范式法测定纤维素

1、原理采用范氏（a）的洗涤纤维分析法测定中性洗涤纤维（N）和酸性洗涤纤维（）原理植物性饲料经中性洗涤剂煮沸处理，不溶解的残渣为中性洗涤纤维，主要为细胞壁成分，其中包括半纤维素、纤维素、木质素和硅酸盐。植物性饲料经酸性洗涤剂处理，剩余的残渣为酸性洗涤纤维，其中包括纤维素、木质素和硅酸盐。酸性洗涤纤维经72硫酸处理后的残渣为木质素和硅酸盐，从酸性洗涤纤维值中减去72硫酸处理后的残渣为饲料的纤维素含量。将72硫酸处理后的残渣灰化，在灰化过程中逸出的部分为酸性洗涤木质素（）的含量。试剂的配制中性洗涤剂（十二烷基硫酸钠）：准确称取18乙二胺四乙酸二钠（，C10H1408Na22H20,分析纯）和8硼酸钠（

2、Na2B40710H20,分析纯）放入烧杯中，加入少量蒸馏水，加热溶解后，再加入0十二烷基硫酸钠（C12H25NaO4,分析纯）和10乙二醇乙醚（C4H10O2，分析纯）；再称取45无水磷酸氢二钠（Na2H04分析纯）置于另一烧杯中，加入少量蒸馏水微微加热溶解后，倒入前一个烧杯中，在容量瓶中稀释至1000i其中H值约为（H值一般勿需调整）；1N硫酸：量取约2787浓硫酸（分析纯，比重1848）,徐徐加入已装有500蒸馏水的烧杯中，冷却后注入1000容量瓶定容，标定；酸性洗涤剂（2十六烷三甲基溴化铵）：称取20十六烷三甲基溴化铵（C，分析纯）溶于1000硫酸，必要时过滤；中性洗涤纤维测定准确称取

3、10000样品（通过40目筛）置于直筒烧杯中，加入100中性洗涤剂和数滴十氢化萘及05无水亚硫酸钠。将烧杯套上冷凝装置于电炉上，在510内煮沸，并持续保持微沸0。煮沸完毕后，取下直筒烧杯，将烧杯中溶液倒入安装在抽滤瓶上的已知重量的玻璃坩埚中进行过滤，将烧杯中的残渣全部移入，并用沸水冲洗玻璃坩埚与残渣，直洗至滤液呈中性为止。用20丙酮冲洗二次，抽滤。将玻璃坩埚置于105C烘箱中烘2后，在干燥器中冷却0称重，直称至恒重。酸性洗涤纤维测定准确称取10000样品（通过40目筛）置于直筒烧杯中，加入100酸性洗涤剂和数滴十氢化萘及05无水亚硫酸钠。将烧杯套上冷凝装置于电炉上，在510内煮沸，并持续保持微

4、沸0i趁热用已知重量的玻璃坩埚抽滤，并用沸水反复冲洗玻璃坩埚及残渣至滤液呈中性为止。用少量丙酮冲洗残渣至抽下的丙酮液呈无色为止，并抽净丙酮。将玻璃坩埚置于105C烘箱中烘2后，在干燥器中冷却0称重，直称至恒重。酸性洗涤木质素和酸不溶灰分（）测定将酸性洗涤纤维加入72硫酸，在20C消化后过滤，并冲洗至中性。消化过程中溶解部分为纤维素，不溶解的残渣为酸性洗涤木质素和酸不溶灰分，将残渣烘干并灼烧灰化后即可得出酸性洗涤木质素和酸不溶灰分的含量。结果计算中性洗涤纤维含量的计算：N（）（W1W2）/WX100式中：W1玻璃坩埚和N重（W玻璃坩埚重（）W试样重（）酸性洗涤纤维含量的计算：（）（G1G2）/G

5、X100式中：G1玻璃坩埚和重（）G2玻璃坩埚重（）W一试样重（）半纤维素含量的计算：半纤维素（）N（）（）纤维素含量的计算：纤维素（）一经72硫酸处理后的残渣（）酸性洗涤木质素()含量的计算:(%)=残渣()灰分(硅酸盐%酸性洗涤木质素和酸不溶灰分()测定的优化：把酸性洗涤纤维置于50m烧杯中，加入5m72%硫酸，20C水解，然后加水45m，室温过夜，次日用已称恒重的号砂芯漏斗过滤，水洗残渣至6.5于60C烘干，称重。把剩余残渣在马福炉中550C经2.5灰化，测得灰分重量。洗涤优化：经过实际试验，发现中性洗涤纤维测定和酸性洗涤纤维测定中用丙酮冲洗这步效果不大，测量精度要求不高时，可省略。方法

6、一：化学滴定法(我们测定出来的结果较文献报道偏低)纤维素含量的测定所需溶液硝酸和醋酸的混合液，0.5重铬酸钾溶液，试亚铁灵指示剂0.1硫酸亚铁铵溶液，浓硫酸，0.1重铬酸钾溶液。实验步骤(1)配制所需的各种溶液，硫酸亚铁铵溶液在使用的一周内准备，并在使用当天测定其滴定度K。用该硫酸亚铁铵溶液滴定25m0.1的重铬酸钾溶液，用去mm(K=25X0.1/m称取自然风干的生物质粉末0.050.06g数值为n()装入离心管内，加入硝酸和醋酸的混合液5m塞住离心管，在沸水中煮沸25mn并定期搅拌离心，倒去清液，加入蒸馏水离心洗涤沉淀，共洗三次加入10m0.5的重铬酸钾溶液和8m浓硫酸，搅匀，放入开水中1

7、0mn并定期搅拌冷却，倒入锥形瓶中，用少许蒸馏水冲洗沉淀，滴入滴试亚铁灵试剂，用0.1的硫酸亚铁铵溶液滴定，用去bm，(由黄色经黄绿色至红褐色为终点用0.1的硫酸亚铁铵溶液单独滴定加入8m浓硫酸和10m0.5重铬酸钾溶液，用去m生物质中纤维素的含量计算公式x%=0.675XK()/n半纤维素含量的测定所需溶液80%硝酸钙溶液，2盐酸，酚酞指示剂，2氢氧化钠溶液，碱性铜试剂，草酸硫酸混合液，0.5%淀粉，0.01硫代硫酸钠溶液。实验步骤称取自然风干的生物质粉末0.10.2，数值为n装入小烧杯中，加入15m80%勺硝酸钙溶液，盖好加热至沸腾，在慢慢沸腾的情况下加热5mn()分步离心，分别用10m热

8、水洗涤沉淀三次在沉淀中加入10m2的盐酸，搅匀，沸水浴中搅拌情况下微沸45mn离心，残渣分别用10m蒸馏水冲洗三次，冲洗后的水溶液合并在离心液中加入1滴酚酞，用2氢氧化钠溶液中和到显橙红色转入100m的容量瓶，稀释到刻度用干燥滤纸过滤到干燥烧杯中移液管吸取10m滤液，加入10m碱性铜试剂，盖好在沸水中煮15mn冷却，加入5m草酸硫酸混合液，加入0.5m0.5淀粉，用0.01硫代硫酸钠溶液滴定至蓝色消失，用去bm(取10m碱性铜试剂，加5m草酸硫酸混合液，再加10m滤液，加入0.5m0.5%的淀粉，0.01硫代硫酸钠溶液滴定至蓝色消失，用去am(生物质中半纤维素的含量计算公式x%=0.9X100

9、248()()/10000X10Xn木质素含量的测定所需溶液1%醋酸，丙酮，7硫酸，10%氯化钡溶液，0.5重铬酸钾溶液，浓硫酸，0.1硫酸亚铁铵溶液，试亚铁灵指示剂。实验步骤标定新配的0.1硫酸亚铁铵溶液滴定度为K称取自然风干的生物质粉末0.00.1数值为n装入离心管，加入10%醋酸，摇动混匀离心，用醋酸洗沉淀()加丙酮34m在摇荡的情况下浸泡3,n洗三次(6)用玻璃棒将沉淀沿管壁分散开，将离心管放热水中使沉淀充分干燥()在干燥沉淀中加入硫酸3l用玻璃棒搅匀，挤压成均匀的浆液室温下放置一夜加入10蒸馏水，搅匀，置沸水中n冷却，加入0.氯化钡溶液，搅匀，离心，倒出清液，分别用10蒸馏水冲洗沉淀

10、两次，每次要混匀沉淀中加入100的重铬酸钾溶液和8浓硫酸，放入沸水不时搅拌1n冷却，倒入锥形瓶中，用少许蒸馏水冲洗沉淀，滴入3滴试亚铁灵试剂，用0.1的硫酸亚铁铵溶液滴定，用去，由黄色经黄绿色至红褐色为终点(13)用0.1的硫酸亚铁铵溶液单独滴定加入8浓硫酸的100.重铬酸钾溶液，用去(14)生物质中木质素的含量计算公式x%=0.433XK()n半纤维素含量的测定xnx=n=n方法原理用沸腾的80%硝酸钙溶液使淀粉溶解，同时将干扰测定半纤维素的溶于水的其它碳水化合物除掉。将沉淀用蒸馏水冲洗以后，用较高浓度的盐酸，大大缩短半纤维素的水解时间，水解得到的糖溶液，稀释到一定体积，用氢氧化钠溶液中和，

11、其中的总糖量用铜碘法测定半纤维素含量的测定所需溶液80%硝酸钙溶液(2)2盐酸(3)酚酞指示剂(4)2氢氧化钠溶液()碱性铜试剂(配置方法：称取无水23,4溶于100蒸馏水中溶后加酒石酸若不易溶解可稍加热，冷却后移入1000的容量瓶中。另取纯结晶44溶200蒸馏水中，溶后再将此溶液倾入上述容量瓶内，加蒸馏水至1000刻度，放置备用)()草酸硫酸混合液()0.淀粉(8)0.1硫代硫酸钠溶液实验步骤(3个平行)称取自然风干的生物质粉末0.10.2g数值为n装入10离心管中，加入108的硝酸钙溶液，盖好加热至沸腾，在慢慢沸腾的情况下加热n分步离心，分别用10热水洗涤沉淀3次，之后加丙酮再洗3次。在沉

12、淀中加入102的盐酸，搅匀，沸水浴中不停搅拌情况下微沸4n()离心，残渣分别用10蒸馏水冲洗三次，冲洗后的水溶液合并在离心液中。(注意：离心液千万别倒掉了，要倒在三角瓶中)()加入1滴酚酞，用2氢氧化钠溶液中和到显橙红色或者成为玫瑰色()转入100的容量瓶，稀释到刻度用干燥滤纸过滤到干燥烧杯中(注：抛弃最初滤出的少量滤液)移液管吸取10滤液装入大试管中，加入10碱性铜试剂，盖好在沸水中煮1n冷却，加入草酸硫酸混合液(加酸混合的时候必须在不断搅拌的情况下加入),再加入0.0.%淀粉，用0.1硫代硫酸钠溶液滴定至蓝色消失，用去取10碱性铜试剂，加草酸硫酸混合液，再加10滤液，加入0.0的淀粉，0.

13、01硫代硫酸钠溶液滴定至蓝色消失，用去(做空白对照)生物质中半纤维素的含量计算公式x%=0.9X100X248()()(1000Xn)纤维素的测定方法原理：生物质(浒苔、锯末和玉米秸秆)在加热的情况下用醋酸和硝酸的混合液处理，在这种情况下，细胞间的物质被溶解，纤维素也分解成单个的纤维，木质素、半纤维素和其它的物质也被除去。淀粉、多缩戊糖和其它物质受到了水解。用水洗涤除去杂质以后，纤维素在硫酸存在下被重铬酸钾氧化成二氧化碳和水。C6H10O5+4K2Cr2O7+16H2SO4=6CO2+4Cr2(SO4)3+4K2SO4+21H2O过剩的重铬酸钾用硫酸亚铁铵溶液滴定，再用硫酸亚铁铵滴定同量的但是

14、未与纤维素反应的重铬酸钾，根据差值可以求得纤维素的含量。实验步骤(3个平行)配制所需的各种溶液，硫代硫酸钠溶液在使用的一周内准备，并在使用当天测定其滴定度K。用该硫代硫酸钠溶液滴定25m0.1m的重铬酸钾溶液，用去mm。滴定度：K=25X0.1/m称取自然风干的生物质粉末0.050.06,数值为装入10m离心管内，加入硝酸和醋酸的混合液5m盖住离心管，在沸水中煮沸25m，并定期搅拌离心，倒去清液，加入蒸馏水离心洗涤沉淀，共洗三次加入10m0.5m的重铬酸钾溶液和m浓硫酸，搅匀，放入开水中10m,并定期搅拌冷却，倒入锥形瓶中，用少许蒸馏水1015m冲洗沉淀，滴入3滴邻菲罗啉指示剂，用0.1m/的

15、硫代硫酸钠溶液滴定，用去m由绿色转变为砖红色为终点()用0.1的硫酸亚铁铵溶液单独滴定加入m浓硫酸和10m0.5m重铬酸钾溶液，用去m()生物质中纤维素的含量计算公式x%=0.675XK(-)/2：木质素含量的测定方法原理先用1的醋酸处理以分离出糖、有机酸和其它可溶性化物。然后用丙酮处理，分离叶绿素、拟脂、脂肪和其它脂溶性化合物。将沉淀用蒸馏水洗涤以后，在硫酸存在下，用重铬酸钾氧化水解产物中的木质素：11124K2273224=112K24过量的重铬酸钾用硫代硫酸钠溶液滴定。方法和测定纤维素相同。所需溶液(1)1%醋酸(2)丙酮(3)73%硫酸(4)10%氯化钡溶液(5)0.5m/重铬酸钾溶液(6)浓硫酸(7)0.1m/硫代硫酸钠溶液()邻菲罗啉指示剂p实验步骤标定新配的0.1m硫代硫酸钠溶液滴定度为K称取自然风干的生物质粉末0.05-0.1,，数值为,装入离心管，加入10m凶乙酸，摇动5m混匀离心，用5m凶醋酸洗沉淀2次。加丙酮34m，在摇荡的情况下浸泡3m，共浸洗三次用玻璃棒将沉淀沿管壁分散开，将离心管放热水中使沉淀充分干燥以使丙酮完全挥发(大约在10分钟左右)在干燥沉淀中加入72%硫酸3m,用玻璃棒搅匀，挤压成均匀的浆液()室温下放置一夜(约16小时)，溶解全部的纤维素()第二天向离心管中加入10