-血栓与止血检验分析前的质量控制ppt课件

1、血栓与止血检验分析前的质量控制. 根底实际. 一、血管壁的止血功能1、收缩反响加强：伤口减少，血流减慢。2、血小板的激活:构成血小板血栓，堵塞伤口。3、凝血系统的激活：激活，启动内源凝血系统；释放组织因子，启动外源凝血系统。4、部分血粘度增高：部分血管通透性添加，血浆外渗，血液浓缩，血粘度增高，血流减慢，有利于止血。.二、血小板的止血功能1、粘附功能：粘附于血管内皮下组份。2、聚集功能：血小板相互粘附。3、释放反响：释放、致密、溶酶体颗粒。4、促凝功能：如PF3的促凝活性，颗粒中的凝血因子释放。5、血块收缩功能：血凝块的收缩，有利于伤口的减少和愈合。6、维护血管内皮的完好性.三、血液凝固机制1

2、、凝血因子特性：14个，F存在全身组织中。共分4组。1、依赖VITK的凝血因子2、接触凝血因子：、3、对凝血酶敏感的凝血因子：F、F、F、FX4其它因子：F、F.四、血液的抗凝系统和纤溶系统1、细胞抗凝作用：主要经过单核-巨噬细胞系统、肝细胞、血管内皮细胞。2、体液抗凝作用：AT-、PC、PS、TM血栓调理蛋白等。3、其它抗凝物质：组织因子途经抑制物3、纤维蛋白溶解系统：包括组织型和尿激酶型纤溶酶原激活物、纤溶酶原、纤溶酶、纤溶抑制物。.一、检测系统的要求二、室内质量控制的方法及要求三、血凝仪之间的比对实验四、参考范围确实定五、标本采集阐明六、常见分析前缘由异常结果分析.一、检测系统的要求血凝

3、仪的试剂、校准品、耗费品配套运用： 运用非配套分析系统的实验室应按照NCCLS-EP9的要求与配套分析系统的结果进展比对，以验证分析系统的有效性。仪器运用前的评价： 验证其性能能否能到达制造商的性能要求制造商规定的性能要求必需满足临床需求。如：精细度、准确度、携带污染、可报告范围等。.批内精细度：实验方案：取正常、异常新颖血浆或质控， 延续反复测定20次，计算CV，SD。要求：CV 在1/4CLIA88 范围内。批间精细度：实验方案：延续20天测定同一批号室内质控正常、 异常两个程度，分别计算CV、SD。要求：CV 在1/3CLIA88范围内。.携带污染率高值样本对低值样本的污染实验方案：取新

4、颖样本或定值质控，将低值样本置样本架1和3位置，高值样本置于2位置，每个样本分别测定3次，记录结果：N1、N2、N3、A1、A2、A3、N4、N5、N6。计算：k1=N4-MeanN1，N2，N3/MeanN1，N2，3100%要求：k1在1/4CLIA88的范围内。低值样本对高值样本的污染 将1、3位置放高值，2位置放低值， 方法和要求同上.准确度：实验方案：根据本室参与的最近一年临床检验中心室间质评报答结果，以本室上报测定值(X轴)和本次质评报答的靶值(Y轴)求回归曲线，用医学决议程度代入回归曲线求得相应的预测值，计算医学决议程度和预测值的相对偏向来验证准确度。医学决议程度：INR:3.6

5、,APTT:40s,FIB1.5g/L要求:在 1/2CLIA88的范围内。.质控品的选择：制定程序和方法，以评价质 控品的质量和适用性。二、室内质量控制的方法及要求质控品的浓度程度：应至少运用2个浓度程度 含正常和异常程度质控工程：一切检测工程均应开展质控频度：检测当天至少1次.室内质量控制质控品均值确实定： 20个测定值，至少10天获得每天上下午各测一次，与上批号交叉 试剂改换新批号或仪器进展重要调整时， 应重新确定均值。规范差： 采用前一个月或前3个月的平均规范差 制造商提供的数据仅供参考.室内质量控制失控的判别规那么：至少运用1-3s规那么，多种质控 规那么的运用可提高误差捡出概率。

6、常用1-3s +2-2s失控报告：描画失控的情况、核对方法、缘由分 析、纠正措施及纠正效果的评价质控数据的管理：原那么上每月统计1次， 至少应保管2年。.三、血凝仪之间的比对实验条件：同一个系统仪器、试剂时间：6个月至少一次或改换重要部件后凝血实验不同系统为什么不能比对？ 不同仪器的检测原理不同 凝血反响为瀑布式，对不同试剂敏感性不一 无调理系数凝血反响没规律性 处理方法：建立各自的参考区间、验证等。.血凝仪之间的比对实验实验方案：预备10份新颖血浆样本含正常和异常标本，整个实验应在2h内完成。分别在基准仪器和比对仪器上检测，计算比对仪器和基准仪器之间的结果偏向百分比。要求：偏向绝对值在此范围

7、内1/2CLIA88为满足要求，80%以上标本满足要求为合格 以相对稳定的仪器作为基准机 CLIA88 PT、APTT:15%，FIB:20%) .四、参考范围确实定参考范围不是操作规程或教科书上订出的简单的固定的范围，而是随着仪器、试剂、年龄、性别以及环境等要素而变化的制定建立参考范围的程序，以确定不同检测系统的参考范围如：PT的INR参考范围为 0.851.15 其秒数的范围，不同批号试剂应根据以下公式计算：INR=实验秒数对照秒数ISI.正常对照 采集20份以上，年龄在1855岁，男女各半， 剔除服药者、肝肾功能异常及脂浊溶血标本， 安静形状下采血。 检测各管，结果取均值作为正常对照值

8、试剂改换批号，正常对照均应重新获取 厂家提供的参考值或参考范围 不能作为正常对照.正常混合血浆 采集20份以上，年龄在1855岁，男女各半，剔除服药者、肝肾功能异常及脂浊溶血标本， 安静形状下采血。 离心后将各管血浆均匀混合，然后分装保管 -20 两周、-40 两月、-70半年。 用途： 判别开瓶后试剂的有效性、室内质控品.参考范围的验证：实验方案：测定40份男女各半安康 人员新颖血样本。要求：判别检测结果能否落在本室设定 的参考区间内95以上。.确认病人的身份及容器硅化或塑料。多次反复采血的病人在同一条件下采血。止血带不要超越5分钟，强调采血顺利。迅速将血液和抗凝剂悄然的颠倒混匀。五、标本采

9、集阐明.各管采血顺序血培育凝血管血清管 肝素抗凝管血常规管血糖管美国BD公司引荐多管采集顺序 凝血管总是放第二，当只需一只凝血管时建议先采集一只空管丢掉再采集凝血管。 由于，当针头进入血管前要经过组织，此时组织液易进入针管。血液混入组织液后即刻启动外源凝血途径。.标本的储存 全血需在实验室规定的时间内离心并分别血浆； 假设标本不能在4小时内检测，需分别出血浆并转移至干净枯燥的符合要求的试管中加盖保管于28。 当天不能检测的样本需在-20条件下保管，两周内完成检测； -70条件下的保管期限可达6个月。. 抗凝剂 枸橼酸钠，0.109mol/L 抗凝剂与血液比例严厉按1：9 当Hct增高55%或1

10、20APTT 180TT 17.1/17.0FIB 3.12 g/LPLT 204x109/L分析： 肝素？ 标本稀释？ 采集缘由？II、VII、IX、XV处置： 联络临床讯问病史 检测凝血因子活性常见于误食老鼠药治疗六、常见分析前缘由异常结果分析. 依赖维生素K凝血因子 包括FII、VII、IX、X，其共同特点-氨基末端含有数量不等的 -羧基谷氨酸 在肝合成必需依赖VK，否那么无凝血活性 VK缺乏可导致新生儿出血或获得性成人出血性疾病 具有结合Ca+的才干，并借助于Ca+ 与磷脂膜结合，Ca+起“搭桥作用。 -羧基谷氨酸Ca+磷脂膜II、VIIIX、XVK.结果2PT 16.9/12.5AP

11、TT 180TT 180FIB 2.17 g/L分析： 标本被肝素污染 静脉留置管 血透时所采集处置： 联络临床 确认标本的正确采集 建议重新采血复查常见分析前缘由异常结果分析.肝素的抗凝原理： 肝素+AT构型改动暴露活性中心精氨酸 +IIa、Xa、XIIa、XIa、IXa (丝氨酸蛋白酶) 1：1构成复合物 从而使这些酶失去活性 VIIa 不被AT抑制PT为外源凝血系统的挑选实验，其启动因子 VIIaAPTT为内源凝血系统的挑选实验，其启动因子 XIIaTT所用的试剂成份是 IIa.结果3PT 11.2/12.5APTT 20.3/36.0TT 19.0/17.0FIB 2.33 g/L分析

12、： 采血不顺利 部分凝固 抗凝剂缺乏处置： 检查标本抗凝比例、凝块 重新采血常见于：肾病、产科、多发伤常见分析前缘由异常结果分析. 因子X的激活： FX FXa V FVa FIXa-VIIIa-Ca+-PF3TF-VIIa- Ca+Ca+PF3此复合物有FVa参与活性添加30万倍 凝血酶的生成因子V的激活：Ca+PF3+FXa+FVaIIa II.结果4PT 13.4/12.5APTT 57.2/36.0TT 16.8/17.0FIB 3.32 g/LFVIII 46%FIX 52%FXI 48%FXII 39%分析: 抗磷脂抗体综合征 抗磷脂抗体干扰凝血因子测定，而不是凝血因子活性真的降低

13、。LAC 1.73以上凝血因子检测是在APTT根底上进展常见分析前缘由异常结果分析舒普生类抗菌素干扰.外表接触FXIIFXIIaFXIFXIaHMWKFIXFIXaFVIIIaCa+PF3Ca+FXaFVaCa+PF3FXFIIFIIaFgFbLAC抗凝机制内源凝血系统LAC.结果5 ：羊水栓塞患者时间PT(s)APTT(s)FIB(g/L)TT(s)Ca+(mmol/L)产前12.133.04.7014.52.23DIC后22.474.90.5136.71.89DIC后24h17.682.51.1025.41.99DIC后48h13.1107.85.2814.11.65DIC后72h13.2

14、68.05.9015.52.08DIC后96h13.049.64.6214.82.51参考范围11.714.829.043.02.004.0014.020.02.102.55时间F:CF:CF:CF:CF:CF:CF:CF:CDIC后48h1041411911911891318487DIC后96h1091451392221261408877参考范围8211472134851207812868128841228211872113常见分析前缘由异常结果分析.时间悬浮红细胞(u)新鲜冰冻血浆(ml)单采血小板(u)5%白蛋白针(ml)24h内72740102502448h21400102504872

15、h-5401025072!96h-250该患者在手术及发生DIC 后不同时间输注的各种血量该患者输注了大量的血制品，体内存留过量的枸橼酸盐，导致APTT明显延伸。.PT原理： 外源凝血启动到凝血酶生成只需8秒钟血浆37 Ca+足量组织凝血活酶APTTT原理： 血浆 足量激活剂PF337 Ca+内源凝血启动到凝血酶生成需求35分钟.受检血浆乏因子血浆 PT 或APTT试剂患者正常凝血因子活性检测原理：制备不同稀释度时间活度凝血因子测定通常先将受检血浆做1:10稀释该患者APTT高度异常是由于血浆中过量的枸橼酸盐干扰APTT实验引起，而不是凝血因子缺乏导致。.PT测定的临床意义参考范围：10-15

16、SPT时间延伸见于：1.因子减低，较少见。2.肝脏疾病，3.VK缺乏症：胆石症、胆道肿瘤、慢性肠炎、偏食、2-7个月的新生儿以及长期服用广普抗生素的患者。4.血液中的抗凝物质增多，如肝素和FDP增多。5.用于香豆素类口服抗凝剂的监控，即PT值在参考值的两倍，INR2-3。PT缩短见于口服避孕药、高凝形状和血栓性疾病。.APTT检测的临床意义：参考范围：24-40SAPTT时间延伸：1.、缺乏。2.运用肝素治疗时，APTT监测药物用量。3.血管性血友病：由于患者VWF缺陷，F不稳定，故APTT时间延伸。4.异常抗凝物增多：血友病A患者长期输F，可产生F抑制物，APTT时间延伸。5.纤溶亢进：如DIC，产生大量FDP，APTT时间延伸。.纤维蛋白原测定的临床意义：参考范围：2-4g/L增高：见于糖尿病、急性心肌堵塞、急性传染病、结缔