第5节 分离条件的选择

1、l R是用来反映柱子对相邻组分的分离效果，是用来反映柱子对相邻组分的分离效果，它是两峰重叠程度的量度，它是两峰重叠程度的量度，R值越大，表明值越大，表明相邻两组分分离越好。相邻两组分分离越好。l 通常用通常用R=1.5作为相邻两组分已完全分离的作为相邻两组分已完全分离的标志，即标志，即“基线分离基线分离”。第五节 分离条件的选择中国药典规定，定量分析时R1.5( P216 )前提前提定义式基础上，相邻两组分的定义式基础上，相邻两组分的n一致（假设）一致（假设） 22114kknR理理HLnuCuBAH/RRttkkKK121212一、色谱柱及使用条件的选择一、色谱柱及使用条件的选择 二、载气种

2、类和流速的选择二、载气种类和流速的选择三、其它操作条件的选择三、其它操作条件的选择三、分离条件的三、分离条件的选择选择一、一、色谱柱的选择色谱柱的选择根据根据“相似相溶相似相溶”的原则：的原则：1 1）分离非极性组分时，通常选用非极性固定相。各组分按）分离非极性组分时，通常选用非极性固定相。各组分按沸点顺序出峰，低沸点组分先出峰。沸点顺序出峰，低沸点组分先出峰。2 2）分离极性组分时，一般选用极性固定液。各组分按极性）分离极性组分时，一般选用极性固定液。各组分按极性大小顺序流出色谱柱，极性小的先出峰。大小顺序流出色谱柱，极性小的先出峰。 3 3）分离极性和非极性混合物，一般选用极性固定液。此时

3、）分离极性和非极性混合物，一般选用极性固定液。此时，非极性组分先出峰，极性组分后出峰。，非极性组分先出峰，极性组分后出峰。 4 4）醇、胺、水等强极性和能形成氢键的化合物的分离，通）醇、胺、水等强极性和能形成氢键的化合物的分离，通常选择极性或氢键性的固定液。常选择极性或氢键性的固定液。 5 5）组成复杂、较难分离的试样，通常使用特殊固定液，或）组成复杂、较难分离的试样，通常使用特殊固定液，或混合固定相。混合固定相。2. 2. 载气的选择（载气的选择（P217P217） 载气种类的选择应考虑载气种类的选择应考虑三个方面三个方面：载气对柱效的影响、：载气对柱效的影响、检测器要求及载气性质。检测器要

4、求及载气性质。 载气载气 M 大，可抑制试样的纵向扩散，提高柱效。载气流大，可抑制试样的纵向扩散，提高柱效。载气流速较大时，传质阻力项起主要作用，采用较小速较大时，传质阻力项起主要作用，采用较小 M 的载气（的载气（如如 H H2 2、HeHe），可减小传质阻力，提高柱效。），可减小传质阻力，提高柱效。在载气选择时，还应综合考虑载气的安全性、经济性及来在载气选择时，还应综合考虑载气的安全性、经济性及来源是否广泛等因素。源是否广泛等因素。载气流速的选择载气流速的选择 由图可见存在最佳流速（由图可见存在最佳流速（uopt）。实际流速通常稍大于）。实际流速通常稍大于最佳流速，以缩短分析时间。最佳流速

5、，以缩短分析时间。30 ml/minCBuCuBuHuCuBAHopt20dd3 3、柱温的选择、柱温的选择 P218P218 固定液的最高使用温度（超过该温度固定液易流失）固定液的最高使用温度（超过该温度固定液易流失） 选择原则：达到分离要求，尽可能采用低柱温，但以保留选择原则：达到分离要求，尽可能采用低柱温，但以保留时间适宜，峰形不拖尾为度。时间适宜，峰形不拖尾为度。 柱温柱温，被测组分的挥发度，被测组分的挥发度，被测组分在气相中的浓度，被测组分在气相中的浓度，K，tR，低沸点组份峰易产生重叠，低沸点组份峰易产生重叠，R下降，色谱峰变窄下降，色谱峰变窄变高。变高。 柱温柱温，R，分析时间，分析时间。 柱温一般选择在接近或略低于组分平均沸点时的温度。柱温一般选择在接近或略低于组分平均沸点时的温度。 组分复杂，沸程宽的试样，采用程序升温。组分复杂，沸程宽的试样，采用程序升温。程序升温程序升温 多组分宽沸程样品（混合物中高沸点组分与低沸点组分多组分宽沸程样品（混合物中高沸点组分与低沸点组分的沸点之差称为沸程）的沸点之差称为沸程） 柱温高：低沸点组分出峰快，色谱峰重叠柱温高：低沸点组分出峰快，色谱峰重叠 柱温低：高沸点组分出峰慢，峰展宽柱温低：高沸点组分出峰慢，峰展宽 在一个分析周期内，柱温随时间呈线性或非线性增加，在一个分析周期内，柱温随时间呈线性或非线性