实验室检查判读之细胞学制片

1、实验室检查判读 细胞学检查制片 制作人：余来森 简简 介介 现现 任任 深圳市瑞鹏宠物医疗服务连锁机构福强深圳市瑞鹏宠物医疗服务连锁机构福强分院院长分院院长 深圳市瑞鹏宠物医疗服务连锁机构主治深圳市瑞鹏宠物医疗服务连锁机构主治医师、牙科专家医师、牙科专家 深圳市瑞鹏宠物医疗服务连锁机构高级深圳市瑞鹏宠物医疗服务连锁机构高级讲师讲师 学学 历历 四川农业大学生物医学学士、国家执业四川农业大学生物医学学士、国家执业兽医师兽医师 研究方向研究方向 内分泌、老年性疾病、牙科、小动物急内分泌、老年性疾病、牙科、小动物急救救 联系方式联系方式 电话：电话： Email：yulsrp- 一一脱落细胞标本采集

2、脱落细胞标本采集二二自然分泌物采集自然分泌物采集三三自然分泌物主要指：呼吸道分泌自然分泌物主要指：呼吸道分泌物、浆膜腔积液、尿液、乳头溢物、浆膜腔积液、尿液、乳头溢液、阴道分泌物等。液、阴道分泌物等。 呼吸道分泌物采集： 颗粒状痰、血丝、血痰、泡沫痰、黄痰、铁锈痰制片：拉片固定：95%酒精 30-60分钟染色：Diff-Quik染色或HE染色胸腹水、尿等液体 细胞学制片存在的问题： 1、有效细胞数量少（造成漏诊） 2、细胞退变、结构不清（造成误诊断）液体标本制片规范 1、取液：轻轻的把送检液体上部倒掉，取下层液体，放入离心管。也可直接吸取底部液体。 2、转速1000/分，2-5分钟。 3、制片

3、方法：看沉淀物的量（液体的清亮度）多少而区别对待：（1）一般量制片： 吸入试管内放入离心机 离心完成后看底部白膜或最上层细胞方法1：吸干上清液方法二：倒去上清液，将试管倒立在卫生纸上方法三：用棉签吸去液体吸出沉淀 涂片方法一：吸管涂片（细胞较干时推荐） 涂片方法二：推拉法涂片涂片方法三：平拉法涂片 （推荐，但细胞较干时不要用） 结果：涂片是湿润的，但没有流动的液体 立即固定细胞很少的标本 放入50ML试管，离心 吸出沉淀物 涂片待自然干燥后不需固定，直接进行Diffeqiuckde B、C液浸染，免冲洗。注意动作要轻，不能用流动水冲洗，以免样本丢失 血多细胞量少的标本大量沉淀物 如果细胞沉淀物

4、多，可将吸管中的空气挤出，直接把吸管插入沉淀物中，轻轻吸出沉淀物，直接涂片。沉淀物的上层没有或很少有沉淀物 吸取上层沉淀物，放入25%酒精或冰醋酸酒精液内（25ml酒精+10ml冰醋酸+65ml水）内，打匀，再离心沉淀。然后，吸取沉淀物，涂片固定。 需要注意的是，处理后的细胞形态与排列方式都会发生不同程度的改变，所以，不是可诊断细胞量少，尽可能不用。液基细胞学也是如此。5X 未经处理的胸水5X 处理后的胸水 但是，经过处理的胸腹水细胞多多少少总有褪变，因此，不是血液太多，细胞成份太少，一般不采用破红细胞法。脱落细胞制片的关键 立即固定： 当细胞涂片完成后，应立即放入95%酒精液体内固定，至于固

5、定液：如甲醇、酒精乙醚液等效果无明显差异。细胞的褪变主要原因不是固定液的种类，而是在制片过程中空气的氧化过程-干燥。干固定湿固定 固定时间：5分钟即可。 剩下的送检液体不要立即倒去，等阅片完成后，看看需不需要再制片做免疫组化或制成组织块。（可放在冰箱内，也可放在室温状态下24小时以上）细胞涂片40X CK pan40X CK1840X CK1940X Calretinin染色1、从固定液拿出后，不经水洗，立即放入、从固定液拿出后，不经水洗，立即放入 苏木素染色苏木素染色3-5分钟。分钟。2、水洗。、水洗。3、1%盐酸酒精分化（不能用盐酸酒精分化（不能用1%盐酸水溶盐酸水溶液分化）。液分化）。4

6、、温水蓝化。、温水蓝化。5、伊红染色、伊红染色 1-2 秒秒6、75%、85%、95%（2道）、道）、100（2道）道） 酒精脱水。酒精脱水。7、二甲苯透明。、二甲苯透明。8、封片。（不能干燥，否则会引起细胞收、封片。（不能干燥，否则会引起细胞收缩和黑色空气结晶）缩和黑色空气结晶）细胞蜡块制作 离心后吸出上清液 轻轻沿管壁加入95%酒精，细胞量少的话， 可用 0.5ml离心管离心，加入琼脂固定30分钟后，用尖头的硬签轻轻将沉淀物挑出 常规脱水 包埋细胞团块切片外貌细胞团块切片细胞切片 CD3细胞切片 CD45RO第二节第二节 针吸细胞学检查针吸细胞学检查 一、一、FNACFNAC的基本概念的基

7、本概念 FNAC FNAC是使用普通注射针头（外径是使用普通注射针头（外径0.6-0.9mm0.6-0.9mm）及针管（）及针管（5-20ml5-20ml）, ,刺入病刺入病变区域内，通过提插针方式将病灶内的变区域内，通过提插针方式将病灶内的细胞或小组织块切割下来，同时借助针细胞或小组织块切割下来，同时借助针管内负压将其吸出，涂片及染色后在光管内负压将其吸出，涂片及染色后在光镜下阅片，最后完成病理诊断的一种活镜下阅片，最后完成病理诊断的一种活检方法。检方法。二二针吸标本采集原理及穿刺器的改进针吸标本采集原理及穿刺器的改进三三穿刺原理穿刺原理四四穿刺针准确进入病变部位后强有力穿刺针准确进入病变部

8、位后强有力切割与足够负压吸取过程的同步进切割与足够负压吸取过程的同步进行。行。五五穿刺器的改进穿刺器的改进三三针吸检查应用范围针吸检查应用范围四四经体表可触及到的肿块的检查：头经体表可触及到的肿块的检查：头颈部、口腔、躯干部、四肢部、会颈部、口腔、躯干部、四肢部、会阴部等可触及的肿块。阴部等可触及的肿块。五五在影像学引导下或手术探查时对脏在影像学引导下或手术探查时对脏器肿块的检查：呼吸道、消化道、器肿块的检查：呼吸道、消化道、泌尿道、生殖道等。泌尿道、生殖道等。3.3.恶性肿瘤患宠已失去手术机会，放恶性肿瘤患宠已失去手术机会，放疗或化疗前不能手术活检的。疗或化疗前不能手术活检的。4.4.无快速

9、切片的条件，可以在手术中无快速切片的条件，可以在手术中行针吸，确定良、恶性。行针吸，确定良、恶性。 四四标本采集原则标本采集原则五五解除宠主和患宠恐惧心理。解除宠主和患宠恐惧心理。六六暴露较好，邻近无重要血管、神经和脏暴露较好，邻近无重要血管、神经和脏器。器。七七尽量针吸原发灶之肿块或淋巴结。尽量针吸原发灶之肿块或淋巴结。八八按淋巴结肿大出现的时间先后，宜选择按淋巴结肿大出现的时间先后，宜选择较晚肿大的淋巴结。较晚肿大的淋巴结。5.5. 尽量不要选择经放疗或药物局部治尽量不要选择经放疗或药物局部治疗的部位进行针吸疗的部位进行针吸 6.6. 不致引起严重的并发症。不致引起严重的并发症。7.7.

10、一般体表肿块穿刺尽量不用麻醉。一般体表肿块穿刺尽量不用麻醉。8.8. 睾丸及附睾针吸时尽可能用睾丸及附睾针吸时尽可能用7575酒酒精消毒，慎用碘酒消毒。精消毒，慎用碘酒消毒。 五五 针吸检查前的病情调查针吸检查前的病情调查六六 全身状况了解：呼吸、循环、神经、全身状况了解：呼吸、循环、神经、造血系统状况。造血系统状况。七七 局部病情了解：肿块发生时间、生长局部病情了解：肿块发生时间、生长速度、痛感。速度、痛感。八八 了解影像学、化验资料及相关病史。了解影像学、化验资料及相关病史。九九 重视签字手续重视签字手续( (特殊检查知情同意书特殊检查知情同意书) )，预防医患纠纷中的被动局面。预防医患纠

11、纷中的被动局面。 六、针吸标本采集程序六、针吸标本采集程序体位的选择体位的选择 穿刺点的选择穿刺点的选择 针吸部位的固定针吸部位的固定 针吸操作步骤及方法针吸操作步骤及方法几种特殊肿块的针吸几种特殊肿块的针吸常见针吸并发症常见针吸并发症1.1. 体位的选择：体位的选择：2.2. 站位：适用于头颈部、肩背部。站位：适用于头颈部、肩背部。3.3. 仰位：适用于腹部。仰位：适用于腹部。4.4. 侧位：适用于四肢、会阴部、直侧位：适用于四肢、会阴部、直肠。肠。2.2.穿刺点的选择：穿刺点的选择：3.3.选择易暴露易进针的部位。选择易暴露易进针的部位。4.4.选择距重要血管神经脏器较远的部位。选择距重要

12、血管神经脏器较远的部位。5.5.选择对疼痛相对不敏感的区域。选择对疼痛相对不敏感的区域。6.6.遇软硬不一的肿块选择较硬处。遇软硬不一的肿块选择较硬处。7.7.较大的肿物进针不宜过深。较大的肿物进针不宜过深。8.8.遇囊性肿物在囊性液吸出后，注意对边缘遇囊性肿物在囊性液吸出后，注意对边缘处穿刺。处穿刺。 肿块要暴露清楚，仔细检查需要针吸肿块要暴露清楚，仔细检查需要针吸的肿块大小、硬度、深浅、活动度及的肿块大小、硬度、深浅、活动度及与周围组织或重要脏器的关系，以便与周围组织或重要脏器的关系，以便选择进针部位、方向和深度。选择进针部位、方向和深度。消毒与麻醉。消毒与麻醉。3.3.针吸部位的固定：针

13、吸部位的固定：4.4.拇、食（中）两指固定法：适用于拇、食（中）两指固定法：适用于3cm3cm肿肿物。物。5.5.食、中两指固定法：适用于直径食、中两指固定法：适用于直径1 12.5cm2.5cm结节。结节。6.6.单指固定法，右手小指绷紧体表皮肤及良单指固定法，右手小指绷紧体表皮肤及良好的支点：适用于直径小于好的支点：适用于直径小于1cm1cm结节。结节。4.4.针吸操作步骤及方法针吸操作步骤及方法5.5.肿块固定后，右手持注射器，针肿块固定后，右手持注射器，针尖与皮肤角度视部位而定尖与皮肤角度视部位而定( (图图) )。肿块较小时肿块较小时( (1cm)1cm)，吸取其中心，吸取其中心部位

14、；肿块较大者部位；肿块较大者( (5cm)5cm)，为避，为避免吸出中心坏死物，尽量从周边免吸出中心坏死物，尽量从周边取材。取材。右手将针栓后拉，保持负压状态，在肿块内右手将针栓后拉，保持负压状态，在肿块内将针进退数次，见针和注射器连接处少量液将针进退数次，见针和注射器连接处少量液体，消除负压后退针。（图）体，消除负压后退针。（图） 用消毒棉签压迫止血数分钟。用消毒棉签压迫止血数分钟。迅速将吸出物涂在载玻片上均匀推开。迅速将吸出物涂在载玻片上均匀推开。 5.几种特殊肿块的针吸几种特殊肿块的针吸6.囊肿：囊内容物应尽量吸尽。囊肿：囊内容物应尽量吸尽。7.富于血管的靶器官：如甲状腺或富于血管的靶器

15、官：如甲状腺或血管丰富的肿瘤，负压不宜过大，血管丰富的肿瘤，负压不宜过大，如有血液进入针筒，针吸基本失如有血液进入针筒，针吸基本失败，需换部位再吸。败，需换部位再吸。8.乳腺及胸壁小肿块。乳腺及胸壁小肿块。涂片观察方式涂片观察方式6、针吸的常见并发症、针吸的常见并发症 出血或血肿、继发感染、虚脱或晕厥、出血或血肿、继发感染、虚脱或晕厥、气胸。气胸。七、针吸标本的肉眼观察与判断七、针吸标本的肉眼观察与判断颗粒样肉浆样物：常为实质性的组织如癌、肉颗粒样肉浆样物：常为实质性的组织如癌、肉瘤，有时也见于良性肿瘤。瘤，有时也见于良性肿瘤。粘液样物：富含粘液的肿瘤如腺癌、混合瘤；粘液样物：富含粘液的肿瘤如腺癌、混合瘤；也见于甲状腺瘤样病变、乳腺纤维