土壤中分解尿素的细菌的分离和计数时学习教案

1、会计学1土壤土壤(trng)中分解尿素的细菌的分离和计中分解尿素的细菌的分离和计数时数时第一页，共20页。自主学习，发现自主学习，发现(fxin)(fxin)问题问题阅读课本阅读课本P23-P26，根据导学案的，根据导学案的提示，完成以下提示，完成以下(yxi)问题。问题。1.1.实验设计包括实验设计包括(boku)(boku)哪些哪些内容？内容？2.2.实验设计的流程是什么？实验设计的流程是什么？3.3.每一步是如何操作的？注意事每一步是如何操作的？注意事 项是什么？项是什么？4.4.如何进行结果分析与评价？如何进行结果分析与评价？第2页/共20页第二页，共20页。小组讨论，启发小组讨论，启

2、发(qf)(qf)思维思维小组互对答案，对有疑问小组互对答案，对有疑问(ywn)的问题相互讨论，的问题相互讨论，并确定发言人，按导学案并确定发言人，按导学案上的要求完成本组的问题上的要求完成本组的问题展示。展示。第3页/共20页第三页，共20页。实验设计包括对、和，以及等的综合(zngh)考虑和安排。实验实验(shyn)方方案案所需仪器所需仪器(yq)材料材料用具用具药品药品具体的实施步骤具体的实施步骤时间安排时间安排学生展示，老师点拨，突破难学生展示，老师点拨，突破难点点第4页/共20页第四页，共20页。一、实验设计流程一、实验设计流程(lichng)土壤(trng)取样制备(zhbi)培养

3、基样品稀释取样涂布微生物的培养与观察细菌计数第5页/共20页第五页，共20页。注意事项：取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在注意事项：取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用使用(shyng)前都要灭菌。前都要灭菌。二二.实验实验(shyn)的具体操作及注的具体操作及注意实项意实项 从从肥沃、湿润、酸碱度接近中性肥沃、湿润、酸碱度接近中性的土壤中取样。先铲的土壤中取样。先铲去表层土去表层土3cm3cm左右，再在距离地表左右，再在距离地表3cm-8cm3cm-8cm处取样，将样处取样，将样品装入事先准备好的信封中。品装入事先准备好的信封中。制备以尿素为唯一氮源的制备以尿素为唯一氮源的选择培养基和牛肉

4、膏蛋白选择培养基和牛肉膏蛋白胨培养基胨培养基。注意事项：倒平板时要冷却到注意事项：倒平板时要冷却到50 ，且要，且要在在酒精灯火焰旁酒精灯火焰旁进行。进行。第6页/共20页第六页，共20页。第7页/共20页第七页，共20页。测定土壤(trng)中细菌的数量，一般选用104 ，105 ，106 测定放线菌的数量，一般选用103 ，104 ，105 测定真菌的数量，一般选用102 ， 103 ， 104 为什么分离不同为什么分离不同(b tn(b tn) )的微生物要采用不同的微生物要采用不同(b (b tntn) )的稀释度？的稀释度？第8页/共20页第八页，共20页。注意事项注意事项： 实验时

5、要实验时要对培养皿作对培养皿作好好(zu ho)(zu ho)标记。注明标记。注明培养基类型培养基类型、培养时间、培养时间、稀释度、稀释度、培养物等。培养物等。注意事项：注意事项： 涂布器和移液管要保持涂布器和移液管要保持(boch)无菌。无菌。如果得到了如果得到了2个或个或2个以上菌落数目在个以上菌落数目在30300的平板，的平板，则说明稀释操作比较成功，并能够进行菌落的计数，如果则说明稀释操作比较成功，并能够进行菌落的计数，如果同一稀释倍数的三个重复的菌落数相差较大，表明试验不同一稀释倍数的三个重复的菌落数相差较大，表明试验不精确，需要重新实验。精确，需要重新实验。第9页/共20页第九页，

6、共20页。第10页/共20页第十页，共20页。第11页/共20页第十一页，共20页。第12页/共20页第十二页，共20页。第13页/共20页第十三页，共20页。内容内容现象现象结论结论有无杂菌污有无杂菌污染的判断染的判断对照的培养皿中无菌对照的培养皿中无菌落生长落生长培养物中菌落数偏高培养物中菌落数偏高菌落形态多样，菌落菌落形态多样，菌落数偏高数偏高选择培养基选择培养基的筛选作用的筛选作用选择培养基具有筛选作用选择培养基具有筛选作用样品的稀释样品的稀释操作操作操作成功操作成功重复组的结重复组的结果果若选取同一种土样，统计结果应若选取同一种土样，统计结果应培养基未被杂菌污染培养基未被杂菌污染(w

7、rn)被杂菌污染被杂菌污染(wrn)被杂菌污染或被杂菌污染或混入其他氮源混入其他氮源牛肉膏培养基上的菌落牛肉膏培养基上的菌落数目大于选择培养基上数目大于选择培养基上的数目的数目得到三个或三个得到三个或三个以上菌落数目在以上菌落数目在30300的平板的平板接近接近第14页/共20页第十四页，共20页。第15页/共20页第十五页，共20页。3.3.在以尿素为唯一氮源的培养基中加入在以尿素为唯一氮源的培养基中加入(jir)(jir)酚红指示酚红指示剂的目的是剂的目的是( )( )A.A.筛选出能分解尿素的细菌筛选出能分解尿素的细菌B.B.对分离的菌种作进一步鉴对分离的菌种作进一步鉴定定C.C.作细菌

8、的营养成分作细菌的营养成分 D.D.如指示剂变蓝就能准确地认定该菌能分解尿素如指示剂变蓝就能准确地认定该菌能分解尿素当堂当堂(dn (dn tn)tn)检测检测1.1.能够测定样品活菌数的方法是能够测定样品活菌数的方法是( )( )A.A.稀释涂布平板法稀释涂布平板法 B. B.直接直接(zhji)(zhji)计数法计数法C.C.重量法重量法 D. D.比浊法比浊法2.2.下列操作步骤顺序正确的是下列操作步骤顺序正确的是( )( )土壤取样称取土壤取样称取10g10g土样，加入盛有土样，加入盛有90mL90mL无菌水的锥形瓶中无菌水的锥形瓶中吸取吸取0.1mL0.1mL土壤溶液进行平板涂布依次

9、稀释至土壤溶液进行平板涂布依次稀释至101、 102 、 103 、104 、105 、106 、107稀释度稀释度A.A. B. B.C.C. D. D.ACB第16页/共20页第十六页，共20页。4.(2016四川，四川，10)图甲是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程图甲是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程,请请据图回答下列问题：据图回答下列问题：(1)图中选择培养基应以图中选择培养基应以_为唯一氮源为唯一氮源,鉴别培养基还鉴别培养基还需添加需添加_作指示剂，产脲酶细菌在该培养基上生长一作指示剂，产脲酶细菌在该培养基上生长一段时间后，其菌落周围的指示剂将变成段时间后，其菌落周围的指示剂将变成_色。色。

10、(2)在在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为105的土壤样的土壤样品溶液品溶液(rngy)0.1 mL，培养一段时间后，平板上长出的细，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为菌菌落数分别为163、156、262、178和和191。该过程采取的。该过程采取的接种方法是接种方法是_ ，每克土壤样品中的细，每克土壤样品中的细菌数量为菌数量为_108个；与血细胞计数板相比，此计数方法个；与血细胞计数板相比，此计数方法测得的细菌数目较测得的细菌数目较_。尿素尿素(nio s)酚红酚红红红稀释稀释(xsh)涂布平涂布平板法板法 1.91.9少少第17页/共20

11、页第十七页，共20页。5.(20155.(2015浙江自选模块，浙江自选模块，1717节选节选) )某工厂为了生产耐高温植某工厂为了生产耐高温植酸酶饲料添加剂，对该酶菌株进行筛选，其流程如下图所示酸酶饲料添加剂，对该酶菌株进行筛选，其流程如下图所示。请回答下列问题：请回答下列问题：(1)(1)土壤悬液首先经土壤悬液首先经8080处理处理1515分钟，其目的是筛选出分钟，其目的是筛选出_。(2)(2)在无菌条件在无菌条件(tiojin)(tiojin)下，将经过处理的土壤悬液进行下，将经过处理的土壤悬液进行_，然后涂布于含有植酸钠的固体培养基上。培养后，然后涂布于含有植酸钠的固体培养基上。培养后

12、观察到观察到_(3)(3)筛选获得的菌株经鉴定后，将优良菌株进行液体扩大培筛选获得的菌株经鉴定后，将优良菌株进行液体扩大培养。培养时需要振荡，其主要目的是养。培养时需要振荡，其主要目的是_。液体培养。液体培养基与固体培养基相比，不含有的成分是基与固体培养基相比，不含有的成分是_。土样中的菌种筛选土样中的菌种筛选(shixun)(shixun)菌株鉴定菌株鉴定优良菌株扩优良菌株扩大培养大培养植酸酶提纯植酸酶提纯植酸酶固定化植酸酶固定化植酸酶特性分析植酸酶特性分析耐高温菌株耐高温菌株稀释稀释(xsh)单个菌落单个菌落供氧供氧琼脂琼脂第18页/共20页第十八页，共20页。课后作业课后作业(zuy)（一）空气中微生物