生物化学与分子生物学实验：3-生化实验基本操作

1、 生化实验基本操作技术生物化学与分子生物学实验教学中心玻璃器皿的洗涤溶液的混匀技术吸量管、加样器的使用123基本操作技术内容生物化学与分子生物学实验教学中心常用玻璃器皿的洗涤方法使用过的玻璃器皿洗涤（常规洗涤方法） 倒掉内容物自来水冲洗温肥皂水冲洗自来水冲洗蒸馏水冲洗三次新购置的玻璃器皿洗涤 2%盐酸浸泡数小时自来水冲洗常规洗涤血清堵塞刻度吸管洗涤 7.5mol/L尿素清洗常规洗涤油污烧杯试管洗涤 去油脂常规洗涤 （去油脂方法：将量器倒放于具有强吸水力的几层厚纸上，置100烤箱中烘烤半小时，使油脂溶化由厚纸吸收，再置碱性溶液中煮沸趁热洗刷，即可除去油脂）。生物化学与分子生物学实验教学中心污染玻

2、璃器皿洗涤 浸泡在杀菌剂（5%煤酚皂液）中过液常规洗涤染料污染玻璃器皿洗涤 清水清洗3%盐酸乙醇溶液清洗常规洗涤微量元素测定用玻璃器皿洗涤 单独清洗稀盐酸浸泡去离子水冲洗常规洗涤量器类玻璃器皿洗涤 立即清洗晾干铬酸洗液浸泡46h自来水冲洗蒸馏水冲洗比色杯洗涤 自来水冲洗蒸馏水冲洗 （洗不净可用3.5mol/L HNO3溶液或（0.30.6）mol/L HCl冲洗，禁用毛刷或强氧化剂或超声波洗涤）干燥自然干燥、烘烤干燥 量器自然凉干，容器烘干备用。常用玻璃器皿的洗涤方法生物化学与分子生物学实验教学中心洗涤、干燥原则与判断方法玻璃器皿洗涤原则： 对不同玻璃器皿，采用不同的洗涤方法。根据器皿污染源的

3、不同选择合适的洗涤液。玻璃器皿干燥原则： 量器自然凉干，容器烘干备用。器皿清洁的判断方法： 洗涤后倒置容器，其内壁无挂珠；干燥后器壁内外干净、无污物痕迹。生物化学与分子生物学实验教学中心溶液的混匀技术甩动混匀适用于试管内液量不多的溶液混匀。弹打混匀适用于锥形离心管、小试管和小塑料离心管等内容物的混匀。旋转混匀适用于未盛满溶液的锥形瓶、试管和小口容器等内容物的混匀。倒转混匀适用于具塞容器，如容量瓶、具塞量筒和具塞离心管等内容物的混匀。玻棒搅拌混匀适用于烧杯内容物的混匀。吸管混匀适用于样品不同浓度等级稀释的混匀。旋涡振荡器混匀适用于锥形离心管、小试管和小塑料离心管等内容物混匀。电磁搅拌混匀适用于酸

4、碱自动滴定、pH梯度滴定等。生物化学与分子生物学实验教学中心刻度吸管的使用选管（大小合适）总容量等于或稍大于取液量执管（左球右管）取液（一下一上） 插入液面下0.5cm，吸至最高刻度上方12cm调准刻度（三点一线） 溶液弯月面、视线和刻度线在同一水平上放液（贴壁放液） 需要吹的则吹出，如要求不吹的则让吸量管尖端停靠内壁约15s，同时转动吸管，重复一次。放置（放回吸管架） 禁止平放在实验台面上！洗涤（操作结束后）吸量管操作执管姿势 放液示意图生物化学与分子生物学实验教学中心可调式微量加样器的使用选择（大小合适）设置量程(动作轻缓） 先确定调节轮的方向，再调至大于或小于所需值一格，最后调回所需值。装吸嘴（套牢，避免间隙）取液（按至第一停点，缓慢吸液）放液（贴壁放液）先按至第一停点，再按至第二停点。卸吸嘴（废物缸）将数轮调回最大值放置（放在固定支架上，严禁平放或倒置）生物化学与分子生物学实验教学中心图A：把按钮压至第一停点，图B：垂直握持加样器，使吸头浸入液面下3-5毫米处，然后缓慢 平稳地松开按钮，吸入液体。图C：将吸头口贴到容器内壁底部并保持倾斜，平稳地把按钮压到 第一停点 。图D：压住