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文档简介

1、核酸的化学一、是非题 1嘌呤碱分子中含有嘧啶碱结构。 2核苷由碱基和核糖以型的CN糖苷键相连。 3核苷酸是由核苷与磷酸脱水缩合而成,所以说核苷酸是核苷的磷酸酯。 4核苷酸的碱基和糖相连的糖苷键是CO型。 5核糖与脱氧核糖的差别是糖环的2位有无羟基。 6核苷酸的等电点的大小取决于核糖上的羟基与磷酸基的解离。 7在DNA双链之间,碱基配对A-T形成两对氢键,C-G形成三对氢键,若胸腺嘧啶 C2位的羰基上的氧原于质子化形成OH, AT之间也可形成三对氢键。 8任何一条DNA片段中,碱基的含量都是A=T,C=G。 9DNA碱基摩尔比规律仅适令于双链而不适合于单链。 10用二苯胺法测定DNA含量必须用同

2、源的DNA作标准样品。 11DNA变性后就由双螺旋结构变成线团结构。 12Tm值低的DNA分子中 (AT)高。 13Tin值高的DNA分子中(C-G)高。 14由于 RNA不是双链,因此所有的 RNA分子中都没有双螺旋结构。 15起始浓度高、含重复序列多的 DNA片段复性速度快。 16DNA的复制和转录部必须根据碱基配对的原则。 17某氨基酸tRNA反密码子为GUC,在mRNA上相对应的密码子应该是CAG。 18细胞内DNA的核苷酸顺序都不是随机的而是由遗传性决定的。 19RNA链的5 核苷酸的3羟基与相邻核昔酸的5羟基以磷酸二酯键相连。 20假如某DNA样品当温度升高到一定程度时,OD260

3、提高30,说明它是一条双链 DNA。 21核酸外切酶能够降解所有的病毒DNA。二、填空题1 核苷酸是由、和磷酸基连接而成。2 在各种RNA中含稀有碱基最多。 3Tm值高的DNA分子中的含量高。Tm值低的DNA分子中含量高。 4真核生物的DNA存在于,其生物学作用是。 5细胞内所有的RNA的核苷酸顺序都是由它们的决定的。 6将双链DNA放置在pH2以下或pH12以上,其OD260,在同样条件下单链 DNA的OD260。 7B型结构的DNA双螺旋,两条链是平行,其螺距为每个螺旋的碱基数为。 8DNA抗碱的原因是。 9将A、U、C和G四种核苷酸溶解在pH3.5的缓冲液中,从负极向正极进行电泳, 跑得

4、最快,跑得最慢。 10从Ecoli中分离的DNA样品内含有20的腺嘌呤(A),那么T,GC。 11某DNA片段的碱基顺序为GCTACTAAGC,它的互补链顺序应为。 12具有高度重复序列的DNA片段,如,具有中度重复序列的DNA片段,如和的基因,真核细胞的结构基因是序列。 13当温度逐渐升到一定高度时,DNA双链称为变性。当温度逐渐降低时,DNA的两条链,称为。 11DNA的复性速度与、以及DNA片段的大小有关。 15天然 DNA的负超螺旋是由于DNA双螺旋中两条链引起的,为手超螺旋。正超螺旋是由于DNA双螺旋中两条链引起的,为手超螺旋。 16tRNA的二级结构呈形,三级结构的形状像。三、选择

5、题 DNA的Tm与介质的离子强度有关,所以DNA制品应保存在: A、高浓度的缓冲液中 B、低浓度的缓冲液中 C、纯水中 D、有机试剂中 2在以下的修饰碱基中哪种在氢键的形成方面不同于和它相关的碱基: A、2-甲基腺嘌呤 B、5-甲基胞嘧啶C、5-羟甲基胞噙陵D、1-甲基鸟瞟吟 3热变性后的DNA:A、紫外吸收增加 B、磷酸二酯键断裂 C、形成三股螺旋 D、(G-C)含量增加4DNA分子中的共价键有:A、碱基与脱氧核糖 1位碳(C-1)之间的糖苷键。B、磷酸与脱氧核糖2位碳上的羟基(2-OH)之间的酯键。C、碱基与脱氧核糖 2位碳(C-2)之间的糖音键。D、磷酸与脱氧核糖1位碳上的羟基(2-OH

6、)之间的酯键。5发生热变性后的DNA复性速度与: A、DNA的原始浓度有关。 B、催化复性的酶活性有关。 C、与DN A的长短无关。 D、与DNA分子中的重复序列无关。6下面关于核酸的叙述除哪个外都是正确的: A、在嘌呤和嘧啶碱之间存在着碱基配对。 B、当胸腺嘧啶与腺嘌呤配对时,甲基不影响氢键形成。 C、碱溶液只能水解RNA,不能水解DNA。 D、在DNA分子中由氢键连接的碱基平面与螺旋轴平行。7下列过程与DNA的人工克隆无关的是: A、用专一性的限制性内切酶在特定的互补位点切割质粒DNA和供体 B、通过连接酶催化质粒DNA与供体DNA接合。 C、将重组后的DNA通过结合反应引入寄主细胞。 D

7、、常常根据载体所具有的抗药性来筛选含有重组DNA的细菌。8核酸分子中的共价键包括: A、嘌呤碱基第9位N与核糖第1位C之间连接的-糖苷键 B、磷酸与磷酸之间的磷酸酯键 C、磷酸与核糖第1位C之间连接的磷酸酯键 D、核糖与核糖之间连接的糖苷键9下列哪种物质不是由核酸与蛋白质结合而成的复合物: A、病毒B、核糖体C、Ecoli的蛋白质生物合成70S起始物 D、线粒体内膜10下列关于核糖体的叙述正确的是: A、大小亚基紧密结合任何时候都不分开。 B、细胞内有游离的也有与内质网结合的核糖体。 C、核糖体是一个完整的转录单位。 D、核糖体由两个相同的亚基组成。 11 Crick的摆动假说较好的描述了:

8、A、密码子的第三位变动不影响与反密码子的正确配对。 B、新生肽链在核糖体上的延长机理。 C、由链霉素引起的翻译错误。D、溶原性噬菌体经过诱导可变成烈性噬菌体。12分离出某种病毒核酸的碱基组成为:A27,G=30%,C=22%,T=21%,该病毒应该为: A、单链DNA B、双链DNA C、单链RNA D、双链RNA四、问答与计算: 1用RNase T1限制降解tRNA得到一个长度为13个核苷酸的片段,再用RNaseT1完全降解得到下列产物:(a)ApCpApGp;(b)pGp;(c)ApCpU;(d)ApApUpApGp。用RNasec I完全降解得到下列产物:(a)ApGpApApUp;(b

9、)pGpApCp;(c)U;(d)ApGpApCp ,请写出该片段的顺序。 2某一寡聚十六核苷酸,用RNaseT1降解得到:(a)ApUpUpCpCpGp;(b) ApCpUpCpGp;(c) pUpCpCpA;(d)Gp各一分子。用RNaseA降解得到:(a)1ApUp; (b)GpGpApCp;(c)GpUp;(d) 5Cp;(e)2Up;(f)1A。请写出该片段的顺序。3 根据下列性质判断某一均匀的DNA样品应有的结构:(a)可与甲醛进行反应,并且能作为DNA聚合酶的模板、热变性时A260增加;(b)可与硝化纤维膜结合;(c)在高离子强度介质中的沉降系数比在低离于强度介质中稍高;(d)变

10、性时在CsCI中的浮力密度增加约0.011gcm3;(e) 变性后经区带离心得到A和B两个片段。A被切开一个缺口产生C,在高离子强度介质中,C与A的沉降系数相等,在低离子强度的介质中比A低,无论在哪种情况下,C均比B高。4 DNA样品在水浴中加热到一定温度,然后冷至室温测其OD260,请问在下列情况下加热与退火前后OD260的变化如何?(a)加热的温度接近该DNA的Tm值;(b)加 热的温度远远超过该DNA的Tm值。 有一核酸溶液通过实验得到下列结果:(a)加热使温度升高该溶液的紫外吸收增加。迅速冷却紫外吸收没有明显的下降;(b)经CsCI梯度离心后,核酸位于1.77g/ml溶液层。(c)核酸

11、经热变性后迅速冷却再离心,原来的浮力密度1.77g/ml的区带消失,新带在1.72g/ml出现。此带的紫外吸收只有原来的一半。将离心管里的组分重新混合,通过适当温度处理进行退火,再离心后新带消失,1.77g/ml的原带又重新出现了。其紫外吸收与变性前相同。(d)用提高pH12然后中和到7的方法代替热变性重复(c)步骤,得到与(c)步骤的第一次离心后相同的结果,但经退火处理后1.72g/ml的区带不消失。根据以上现象推断该核酸样品的结构。 6如果Ecoli染色体DNA的75用来编码蛋白质假定蛋白质的平均分子量为60×103。请问:若Ecoli染色体大约能编码2000种蛋白质。求该染色体

12、DNA的长度是多小?该染色体DNA的分子量大约是多少?(以三个碱基编码一个氨基酸,氨基酸平均分子量为120u,核苷酸平均均分子量为640计算。) 7假定每个基因有900对核苷酸,并且有三分之一的DNA不编码蛋白质,人的一个体细胞(DNA量为6.4×109对核苷酸),有多少个基因?如果人体有1013个细胞那么人体DNA的总长度是多少千米?等于地球与太阳之间距离(2.2 ×109千米)的多少倍? 8根据同源蛋白质的知识,说明为什么编码同源蛋白质的基因(DNA片段)可以杂交? 9有一噬菌体的突变株其DNA长度为15m,而野生型的DNA长度为17m,问该突变株的DNA中有多少个碱基

13、缺失? 10用 RNaseT1降解纯 tRNA样品获得一条寡核苷酸片段,用蛇毒磷酸二酯酶完全水解。可产生pA,pC,pU和U,其比例是1:2:1:,根据这一信息和tRNA3端的特点能否推断tRNA3端的核百酸顺序。 11解释下列名词:(1)稀有碱基;(2)DNA超螺旋;u)DNA的增色和减色效应; (4)mRNA的帽子结构;(5)反密码子。答案一、是非题 1对。2对。3对。4错。S对。6错。7错错。9对。10错。11对。12对。13对。14错。15对。16对。17错。18对。19对。20对。21错。二、填空题 l碱基核糖 2tRNA 3(GC)(AT) 4核内携带遗传信息 5基因 6高不变 7

14、反向平行 54urn 10 8脱氧核糖的第2位碳原子上没有羟基,不利于碱(-OH)作用使磷酸二酯键断裂。 9UA 1020 60 11GCTTAGTAGC 12卫星DNA tRNA rRNA单拷贝(不重复) 13解开重新结合复性 14起始浓度重复序列多少 15松弛(少绕)右扭紧(多绕)左 16三叶草倒L形三、选择题 1A 2D 3A 4A 5A 6D 7B 8A 9D 10D 11A 12A四、问答与计算 1根据RNase T1降解 RNA生成Gp或以 Gp为 3-末端寡核苷酸片段的特性, pGp为该片段的 5-末端, ApCp为3-末端。根据RNase I降解RNA生成Cp, Up或以 Cp

15、,Up为 3-末端寡核苷酸片段的特性, GpApCp为 5-末端, U为 3-末端。将两种酶降解的片段叠加,可得该片段的全部顺序为: pGpApCpApGpApApUpApGpApCpU 2根据RNase T1特异性地降解G与相邻核苷酸之间的磷酸二酯键生成Gp或以Gp 为3-末端寡核苷酸片段的特性,以及根据RNase A特异性地降解C和U与相邻 核苷酸之间的磷酸二酯键生成Cp、Up,或以Cp、Up为3-末端寡核苷酸片段的特性,将两种酶降解的片段叠加,可得该片段的全部顺序为: ApUpUpCpCpGpGpApCpUpCpGpUpCpCpA 3根据DNA结构鉴定的一般标准,可判断DNA样品是一个由

16、一条环状单链A和一条线状单链B组成的环状DNA分子,B链的长度短于A,所以该环状DNA分子具有部分单链。实验数据也表明该DNA分子具有单链性质(a,b,d,e,f)。由e可知A为环状单链,只有这样,在被切开一个切口时,才能产生与其沉降系数接近的线状单链C。由于C的沉降系数B,A的长度B,所以A与B形成环状分子,除A与B互补双链外,还有A剩余部分的单链。(a) 加热的温度接近该DNA的Tm值,开始退火复性后的A260与变性前应完全相同,因为在接近Tm值的温度时,DNA的两条链并未完全分开,所以复性可以达到与变性前相同的程度。 (b)加热的温度远远超过该DNA的Tm值,退火复性后的A260比变性前

17、高,因为在远远超过Tm值的温度时,DNA的两条链完全分开复性不容易达到与变性前相同的程度。5(a)紫外吸收随温度升高而增大,迅速冷却后,紫外吸收并不降低说明此样品分子为含氢键丰富的双键结构。 (b) 经CsCL密度梯度离心后,值较高,表明此样品中除 DNA片段外,还有 RNA片段。 (c)热变性后迅速离心,重新离心出现新带,这说明两条链的值不同,一条- 1.720是DNA的特征带,另一条值1.80,由于密度太大,离心时不能形成区带,但此链仍然完整存在,退火后重新出现就是证据。 (d) 双链中值大的一条链被碱降解说明此链是RNA。 综上所述,此核酸样品是由一条DNA片段和一条RNA片段形成的杂交

18、分子。6设Ecoli染色体应有的碱基为x,编码蛋白质的基因片段中应有的碱基对数为:3×2000×60000120=3×106=0.75x x=3×106/0.75=4×106(碱基对) 染色体的长度=0.34nm×4×106 =1.36×106nm。 染色体DNA的分子量640×4×1062.56×109 u7每个体细胞中有:(6.4×1096.4×109×1/3)/900=4.72×106(个基因) 每个体细胞中DNA的长度:6.4×

19、109×0.34nm=2.2×109nm=2.2km 人体内DNA的总长度:2.2×1013千米等于地球与太阳之间距离的:(2.2×1013)(2.2×109)=104倍8同源蛋白质是指来源不同的同一种蛋白质,它们具有基本相同的氨基酸序列,所以它们的基因具有相同的核着酸序列。当将带有同源蛋白质基因的N八片段,进行杂交时形成杂交分子的机会就比较多。9显然,突变株的DNA比正常株的DNA短2m2m2×104Å,2×104/3.4=5.88×103所以大约有5.88×103个碱基对缺失。10tRNA的功能是在蛋白质生物合成的过程中,转运氨基酸到核糖体参与肽链的形成。其3-端有一共同的序列是CCA,根据蛇毒磷酸二酯酶的水解产物可以推断该tRNA经RNase T1降解的寡核苷酸片段顺序为UpUpCpCpA16解释名词: (l)稀有碱基又称修饰碱基,这些碱基在核酸分子中含量比较少,但它们是天然存 在不是人工合成

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