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1、亲和层析实验相关操作示图生物教研室 - 朱超锋 - 2013/4/8 物品介绍蠕动泵硅胶管层析柱推杆筛板铁丝筛板的装入筛板的作用层析柱进行使用时,需使用两块筛板层析柱的底部放置一块,作用是:截留填料,而溶液能通过筛板流出。填料的上方再放置一块筛板,作用是:防止填料上方加入的溶液直接冲击填料床面(柱床),避免将床面冲散。填料被封装在两块筛板之间。(注意:上筛板和填料的上端刚好相接触,但不挤压填料)下筛板填料上筛板缓冲液筛板的装入下筛板蠕动泵卡片的装卸卡片的作用卡片将硅胶管固定并挤压在泵头上,泵头转动从而对硅胶管产生一个规律的脉冲性挤压,控制硅胶管内溶液的流动蠕动泵泵头上有两个卡片,一个卡片可固定
2、一根硅胶管,因此蠕动泵最多可同时驱动两根硅胶管溶液的流动。 (注意:当只驱动一根硅胶管时,需将固定有硅胶管的卡片放置在泵头朝内侧;空卡片放置在泵头外侧)卡片右上角有调节棘轮:调节软管与滚轴的紧密程度。棘轮上提,压紧硅胶管;下放,则放松。(注意:紧密度应适中,太松则硅胶管漏液,太紧则对硅胶管造成损坏)调节棘轮扳机泵头外侧内侧卡片蠕动泵卡片的装卸蠕动泵卡片的装卸固定柱卡片U口蠕动泵卡片的装卸调节棘轮-试漏(泵未开启!)泵未开启,因为管未被调节棘轮挤压,水会因重力作用,从另一端流出管虽受挤压,但还有缝隙,水依然会因重力作用,从另一端流出直至挤压合适时,缝隙被封闭,水不再流出(3分钟内)调节蠕动泵转向
3、泵面板显示数值为泵头转速,非管内溶液流速。流速需手动接水测定。泵开启,转头逆时针转动时,水流方向是从右到左水流方向不对时,请按面板的转向按钮,改变泵头转动方向填料装柱把准备好的填料,转入柱子。填料自然沉降。直至沉降完成(床面需平整,不平整可用玻璃棒搅拌填料让其重新沉降)用玻璃棒将上筛板倾斜或垂直放入置于平衡液液面下方再用玻璃棒将上筛板方向转至大概水平调整好蠕动泵后,关闭蠕动泵,往柱子内约1/4 高度的亲和柱平衡液填料装柱将筛板推至刚好与填料上表面接触(不要挤压填料!)用推杆将上筛板往下推(筛板下方应该没有气泡,若有请用玻璃将筛板弄至垂直赶走气泡后,再重复以上操作)上样示意图(示意图两筛板间没装填料,仅为示意图)用移液管将粗酶液加入(移液管尖端靠近筛板,并在筛板中间)平衡好后并调节好流速,上样前,需将上筛板以上的平衡液排空至液面刚好和筛板相切,关闭蠕动泵(可用泵抽走,若量较多,可用移液管从上方吸走)上样后,开启蠕动泵,并进行收集。当粗酶全部进入填料后(粗酶液面和筛板相切),关闭蠕动泵,往柱子内加入一定量平衡液后,再开启蠕动泵,继续收集卸出筛板(实验结束后)倒去填料后,将柱子下端接到水龙头的橡胶管上,用急水流一冲
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