国标牙膏抑菌效果的试验

1、牙膏抑菌效果的试验于群生天津蓝天集团股份300160摘要：在自然界中，除常见的动物和植物外，还生存着一个十分庞杂的个体微小的生物类群，这些 微小生物的个体用肉眼看不见，必须借助光学显微镜或电子显微镜将其放大几百倍甚至几万倍 才能看到，故被称为微生物。微生物是自然界中必不可少的生物，宇宙闻多种物质的循环，都是 微生物代谢活动的结果，可见没有微生物，植物不能生长，人和动物也将无法生存。但也有一些 微生物能引起人、畜、植物的疾病，对人类有害。人的13腔中就生存有很多微生物，牙膏作为口腔 清洁用品，应该对13腔中常见的微生物有抑制作用，通过试验我总结出三种测定牙膏抑菌作用的 试验方法。关键词：微生物抑

2、菌一、试管稀释法 I牙膏液的配制： 称取一定量的膏体于无菌三角瓶中，用无菌吸管吸取定量无菌生理盐水溶解膏体，制成各种不同浓度的牙膏液，用离心机别离，取上清液，弃去沉渣。本试验称取39牙膏，加10IIll无菌生理盐水，配成30浓 度的牙膏原液。2培养基的准备(1)-般细菌：如金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌等，可采用肉汤培养基或肉膏汤培养基。 (2)链球菌，肺炎球菌等应采用O05兔血细胞肉膏汤3试验方法 取无菌试管10支按表所示方法，将牙膏液稀释后，再用接种环挑取菌落于每管接种。试管号码 12456789 10勰7又长J血细胞肉汤牙膏液(mDn，L dL 。r 。入。卜。卜。濞去)曩藿麓鹤75 37,s

3、-K 75 t，s t s9 1 34川n s，n so4结果观察： 将试验管置37。C温箱中，培养1824小时后，观察结果，凡无细菌生长的试管中浓度最低者，其浓度即为该菌对此牙膏的敏感度。 有无细菌生长的判断有些参考书中介绍用眼睛观察，但我觉得此种方法不准确，我采用涂片染色的方法，用显微镜判断，结果是浓度低的试管中细菌生长正常浓度高的试管中细菌不能正常生长。为了弄清 不能生长的细菌是披杀死了还是被抑制不能生长了，我又从未生长细菌的试管中挑取一接种环液体移种 于普通肉膏汤中，培养24小时，再行涂片染色，观察结果说明牙膏对细菌(金葡为试验菌株)有抑制作用， 而没能杀死细菌5试验举例：36将浓度为

4、300ftg倒的氟化钠牙膏进行试管稀释试验。试管号码 I23456789肉膏汤(mD L 5 L 0 L 0 L 0 L 0 L 0 L 0 L 0 L 0时照) 牙膏液(mO 。入卜。入。卜。触， 螽ll勰75，t，-a，s n，s t田z st t 17 o 59 0结果：金黄色葡萄球菌对938(腭“)的氟化钠牙膏敏感。二、打洞法1试验方法： 用接种环挑取菌落均匀涂布于适宜的平板培养基上，待枯燥后，用灭菌打孔器，以无菌操作在平板上打洞，然后以无菌吸管定量加人牙膏液，勿使外溢，置37培养8一12小时，观察结果。2结果观察和报告： (1)观察洞周围有无抑菌圈，并量取抑菌圈直径的大小； (2)报

5、告某牙膏对某菌极度敏感、敏感或不敏感。3试验举例：牙膏液浓度 孔的直径 抑苗圈直径 牙膏名称 茵名(腭d)(m)()氟化钠 500 金黄色葡萄球菌 520 氟化钠 500 金黄色葡萄球菌 5 19 氟化钠 400 金黄色葡萄球菌 5 18 氟化钠 300 金黄色葡萄球菌 5 20极敏 六必治 300 金黄色葡萄球菌 6 20极敏 脱敏300金黄色葡萄球菌 6 20极敏三、纸片扩散法1纸片的准备： 用质量较好的滤纸轧成直径6玎一的圆纸片，放于平皿内，高压灭菌后，置于烤箱内充分烘干。将每一纸片用微量加样器加牙膏液00lnd，置37温箱内23小时枯燥，枯燥后立即装入无菌小瓶中加塞，置干燥器内保存。2

6、试验方法： (1)用接种环挑取试验菌茵落，均匀划线涂布于平板培养基上； (2)待枯燥后，用灭菌摄子。以无菌操作取出各种含牙膏纸片，分别平贴于涂有细菌的平板培养基表面。(3)培养8一12小时，长者可18小时以上观察结果。3试验举例：37浓度纸片直径 抑菌圈直径 牙膏名称 菌名(蜡lld)(m)(Im)氟化钠 300 金黄色葡萄球菌 6 lO 8 1l 六必治 300 金黄色葡萄球菌 6 10 9 9 脱敏 300 金黄色葡萄球菌 6 9 9 9以上试验方法是我在工作中摸索出来的，希望行业中搞此工程研究分析的同志提出更好的试验方法， 共同研究，切磋。附录1： 试验中所需要的培养基如下： (1)肉膏汤：成份：牛肉膏35克，蛋白胨lO克。氯化钠5克，蒸馏水lOOOml。 (2)营养琼脂：(或称普通琼脂) 成份：牛肉膏3。5克，蛋白胨lO克，氯化钠5克，琼脂20一25克，蒸馏水lOOOml。 (3)血液琼脂：成份：普通琼脂lOOml，无菌脱纤维羊血(或兔血)8一lOml。附录2： 试验中所需要的仪器如下：1显微镜2普通天平3分析天平4离心机5孵育箱(温箱)6冰箱7干热灭菌器8高压蒸气灭菌器9温水箱10洁净工作台 11接种环(针) 12玻璃枯燥器 13PH比色计14紫外光线灭菌灯 15试管16玻璃漏斗17