香椿叶中槲皮素的提取分离鉴定

1、香椿叶中槲皮素的提取分离与鉴定13应用化学刘子发香椿的营养价值 香椿的营养价值较高，除了含有蛋白质、脂肪、碳水化合物外，还有丰富的维生素、胡萝卜素、铁、磷、钙等多种营养成分。祖国医学认为，香椿味苦、性平、无毒，有开胃爽神、祛风除湿、止血利气、消火解毒的功效，故民间有“常食香椿芽不染病”的说法。现代医学及临床经验也表明，香椿能保肝、利肺、健脾、补血、舒筋。如香椿煎剂对肺炎球菌、伤寒杆菌、痢疾杆菌等有抑制作用；用鲜椿芽、蒜瓣、盐捣烂外敷，对治疮痛肿毒有较好疗效；民间用香椿煮水服用，治疗高烧头晕等病。槲皮素的结构与物化性质 槲皮素是一种多羟基黄酮类化合物，化学名为3，34，5，7- 五羟基黄酮，具有

2、多种生物学活性及很高的药用价值。槲皮素广泛存在于植物的花、叶、果实中，已知有 100 多种中草药中含有槲皮素，如槐米、槐花、丹皮、香椿叶、菊花、田基黄、车前子等。槲皮素，又名栎精，槲皮黄素，溶于冰醋酸，碱性水溶液呈黄色，几乎不溶于水，乙醇溶液味很苦。二水合物为黄色针状结晶（稀乙醇），在95-97C成为无水物，熔点314C（分解）。能溶于冷乙醇（1:290），易溶于热乙醇（1:23），可溶于甲醇、乙酸乙酯、冰醋酸、吡啶、丙酮等，不溶于水、苯、乙醚、氯仿、石油醚等，碱性水溶液呈黄色，几乎不溶于水，乙醇溶液味很苦。黄色针状结晶, 槲皮素属黄酮类化合物，多以甙的形式存在，经酸水解可得到槲皮素。可作为药

3、品，具有较好的祛痰、止咳作用，并有一定的平喘作用。槲皮素的药理作用抗氧化及清除自由基的作用抗氧化及清除自由基的作用。电离辐射作用于机体会产生大量自由基 , 引起包括脂质过氧化在内的一系列自由基反应。 过剩的自由基是有害的 ,能够导致细胞结构的改变和功能的破坏 ,甚至引起癌症、 衰老及心血管等许多疾病。 实验证明 ,黄酮类化合物对超氧阴离子 ( O2-)、羟自由基( OH) 和单线态氧 (1O 2 ) 均有良好的清除作用。抗癌作用抗癌作用。槲皮素对人卵巢癌、乳腺癌、白血病细胞、胃肠道肿瘤细胞均有增殖抑制作用。槲皮素对人卵巢癌细胞增殖有明显抑制作用 , 且具有可逆的时间、剂量依赖性。 抗凝血作用。

4、抗凝血作用。 人血小板细胞骨架主要由 F-肌动蛋白、肌动蛋白结合蛋白和 -辅肌蛋白组成 , 它们组成的微丝在血小板的变形、 颗粒释放、伸展和收缩中起着重要作用。保护心血管。保护心血管。槲皮素通过抑制内皮素 的释放 ，降低血管的紧张性，从而扩张血管达到降低血压的作用。天然产物常用基本提取方法煎煮法煎煮法,是将经过处理的药材,加入适量水加热煮沸次,使其有效成分煎出,这也是一种简便、常用的方法。浸渍浸渍法法,是最常见的简便浸出方法。渗渡法,是用流动的溶剂渗过药粉而进行提取。升华法升华法。近年来,一些新的提取分离技术己开始引入中药有效成分提取的研究中。这些新方法、新技术包括超声提取法、超临界流体提取法

5、、微波辅助提取法、半仿生提取法、酶法、反胶团溶剂提取法、双水相提取技术、空气爆破法、破碎提取法和液泛法等。许多研究结果表明,与传统方法相比,这些技术有产率高、纯度高、速度快、物耗能耗少等特点,有着广阔的研究和应用前景。本节将对超声提取法和超高压提取法进行较深入的介绍。萃取香椿粉末500g80%乙醇回流3h滤液滤渣(重复一次)水,石油醚氯仿母液水加热1.5h,乙酸乙酯萃取25%HCl萃余液乙酸乙酯溶液聚酰胺色谱分离乙酸乙酯溶液 水洗至中性蒸干样品适量乙醇溶液聚酰胺(140160目)柱依次水,20%,50%, 70% ,90%,乙醇梯度洗脱,浓缩浓缩液聚酰胺(140160目)柱常压层析,70 %,

6、90% 乙醇梯度洗脱,浓缩浓缩液聚酰胺(140160目）苯:甲醇(1:1)黄色流分黄绿色粉末浓缩鉴 定熔点315317 ，(分解)紫外灯下显兰色荧光，加AlCl3乙醇溶液萤光变黄绿色，盐酸一镁粉反应显红色，a-萘粉浓硫酸反应不显紫色。锆一枸橼酸反应：当加2%氯化锆甲醇液时显黄色，再加2 %橼酸甲醇液用水稀释黄色不褪。紫外光谱UV：max，nm，255，301sh 370(MeOH)；241sh，331，412(NaOMe)；271，342sh，446(AlCl3)；266，302sh，359，427(AlCl3HCl)；258sh，270，324，382(NaCAC)；260，386(NaCA

7、CH3BO3)，与槲皮素标准品的紫外光谱一致。红外光谱IR max cm-1 34593284(OH)，1670(c= 0)HPTLC(高效薄层层折)：展开剂为苯：乙酸乙酯：甲酸(40：10：5)，PATLC(聚酰胺薄膜层析)：展开剂为苯：甲醇(1：1)，所得斑点的Rf值与显色萤光皆与槲皮素标准品一致。根据以上论据确定该化台物为槲皮素。时间安排第一天取香椿叶粉末500g，在三口烧瓶中与80%乙醇加热回流3h，滤渣再重复一次，两次滤液分别用水：石油醚：氯仿为1：1：1萃取其中的黄酮类化合物，母液加入25%的盐酸加热1.5h，然后再用乙酸乙酯萃取。保留上层乙酸乙酯混合液。第二天 保留的乙酸乙酯溶液，用水洗至中性，蒸干得样品。加入适量乙醇溶解，在聚酰胺色谱柱上依次用20%，50%，70