采集标本后分析的结
7、果一致。1、标本运送要注意防止标本外溢、蒸发和污染,用有盖容器采集、运送标本;2、严格控制温度,如遗传系列检测标本需要置于1825环境运输,不可冷藏和冰冻。3、运输过程中对于所有感染性物质(包括血液)的溢出物,可采用以下清除程序:(1)戴好手套。(2)用布或纸巾覆盖并吸收溢出物。(3)向布或纸巾上倾倒消毒剂,包括其周围区(通常可用含氯消毒剂)。(4)使用消毒剂时,从溢出区域的外围开始,朝向中心进行处理。(5)经约30 分钟后,清除这些物质。如果现场有碎玻璃或其他锐器,则用畚箕或硬质纸板收集并将其存放于防刺穿容器内以待处理。(6)对溢出区进行清洁和消毒(如有必要,重复第25 步)。(7)将受污染
8、的材料置于防漏、防刺穿的废弃物处理容器内。(8)经成功的消毒后,向主管机构通报溢出事件,并说明已经完成现场清除污染工作。(五)标本送出及签收临床工作人员从病人采集标本并将标本从临床运送到实验室及实验室人员接收临床标本,均应按标准化要求进行,并且一定要做到认真核对,包括标本来源、标本属性、检查项目、标本采集和运送是否合乎要求等,标本送出人员和标本接收人员都要做认真的记录并签字存档。(六)标本的处理1、实验室接收标本后应及时正确地予以处理,否则会影响检测结果的准确性。2、如取血后未尽快转送或分离血清、血浆,血清与血细胞长时间接触可发生以下变化:(1)由于血细胞的酵解作用,血糖以每小时515的速率降
9、低,即使在真空采血管中在较低温度下每小时也会降低1.9,糖酵解产物乳酸和丙酮酸升高。(2)由于红细胞膜通透性增加和溶血加重,红细胞内化学成分发生转移和释放,酶活性受影响,血清无机磷、钾、铁、乳酸脱氢酶、天门冬氨酸转移酶、肌酸激酶等升高。(3)由于酯酶作用,胆固醇酯因分解而减少,游离脂肪酸增加。(4)酸性磷酸酶测定血标本室温放置12h测定结果降低 50%。(5)电解质测定血标本未及时分离血清和血浆,可导致血钾测定结果偏高。3、实验室接收标本后的处理应注意以下事项:(1)时间:实验室接受标本后应尽快给予分类和离心。 促凝标本采血后51 5 min尽早处理; 抗凝标本可采血后立即离心; 非抗凝(无促
10、凝)标本采血3060min后离心; 抗凝全血标本(全血细胞分析、ESR、TnT等)不需要离心。(2)温度:一般标本为室温(最好是2225)放置;冷藏标本(对温度依赖性分析物)应保持 28直到温度控制离心。(3)采血管放置:应管口(盖管塞)向上,保持垂直立位放置。(4)采血管必须封口:管塞移去后会使血 PH 改变,影响结果,如可使 PH、Ca2+增高,使 ACP减低;封口可以减少污染、蒸发、喷溅和溢出等。(七)已知的和需考虑的生物因素和干扰因素分析前的可变因素:1、生物因素:可引起所检测物质在体内的变化,此种变化与检测方法无关,分为可变的因素和固定的生物因素:(1)可变的生物因素:包括营养、禁食
11、、饮酒、体重、肌肉重量、体力活动、姿势、气候、身高、作息规律、治疗药物;(2)固定的生物因素:包括性别、年龄、种族和遗传因素。2、干扰因素:在收集和分析标本过程中,干扰因素常导致分析结果与被测物真实浓度不符。将内在干扰因素即机体内自身的因素和外在的干扰因素区别开来。内在干扰因素主要包括:(1)溶血、脂血、胆红素血;(2)内源性物质如抗凝药物、治疗药物及其代谢产物、输注液等;(3)外源性物质与标本混合在一起,如抗凝剂、残留的洗液、细菌、霉菌。二 、标本采集的基本原则1、申请单填写要点每个检验项目或组合检验项目送一份标本,每一份标本附一张申请单。按照检验项目申请单的要求,采集特定的标本,并将标本送
12、到指定的实验室。因此,检验申请单是实验检查的第一步。(1)病人身份识别信息:申请者必需清楚填写病人的姓名、性别、年龄、或其它有效识别身份的编号;(2)病人的病历信息:申请者必需清楚填写病人所在临床科室名称、病历号、床号、临床诊断、临床样本、样本的采集日期和时间(年、月、日、时、分)、申请者姓名、申请检验日期;(3)申请的检验项目:申请者必需清楚填写检验项目名称,项目名称应规范、准确,特别是申请组套项目时,一定要与本中心检验目录的组套内容一致,否则需填写具体单项;(4)追加检测项目时限:在样本有效保存期间和检测结果不受影响的情况下,客户可申请追加检测项目,追加申请需填写检验申请单。可传真和电话委
13、托客服追加检测项目,但事后一周内需补填标本接收单;(5)修改报告单病人全名:因字迹不清要求修改的由客服直接修改,如果与原申请单上的名字出入很大的要求修改,需要提供医院证明!备注:有关的临床和治疗信息,特别是用药信息是检验师评价结果的必要条件。药物可能在体外影响分析方法或在体内引起病理变化,因此,要特别注意在申请单上提供此类信息。2、采集标本前,首先要核对申请单病人基本信是否属实;然后核对收集标本用容器、标识与申请单上信息是否相符合,查对合格后再采集或收集标本。3、收集足够的标本于适当的容器内封好口后及时送检。采集静脉血时要正确使用真空采血管取血至刻度,在取下采血管的同时立即将该采血管轻轻颠倒混
14、匀 58 次,使试管内预置的添加剂与血样充分混匀,但不可剧烈摇晃以免造成标本溶血。4、已采集的标本若不能及时送检,要严格按检验规定的贮存条件暂存。未按要求采集、储存、运送的标本将被视为不合格标本处理。5、在标本采集、送检的过程中遇到任何不明或失误之处,请及时与相应检验专业组联系,以避免或减少差错发生。6、禁止利用患者申请单送检其他人或动物标本。7、不详之处或新开展项目请预先联系。三 、关于实验室标本拒收规定实验室专业负责人同意并有项目检验人员签字,及时与临床沟通,有下列情况时可考虑标本拒收:1、标本属性不清、标记错误或无标记、标本标识与申请单标识不符;2、抗凝剂比例错误;3、标本收集管使用错误
15、;4、微生物室拒收标本:(1)储存、运送不当(该冷藏而未冷藏的标本),被污染的微生物标本;(2)痰、便标本已干;(3)尿标本未用无菌瓶留取;(4)厌氧培养标本未按要求取材及送检;(5)其他无菌部位取材及送检时已被污染的标本。6、其它各种未按标准留取、送检的标本。四 、异常情况处理流程1、 标本量及性状异常时的处理流程(1)标本量少,无法按要求完成所有项目的检测,本中心将优先检测 24小时报告的项目,敬请谅解。(2)重度溶血的标本对 K、GLU、TP、CK、CK-MB、LDH、HBDH、AST、r-GT、AFU、微量元素等项目的结果影响较大,中心建议重新送检。2、 复查的处理流程若客户对结果有疑
16、问,请在标本的保存期内提出(详见本册后附录 2的已检标本保存期),中心评估后,予以复查。3、 标本补送的处理流程(1)由于标本量少、标本污染、性状不符合等原因造成无法完成检测,本中心将通知客户补送标本;(2)客户补送标本时,接收员提供新的条形码以区别于原标本,并在单据上填写“补送”字样;(3)实验室根据相应信息,安排检测。4、 项目加做的处理流程(1)如果客户要求加做项目,请联系客服部,客服部通知实验室评估标本量等;(2)评估合格后,客服部将通知标本接收员填写标本接收单,请客户签字,随当天接收的标本一起运送至中心;(3)报告时间以项目册上承诺的时间为准。5、 其他如客户来电要求或申请单注明需要
17、当晚立即报告结果的,请务必提供准确的联络方式,本中心核对信息后进行口头报告,书面报告单按正常程序发送。第二章 检验科标本采集原则及注意事项一 、 病人准备1、血液检查前的准备:(1)住院病人静脉血标本原则上应清晨空腹抽取。(2)门诊病人应避免疾走、跑步等剧烈运动,并应静坐半小时以上后再采集标本。(3)采血前一天忌用烟、酒、茶、咖啡,并应尽可能避免服用任何药物,不能停用的药物应予以注明,如抗生素、激素、维生素及其它影响代谢或干扰测试反应的药物,以便解释结果时参考。(4)血清脂质或脂蛋白测定应在空腹1214小时采集血液标本。(5)为提高对糖尿病筛查和诊断的敏感性,测定早餐后2小时血糖优于空腹血糖。
18、糖尿病治疗监测和疗效评价,有时须分别测定空腹和餐后血糖。2、尿液检查前的准备 (1)病人在做尿液检查前,应做到如:清洁标本采集部位、明确标记;避免月经、阴道分泌物、粪便清洁剂等各种物质的污染;使用合格容器,细菌培养的标本,应使用消毒培养瓶或无菌、有盖的容器。(2)清洁尿:包括中段尿、导尿标本或耻骨上穿刺尿。3、粪便检查前的准备(1)盛标本的容器应清洁、干燥、有盖,无吸水和渗漏。细菌学检查,粪便标本应采集于灭菌、有盖的容器内。(2)一般采集指头大小(约3-5g)的新鲜粪便,盛于清洁、干燥、无吸水性的有盖容器内。细菌学检验时的粪便标本应收集于无菌容器内。(3)隐血试验时,应嘱咐患者素食3d后留取标
19、本,禁服VitC及铁剂等药品。4、有些特殊试验,如外周血微丝蚴检查等,请咨询相关技术人员。5、所有检查均通知病人并获得病人或家属同意。二 、 血液标本采集方法(一) 血液标本的种类和用途1、静脉采血静脉血是最常用的血液标本,用于绝大多数临床化学、免疫学和血清学、全血细胞计数和血细胞形态学、血液寄生虫学和病原微生物学检验等。2、毛细血管采血毛细血管采血可满足用血量不足200ul的检验,如血型、全血细胞计数(预稀释法)等。3、动脉采血用于血气分析等。(二) 采血器材1、真空采血装置真空管采血简便、快速、省力,可连续多管采血,免去用注射器的抽吸和转注步骤,可避免或减轻机械性溶血;无血液污染,保持手、
20、工作台面和申请单清洁,预防交叉感染,对工作人员和患者有保护作用;抗凝剂和血液比例固定,有利于保证检验质量。一次性真空采血管分类表采血管名称 颜色 添加剂 适用范围 规格(ml)血常规 紫 EDTAK2 血常规 血氨 2常规生化 红 巴西呋咜 生化 免疫 5急诊生化 黄 分离胶 生化 免疫 4凝血四项 蓝 枸缘酸钠 凝血酶凝血机制 1.8血沉 黑 枸缘酸钠 血沉 1.28血液流变学 绿 肝素锂 血液流变检查 5乳酸 灰 氟化钠 乳酸 5注:注射器和试管塑料器材和玻璃器材,对某些试验有不同的影响。凝血因子测定以塑料注射器采血为好,玻璃器材可加速血液凝固。用塑料试管,因血液不易凝固,分离血清时间延长
21、,不利于临床化学、血清学和免疫学的检验。普通注射器抽血,由于抽吸和转注,容易引起可见和不可见的溶血。(三)血液标本的采集方法静脉血标本的采集:采血部位通常采用肘部静脉,当肘部静脉不明显时,可采用手背部、手腕部、腋窝处和外踝部静脉,婴幼儿可采用颈外静脉采血。采血步骤住院病人:应携带贴有条形码或已标记好的试管采集病人标本,需核查病人姓名、床号以确保无误。门诊病人:1、核查内容包括核查病人姓名是否与条码或申请单一致、病人是否符合采血要求如空腹等。若符合,贴条码或在申请单和试管上统一编号,采血垫上垫上一张新的卫生纸。2、按检验项目的要求,准备好相应的采血器材。3、患者取卧位或坐位,手臂伸直平放在台面垫
22、枕上,充分显露穿刺部位。4、采血前,采血员须用消毒剂擦手消毒。5、找好静脉后,先用碘伏棉签由内向外顺时针方向消毒穿刺处皮肤,稍等片刻再用无菌棉签以相同方向擦去碘迹。在采血部位上方扎上压脉带,嘱患者紧握拳头,使静脉显露。如静脉仍不明显,可嘱咐患者反复握拳数次,促使静脉怒张。肥胖患者,上述伸握拳数次后仍不明显,这时必须凭操作者经验,以左手食指在采血部位触摸,发现静脉走向后,试探性穿刺。6、穿刺采血6.1使用真空采血针采血1)打开包装袋,取出采血针并将采血针上的护套取下,手持采血针以15°的角度刺入静脉血管,此时可在连接胶管中见回血,然后将管塞穿刺针(不要将乳胶护套取下)刺入真空采血管,血
23、液会自动流入真空采血管中。2)采血完后,先把采血针从静脉血管中抽出,用无菌干棉签压住伤口,然后再从真空采血管中拔出管塞穿刺针。添加有抗凝剂的采血管须轻轻颠倒混匀6-8次,防止血液凝固。3)再次核对病人姓名和号码,并将一次性采血器材放入一次性利器盒中。4)取出采血垫枕上的卫生纸,换上新的一张,再用消毒剂擦手消毒,进行下一病人的采集。5)当使用多种试管采血时依不含添加剂管、抗凝管、促凝管次序进行,具体顺序如下:血培养瓶无添加剂红头管/分离胶黄头管蓝头管黑头管绿头管紫头管含促凝剂红头管其它6.2使用注射器采血1)操作者以左手拇指固定静脉穿刺部位的下端,右手持注射器,使针头斜面和针筒刻度向上,先以约与
24、皮肤呈30°的位置迅速刺入皮肤,然后适当降低角度穿破静脉壁穿入静脉腔中,见回血后,顺势将针头深入少许,以免采血时针头滑出,但不可用力深刺以免穿破静脉造成血肿。2)用右手食指将针头固定,左手缓缓抽动注射器内芯,至所需血量后停止,解开压脉带,嘱患者松拳,用无菌干棉签压住伤口,拔出针头。3)取出针头,将血液沿管壁缓缓注入试管中,防止产生泡沫,添加有抗凝剂的采血管须轻轻颠倒混匀6-8次,防止血液凝固。63注意事项:1)溶血对许多项目的检测产生干扰(可咨询我科相关技术人员),因此必须严格防止标本溶血,造成溶血的原因有压脉带捆扎时间过长,淤血过久;穿刺不顺组织过多;抽血速度太快;抗凝血用力振荡;
25、离心速度过快等。2)采血前应向病人耐心解释,以消除不必要的疑虑和恐惧心理。如遇个别病人进针时或采血后发生眩晕,应立即拔出针头让其平卧休息片刻即可恢复。若因低血糖诱发眩晕,可立即静注葡萄糖或嘱患者口服糖水即可。如有其它情况,应立即找医生共同处理。3)操作时避免溢出或溅泼血液。若血液溅出,立即用消毒液清洗消毒。警告:注意安全防护,所有的血标本都应视为有潜在的传染性。主要的危险来自于通过血液传播HIV、乙肝、丙肝等病毒,应采取标准预防措施。64毛细血管采血测定项目要求血量不多的情况下一般可采用手指穿刺采血。在下列情况下,手指穿刺采血更优于静脉采血:1)患者静脉表浅而脆薄。2)患者是儿童,且找不到合适
26、的静脉穿刺,或不配合静脉采血。然而,下列情况手指穿刺采血不适用:人在极度寒冷状态。手指穿刺采血收集血量不能达到实验要求。测试要求血量进行WBC分析,要求20ul血量6五手指毛细血管穿刺步骤1)核查病人后,在申请单和试管上统一编号(或贴条形码)。采血前,检验者用消毒剂擦手消毒。2)病人手指如果寒冷、发绀、肿胀或发炎时应该避免采血。如果病人手指寒冷需要采血,可以用温湿手巾或温水(大约42)预温35分钟,以促进血液流动。告知病人正确的姿势后,让病人的手能舒适地放在采血垫上。3)用拇指和食指紧捏住病人的无名指大约离指尖3cm处,轻轻按摩采血部位56次(使其自然充血)。4)用蘸碘伏的棉签清洁整个指尖,待
27、其干燥。5)一手拿无菌采血针,一手握紧病人的手指,显露最佳采血部位。6)使皮肤紧绷,快速而平稳的刺破皮肤。采完后,将采血针放入一次性利器盒。7)如果病人是0.5岁以下的儿童,一般采用大拇指采血,如果是成人,或0.5岁以上的儿童,穿刺部位应选择无名指的指腹。8)如果血液自动流出,用棉签擦去第一滴血,并擦干切口部。把使用后的棉签丢入“生物危害垃圾袋”(黄色垃圾袋)。9)如果血液不自动流出,可以把病人的手指朝下轻轻加压,以促进血液的流出,但注意不要把组织液挤出混入血液中。如果施压后血液还不能流出,换部位使用新的采血针再进行穿刺。10)手持微量毛细管,以3045度角接触穿刺部位,收集20ul血,用洁净
28、棉球擦干毛细管外侧。11)将微量毛细管中的血液立即冲入收集管中,混匀。12)血液采集完毕,用无菌棉签轻压于病人伤口上,等待血液停止流出。13)采血完成后,检验者用消毒剂擦手消毒,进行下一病人的采集。66脚跟毛细血管穿刺脚跟毛细血管穿刺采集血液法适用于1周岁以下的新生儿或婴儿。注意:行脚跟穿刺时应避免损伤,最好在儿科病房在医生指导下进行。注意事项:1)采血前,手必须用消毒剂擦手消毒。2)让病人安稳的坐好,防范患者眩晕或摔倒。3)当穿刺后,加压血液也不能流出,考虑再行穿刺时,必须更换新的采血针,旧的采血针已被污染,不能重复使用。4)当血液采集完毕时,用无菌棉签或纱布压于伤口上,并告知病人轻压伤口直
29、到止血为止,必要时可以提供一个创可贴。不提倡给小孩使用以免其可能会吞下导致窒息。5)每次采血前后,检验者必须用消毒剂擦手消毒,以防止交叉感染。6)操作时避免溢出或溅泼血液,若血液溅出,立即用消毒液清洗消毒。警告:所有的血标本都应视为有潜在的传染性,主要的危险来自于通过血液传播HIV、乙肝、丙肝等病毒。(四)不同目的的血液标本采集方法1、血液寄生虫检验标本采集(1)疟原虫1.1EDTA-K2抗凝剂静脉血1-2ml,由检验人员涂片。为保证涂片质量,推荐病房直接送EDTA-K2抗凝剂静脉血。1.2取静脉血困难的患者,可采集新鲜末梢血,薄涂片和厚涂片各三张,立即送检,并在1小时内完成检测,如果超过1小
30、时检测,在备注栏内提示处理时间。1.3在治疗之前和规则发热后期采集标本,即间日疟及三日疟患者应在发作后数小时至10余小时采血,此时,早期滋养体已发育至易于鉴别形态的晚期:恶性疟患者,应在发作后20小时左右采血。(2)微丝蚴2.1 EDTA-K2抗凝剂静脉血1-2ml,由检验人员涂片。为保证涂片质量,推荐病房直接送EDTA-K2抗凝剂静脉血。2.2采血时间以晚上21:0024:00时前后为宜。2、出、凝血功能及血流变检验标本采集血液和抗凝剂比例一定要准确。标本要及时送检,不能久置,抽血应顺利,避免溶血或凝血。病人在抽血前应禁食,避免脂血减低实验的敏感度。(1)血流变检测采集清晨空腹静脉血,用肝素
31、抗凝。抗凝血置室温4h内完成测定。(2)凝血功能测定空腹采样,标本量要求准确,采样后充分颠倒混匀,试验前避免服用影响凝血功能的药物。(3)血小板凝集试验试验前7-10天内避免服用阿司匹林、保泰松、抗组胺制剂,吩噻嗪类、氯吡格雷、噻氯吡定等影响血小板功能的药物,试验当天禁用含咖啡因饮料,蓝帽真空管静脉采血。3、血气分析标本采集用1mL、2mL或5mL消毒注射器,按无菌手术抽取肝素0.2ml,然后将肝素来回抽动,使针管全部湿润,将多余肝素全部排出。注射器内死腔残留的肝素即可抗凝。皮肤消毒后穿刺股动脉、肱动脉或桡动脉,取2ml动脉血,不能有气泡。抽出后用一块小橡皮封针头,隔绝空气。将注射器放在手中双
32、手来回搓动,立即送检。三 、 尿液标本的采集方法(一)尿液标本的种类:1、晨尿:即清晨起床后第一次排尿时收集的尿液标本。如为睡眠8小时以上,又称卧位8小时尿液。这种标本尿液较为浓缩,可用于肾脏浓缩能力评价,有利于尿液形态学和化学成分分析。2、随机尿:即随时的尿液标本,这种标本不受时间限制,标本新鲜易得,最适合于门诊、急诊患者的筛检试验,以及隐血、酮体尿糖、尿淀粉酶等的试验。但此尿液标本易受多种因素的影响,致尿检成分的浓度降低或升高,造成临床结果的比对的混乱。3、负荷尿:为某种特殊需要,检查一定负荷后的尿。如葡萄糖负荷后的糖耐量试验、运动负荷后的运动后血尿、起立活动后的直立性蛋白尿。4、餐后尿:
33、通常收集午餐后至下午2时的尿液,这种尿标本,有利于检出病理性糖尿、蛋白尿或尿胆原。这是因为进餐后,胃肠道的负荷加重,减低了尿糖、尿蛋白的肾阈值。5、餐前尿:早、中、晚三餐前半小时至一小时排尿弃去,进餐前再留取尿标本检测尿糖。尿糖浓度反映餐前空腹的血糖平均水平。用于糖尿病治疗监测和疗效评价。6、计时尿:一般根据临床诊断或疾病观察的需要,按特定时间采集尿液标本。7、中段尿:适用于尿培养。标本采集前尽量憋尿,留取晨尿。先用肥皂和水彻底清洗,干净手巾擦干。女性病人撑开阴唇,彻底清洁外阴及阴唇,无菌纱布擦干,保证阴唇分开,手指不碰触清洁区域。男性病人应翻转包皮清洗。在不间断排尿过程中,弃去前段尿,以无菌
34、带盖杯留取中段尿。注意事项:1)容器要保证清洁,避免化学品和细菌污染,最好使用一次性尿杯。2)尿液标本要求新鲜,留取后2h内检验,否则应冷藏,测试前需复温,细菌培养应立即进行检验。3)定时尿亦即定量尿标本,必须留取规定时间内的全部尿液,时间开始的尿排净弃去,时间结束的尿排净收集,不得溢失,记录尿量,混匀后取40-50ml送检。(二)尿液标本的采集容器1、 一次性尿杯适用于门诊尿常规检测。2、 无菌带盖杯适用于尿培养。(三)尿液标本的采集方法1、 尿标本的一般采集方法(1)通常采集新鲜尿,门诊病人可采集随机尿,尿量至少10ml,避免月经、白带或精液等的污染。(2)收集后应立即检查,不要超过2小时
35、,如不能及时送检,应置4下冷藏保存,但冷藏时间不得超过6小时。(3) 从冰箱取出的尿标本应在室温中放置一定时间,使之温度平衡到室温后再行混匀,然后取样检测。因为冷藏后可能出现的一些结晶析出会影响结果。2、 24小时尿标本的采集方法患者上午8小时尿一次,将膀胱排空,弃去尿液。此后收集各次排出的尿液,直至次日上午8时最后一次排尿的全部尿液,记录尿量,混匀后取40-50ml送检。(四) 粪便、体液及生殖道标本采集方法1、 粪便标本采集:(1)培养的标本采用无菌容器,大便常规采用药袋或大便瓶。(2)应尽可能挑取含有黏液脓血等异常成分的粪便2-3g。外观无明显异常时,应于粪便内外多点取样。(3)无粪便排
36、出而又必须检验时,可用经无菌生理盐水或用增菌液湿润的直肠拭子插入肛门45cm(小儿23cm),轻轻转动一圈。擦取直肠表面的粘液后取出。盛于无菌试管或保存液中送检。(4)寄生虫标本检查:检查蛲虫时需要用透明薄膜拭子或棉拭子于清晨排便前拭取肛门四周,并立即镜检。(5)检查胆石、胰石、寄生虫体及虫卵计数时,应收集24h内粪便送检。注意事项:1)粪便标本要新鲜,最好在1小时内检验完毕,否则可因PH值改变及消化酶的作用等,使有形成分分解破坏及病原菌死亡而导致结果不准确。检查阿米巴滋养体时,应于排便后立即检验,冬季还需对标本进行保温处理。2)不能将标本置于吸水纸中送检,如用棉棒取标本,忌用棉球一侧。避免稀
37、便中有形成分吸入棉球,造成假阴性结果。3)潜血试验时患者应素食3天。2、 痰液标本检验(1)用清水嗽口数次,用力自气管深部咳出痰液至一次性痰盖杯中。(2)痰液理学检验以清晨第一口痰标本最适宜。(3)细胞学检验以上午9-10时留痰最好。(4)用于细菌培养的标本,必须无菌采集,并先用无菌水漱口,以避免口腔内正常菌的污染。注意事项:1)痰液标本的采集以清晨为佳,此时患者痰量较多且含菌量也较多。2)咳嗽时应尽量避免唾液及鼻咽部分泌物混入,以减少污染。3)若患者痰量较少,需要检查痰中结核杆菌,可留取多口痰,但不宜超过10ml。3、 脑脊液标本采集(1)由医生采集,通常采用腰椎穿刺,必要时行小脑延髓池和脑
38、室穿刺。穿刺时皮肤消毒必须彻底。(2)脑脊液穿刺的时机与疾病有关,化脓性脑膜炎于发病后1-2d、病毒性脑膜炎于发病后3-5d、结核性脑膜炎于发病后1-3周,疱疹性脑膜炎于流行性感冒前驱症状期开始后5-7d穿刺采集标本。(3)穿刺成功后立即测定脑脊液压力,然后留取脑脊液标本于3个无菌试管中,每个试管1-2ml。(申请分枝杆菌培养的标本不宜低于1.0ml)。第一管做病原生物学检验,第二管做化学和免疫学检验,第三管做理学和细胞学检验。(4)标本采集后应立即送检,并于1h内检验完毕。因标本放置过久,可造成细胞破坏、葡萄糖等物质分解、细菌溶解等,影响检验结果。脑脊液标本应尽量避免凝固和混入血液。(5)注
39、意事项:当颅内出血、感染或肿瘤,颅内压升高,穿刺有一定的危险性;必要时可给予适量的渗透性利尿剂(如20%甘露醇),降低颅内压后穿刺并减少取材量,以免诱发脑疝。4、 浆膜腔积液标本采集(1)浆膜腔积液包括胸水、腹水、心包液、关节液及鞘膜液等。(2)穿刺成功后,留取中段液体于无菌的容器内。常规检查需要留取50ml,理学检查、细胞学检查和化学检查各留取2ml,厌氧菌培养留取1ml,结核杆菌检查留取5ml-10ml。(3)由于积液极易出现凝块、细胞变性、细菌破坏和自溶等,所以留取标本后应及时送检,不能及时送检的标本可加入适量乙醇以固定细胞成分。理学检查和细胞学检查宜采用EDTA-Na2抗凝,化学检查宜
40、采用肝素抗凝。5、 精液标本采集(1)采集标本前应禁欲3-5天,采前排净尿液。(2)将一次射出的全部精液直接排入洁净、干燥的容器内(不能使用乳胶避孕套)。(3)采集微生物培养标本须无菌操作。(4)送检时间不超过1小时。6、淋病奈瑟菌涂片(1)一般由医生或护士采集。(2)男性患者,洗净尿道口,用手指由后向前挤出脓液滴于载波片上,如无分泌物,可用小拭子插入尿道1.5-2.5cm,待10-15s后在轻轻旋转数秒钟,取出涂片。(3)女性阴道分泌物或宫颈刮片,最好用不含润滑剂的窥镜取材,先拭去脓性分泌物,再用一无菌拭子伸入宫颈内1-2cm,并压出宫颈腺体分泌物,放置30s后,使拭子充分吸收分泌物再取出涂
41、片。 第三章 标本采集方法一 、血液检验标本采集方法:血液检验标本分为全血、血浆、血清等。全血标本主要用于临床血液学检查,例如血细胞计数和分类、形态学检查等;血浆标本适合内分泌激素、血栓和止血检测血清标本多适合于临床化学和免疫学的检测。按照血标本采集部位的不同,分为静脉血、动脉血和毛细血管血三种。绝大多数检查采用静脉血,少数检查如血气分析、乳酸和丙酮酸测定等需要采集动脉血,毛细血管血主要用于各种微量法检查或大规模普查。静脉血是最常用的实验室检查标本,真空采血法是最好的静脉血采集技术。基本原理是双向针的一端插入真空试管内,另一端在持针器的帮助下刺入静脉,血液在负压作用下自动流入试管内。由于在完全
42、封闭状态下采血,避免了血液外溢引起的污染,并有利于标本的转运和保存。标准真空采血管采用国际通用的头盖和标签颜色显示采血管内添加剂种类和检测用途,可根据需要选择相应的盛血试管。(一)静脉血采集方法、注意事项和采集样品所用材料的安全处置:1、止血带或压脉器:采集静脉血时,止血带压迫静脉时间不宜过长,以不超过 40秒为宜,否则容易引起淤血、静脉扩张,并且影响某些指标的检查结果,如乳酸升高、pH 值降低、K+、Ca2+、肌酸激酶升高等。2 、采血时间与部位:大多数化验检查要求清晨、空腹、采集静脉血应尽可能避免在输液同时取血,输液不仅使血液稀释,而且对实验室检查结果发生严重干扰,特别是血糖和电解质。3
43、、避免溶血、杂质污染:采血器具必须无菌、干燥、洁净避免特别用力抽吸和推注、避免化学污染和细菌污染引起的溶血。因为红细胞的某些成分与血清(浆)不同,样本溶血可使红细胞某些成分释放,影响实验室检查结果。4、血样的采集:血样要求在每一天的同一时间采集,理想的时间是早晨 7:00到 8:00,尤其是监测为目的时,更要保证标本采集时间的统一。最后一次食物和液体摄入应在前一天下午 6:00 到7:00 (急诊检验例外)。血样采集应在不服药期间,如在早晨服药前。血样采集时,患者应仰卧位,采血点应在同一静脉区,通常为手臂静脉。5、标本采集后须立即送检,放置过久影响检验结果。当取血不顺利时,切忌在同一处反复穿刺
44、,易导致标本溶血或有小凝块,影响检测结果。6、采集血培养标本时应先注射厌氧瓶,尽量减少接触空气时间。7、微量元素测定采集标本的注射器和容器不能含游离金属。8、采集样品所用材料的安全处置:使用后的采血针、注射器针头等锐器物应当直接放入不能刺穿的利器盒内或毁型器内进行安全处置,禁止对使用后的一次性针头复帽,禁止用手直接接触使用过的针头、刀片等锐器物注射器针筒、棉签等其他医疗废物放入黄色医疗废物袋中,医疗废物和生活垃圾分类收集存放。消毒毁形后的医疗废物必须交给指定的医疗废物处理厂,不得擅自废弃。(二)临床化学/免疫检验标本临床化学/免疫检验多用非抗凝血标本,最好使用真空负压采血管。标本采集主要注意事
45、项有:1、化学项目大多数需要空腹采静脉血,多个单项化学检测项目组合检验时一般可采 l管血;2、采血量视检查项目多少不同而异,通常为4.05.0ml;3、多个组合检测项目同时采血时应按下列顺序采血:血培养无添加剂管凝血管有添加剂管有添加剂管的顺序为:橼酸盐管肝素管EDTA管草酸盐氟化钠管4、不论是抗凝血还是非抗凝血,为了缩短血清或血浆与血细胞的接触时间,血液标本收集后,须尽可能早地将血清或血浆从全血中分离出来,避免由此而影响检验结果的准确性。从血液标本采集开始,必须在2h内将全血处理为血清或血浆。(1)血清(非抗凝血):采血后标本于 2225(室温)1530min 后可自行(自发)完全凝固,禁用
46、木棍和玻棒等剥离凝块冷藏标本凝集较慢,加促凝剂者凝集加快。(2)血浆(抗凝血):应采用抗凝管采血,采血后立即颠倒混合 510 次,采血后数分钟内可离心分离血浆。(3)冷藏标本:用于稳定血液中温度依赖性成分(抑制细胞代谢)的检测项目,标本于 28冷藏(标本采集后立即置于冰箱中,冷藏必须充分);标本需冷藏的测定项目有:儿茶酚胺、胃泌素、甲旁素、PH血气、NH3、乳酸、丙酮酸等。全血标本一般不冷藏,血钾测定标本冷藏不得>2h。全血标本切忌冷冻。(4)代谢抑制剂和防腐剂的应用:用于抑制细胞代谢。血标本中加入氟化钠后,血细胞未分离情况下血标本中Glu,2225稳定24h28稳定48h;氟化钠不适用
47、于新生儿及儿童的Glu测定(因儿童PCV高,细胞糖酵解难以控制);氟化钠一麝香草酚混合剂不适合酶学检测(因氟化钠一麝香草酚混合剂抑制酶活性));甲醛草酸钾抗凝保存剂不适用于血糖测定。(三)红细胞沉降率(血沉,ESR)检测标本静脉采集枸橼酸钠(109mmolL,即32.06gL)抗凝血(枸橼酸钠抗凝管采血),黑帽管。采血注意事项:1、单独采1管血,准备采血至2 ml刻度线(抗凝剂:全血=1:4);2、采血后立即上下颠倒混合510 次;3、采血后应尽快送检(必须 2h内检测)。(四)血常规(全血细胞分析)检验标本一般用EDTA 1.52.2mgml抗凝(EDTA抗凝采血管-紫帽管)。采血注意事项:
48、1、采血后立即上下颠倒混匀,510次不可用力震荡;2、应按抗凝管刻度采血至 2ml,可不用空腹;3、采血后应尽快送检(需显微镜观察形态的标本采血后应及时推片固定,因为超过 2 小时WBC形态会发生改变);(五)75克葡萄糖耐量试验(OGTT)/胰岛素释放试验/C-肽释放试验1、病人准备:试验前3日,每日进食碳水化合物量不低于 250-300 克,且维持正常活动,影响试验的药物(如:咖啡因、口服避孕药、水杨酸盐等)应在3 日前停用,试验前病人应 1016小时不进食。2、标本采集:临床上常用方法是清晨抽空腹血后,口服 75 克葡萄糖,再于给糖后 0.5、1、2、3 小时各采血2ml /1次(共5次
49、)。3、标本保存:采血后1小时内分离血清并及时冷藏送检或采用血糖专用抗凝管采血,于 28保存。(六)T细胞亚群标本采集及注意事项1、标本类型:EDTA 1.52.2mgml抗凝(EDTA抗凝采血管-紫帽管)。2、标本量:2ml。3、标本保存:采血后应尽快送检,常温放置不得冷藏。(七)微量元素检测标本采集要求1、采血时不能戴乳胶手套(对锌有污染),可使用“PE”(塑料)手套(或不戴手套把手洗干净) 。2、橡皮塞对锌有污染,故普通采血管不可使用,建议使用本中心提供的专用管 (专用管有三种,贴红标签管为铅、硒专用管,即全血管,内有肝素;贴蓝标签管为血浆分离管,内有肝素;贴黄标签管为锌铜铁钙镁专用管,
50、即血浆管)。3、使用专用管前,请检查红、蓝色标签管中是否有肝素(液体或白色晶体粉末),开盖前请轻磕管底,将盖子上吸附的肝素弹下。4、采集方法:采静脉血 2.53mL,将 0.5mL 血液注入全血管(红标签管),粘上条形码,用于血铅和血硒的检测;将剩余2.02.5mL血液注入血浆分离管(蓝标签管),立即轻轻颠倒混匀,以 2000r/min离心 5分钟,再吸取血浆(约 1mL)至血浆管(黄标签管),粘上条形码,用于检测锌铜铁钙镁;最后将全血管(红标签管)和血浆管(黄标签管)装入自封袋送检。5、如不能及时送检,应放置2-8冰箱保存。6、溶血对结果影响较大,应尽量避免。若血浆为溶血标本,视为不合格标本
51、。(八)基因检测标本采集要求 1、所有用于基因诊断的标本必须用无菌试管或容器留取,严禁使用肝素抗凝管,采集标本时注意无菌操作。2、为避免污染,送检基因诊断标本项目需单人单项目单管。3、采集方法:(1)血液标本抽取病人静脉血,置无菌试管中室温自然凝固或 2000 转/分离心,取分离出的血清置 28保存,不超过24小时,等待艾迪康工作人员接收;血清标本不宜反复冻融;(2)女性分泌物标本 分泌物标本采样应在非月经期进行;采样前 3 天内不使用阴道内药物,不冲洗阴道;24小时内不应有性行为; 采集时先用棉签将宫颈口或尿道口过多的分泌物轻轻擦去,更换棉拭子,将棉拭子伸入宫颈,通过上皮交界处,旋转 35
52、周,以保证取得较多的柱状上皮标本,对于怀疑 HPV 感染的患者,尽量采集病变部位标本,可提高HPV的检出率。将取样后的棉拭子放入配套的软管中,旋紧管盖; 男性分泌物标本:先清洁尿道口,将棉拭子伸入男性尿道 1cm,旋转 35 次获得标本,将取样后的棉拭子放入配套的软管中,旋紧管盖; 疱疹液或疣体标本:对于生殖器或肛周有疣状体增生,怀疑为尖锐湿疣者,采集疣体表面脱落细胞。用生理盐水润湿棉拭子,用力来回擦拭疣状组织表面三次,取得脱落细胞。将取样后的棉拭子放入配套的软管中,旋紧管盖。二 、尿液常规检验标本采集(一)尿标本种类按检查目的,常可采用下列标本:1、晨尿:最好,安静状态下留取清晨第一次尿,该
53、标本为浓缩尿其细胞和管型等形态完整,适合做各种有形成分的检查和尿蛋白、尿糖等项目的测定。2、随机尿:较常用,适用于门诊和急诊病人常规检验结果易受多种因素影响。3、空腹或餐后尿:适用于糖尿病、尿胆原、尿蛋白等的检查。4、24h尿:用于尿液成分定量检查分析:(1)24h 尿采集方法:留尿当日早晨 8 时排空尿液,之后每次排尿均收集于一大容器内至次日早晨 8时最后一次尿液共24小时之间的所有尿液全部收集于洁净容器内。在收集期内每次尿液标本均应放冰箱(28)或阴凉处保存全部收集完毕测量并记录 24h总尿量,混匀后取 20-30毫升置于有盖容器内送检即可。(2)24h尿可用于检测Cr、BUN、K、Na、
54、CL、Ca、P、UPR、UAER等5、特殊实验尿(如 3h、8h、12h 等计时尿和餐后尿等),则应按医嘱要求进行留尿,并注明用药时间,便于分析比对。6、清洁尿(中段尿、导管尿、膀胱穿刺尿):用于病原微生物学培养、鉴定和药敏。(二)尿液标本收集容器要求1、清洁、干燥、有盖、便于标记和转送、一次性使用,有较大开口便于收集;2、避免阴道分泌物、精液、粪便等污染,还应注意避免烟灰、纸屑等异物混入;3、无干扰化学物质(如表面活性剂、消毒剂)混入,不可使用未经洗涤的装药物或试剂的器皿收集标本;4、能收集足够尿液,最好大于50 ml,如收集定时尿,容器应足够大,并加盖,必要时加防腐剂;5、如需培养应在无菌
55、条件下,用无菌容器收集中段尿液。(三)尿液采集方法尿液常规检查标本应按以下原则进行采集:1、尿液检验最好留取新鲜标本及时检查,否则尿液生长细菌,使其中的化学成分发生变化。新鲜晨尿最佳,以清晨第一次尿为宜,较浓缩,条件恒定,便于对比。门、急诊患者亦可随机留取。在留取24h或 12h尿液时,尿液标本最好至冰箱保存,也可根据检测目的加入防腐剂(本室未要求使用防腐剂)。2、尿标本的采集方法多采用自然排尿法,需要注意避免阴道分泌物、精液、粪便等污染;对自然排尿困难或需细菌培养者,可在无菌操作下用导尿法或膀胱穿刺法采集。3、尿中某些化学物质及有形成分不稳定,一经排出后易发生物理、化学变化;而尿中原有或污染
56、的细菌生长也可导致成分改变,如葡萄糖被分解。因此,采集的尿应加盖后尽快送检,在采集后 2h内完成有关检查。4、如不能及时送检或收集较长时段尿样,可采取化学防腐(不能用于微生物检查)、冷藏等保存措施;尿液标本冰箱可保存68h但细胞等有型成分会有破坏,会有结晶析出。5、根据不同检测目的选择不同的防腐剂:临床最多用的尿液防腐剂为:(1)甲醛(formalin),用于尿液有形成分检查,浓度为 400mgL尿液,即 40;(2)甲苯(toluene),常用于尿糖和尿蛋白等化学成分的定性或定量检查,520m1L尿液;(3)浓盐酸(hydrochloric acid),用于定量测定尿醛固酮、儿茶酚胺等,浓度为1m1L尿液。6、沉渣检查:清晨空腹第一次尿,应在1 h内送检。标本置于干燥、洁净的容器尿杯中,至少 10 m1。一般情况下,由患者自己采集中段尿。女性患者应清洗外阴部后留取。7、特殊试验外,晨尿或随机尿要留取中段尿送检,女性在
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