大乌泡叶中总黄酮含量测定

1、大乌泡叶中总黄酮含量测定程伟,秦文杰,陈素红,叶祖光【摘要】目的为大乌泡资源的公正开拓和使用提供试验根据。要领接纳60%甲醇提取大乌泡叶总黄酮,分光光度法测定其含量；并通过不变性、重复性、细密度和接纳率试验查验了该要领的可靠性和重复性。效果尺度液和供试液均在510n处有最大汲取。重复性、细密度、加样接纳率试验的rsd值别离为2.11%、0.97%、2.34%,含量测定效果表白大乌泡叶中总黄酮含量为3.8%。结论以60%甲醇提娶硝酸铝显色、510n测定的分光光度法实用于大乌泡叶中总黄酮含量的测定。【关键词】大乌泡；总黄酮；含量测定；分光光度法keyrds：rubusultibrateatusle

2、vl.etvant.；ttalflavnids；ntentdeterinatin；spetrphtetry大乌泡为蔷薇科悬钩子属植物大乌泡(rubusultibrateatuslevl.etvant.),别名倒生根、黄水泡、无刺乌泡、糖泡叶、马莓叶,以根及全株入药。天下大部门地域均有漫衍,主产于四川、云南、贵州等地。其味苦、性凉,入脾、肝二经,具清热解毒、祛风除湿、凉血、止血、接骨的成果。大乌泡为苗药的常用药,但如今尚未见对大乌泡化学身分研究的报道,我们通过对大乌泡叶的化学身分的体系研究,创造此中含有很多黄酮类身分(另文报道),现就大乌泡叶中总黄酮的含量测定要领报道如下。1仪器与试药uv-75

3、7rt紫外分光光度计(上海uni),ab135-s电子阐发天平(瑞士梅特勒-托利多公司),q-250超声波洗濯器(上海超声仪器厂),电热恒温水浴锅(北京市永灼烁医疗仪器厂),索氏提取器。芦丁比较品(中国药品生物成品检定所提供,批号10080-202206)。本研究所用大乌泡叶于2022年7月网罗于贵州省黔西南州普安县,经秦文杰副研究员断定为蔷薇科悬钩子属大乌泡(rubusultibrateatuslevl.etvant.),标本存放于中药复方新药开拓国度工程研究中央。甲醇为阐发纯,5%亚硝酸钠、10%硝酸铝、4%氢氧化钠等均接纳阐发纯自配。2要领与效果2.1供试品溶液的制备枯燥大乌泡叶粉末约2

4、.0g,细密称定,置索氏提取器中,参加60%甲醇100l,于恒温水浴锅上90提取6h,过滤,减压浓缩并定容至50l容量瓶中,得供试品溶液。2.2芦丁比较品溶液的制备细密称取枯燥至恒重的芦丁比较品4.75g,用少量60%甲醇溶解,置50l容量瓶中,用60%甲醇定容至50l,摇匀,静置,配成浓度为95g/l的芦丁比较品储藏液。2.3测定波长的选择以芦丁为比较品测定大乌泡叶中总黄酮的含量。细密汲取比较品液、供试品液各适量别离参加到25l容量瓶中,按“2.4项下要领操纵,并在400600n范畴内扫描,效果均在510n处有最大汲取波长,其他身分对测定无滋扰,应选择510n为测定波长。2.4尺度曲线的绘制

5、细密汲取浓度为95g/l的芦丁比较品溶液0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0l,别离置于25l量瓶中,别离参加5%亚硝酸钠溶液1.0l,摇匀,安排6in后各参加10%硝酸铝溶液1.0l,摇匀后安排6in,别离参加4%氢氧化钠溶液10l,用60%甲醇稀释至刻度,摇匀,安排10in,在510n处测定吸光度。回归方程为：y0.0012x0.001,r0.9996。效果表白,芦丁比较品溶液浓度在95570g/l之间呈精良的线性干系。2.5要领学观察细密汲取95g/l芦丁比较品溶液5.0l,置于25l量瓶中,按“2.4项下要领举行显色和测定,重复6次实行,记载吸光度。吸光度的rsd0.97

6、%(n6),说明仪器细密度精良。细密称取样品6份,每份约2.0g,细密称定,按“2.1项下要领制备供试品溶液,每份细密汲取1.0l,别离置于10l容量瓶中,按“2.4项下要领举行显色和测定,记载吸光度值,盘算每份样品的含量。6份样品黄酮含量的rsd2.11%(n6)。细密称取样品6份,每份约2.0g,按“2.1项下要领制备供试品溶液。细密汲取供试品溶液1.0l,共6份,别离置于10l量瓶中,按“2.4项下要领举行显色和测定,别离在15、20、30、45、60、100in测定,rsd1.38%(n6)。效果表白样品在15100in之间不变。细密称取芦丁比较品适量,参加含量的比较品,称取样品6份,

7、每份约1.0g,细密称定,按供试品溶液制备要领制成溶液6份,各取1.0l,置于10l量瓶中,按“2.4项下要领举行测定,效果见表1。表1加样接纳率试验效果略2.6样品含量测定细密称取样品6份,每份约2.0g,按“2.1项下要领制备供试品溶液。每份细密汲取1.0l,别离置于10l量瓶中,按“2.4项下要领举行显色和测定,由尺度曲线盘算得大乌泡中总黄酮均匀含量为3.8%,rsd2.4%,说明该要领测得的含量是可靠的。表2大乌泡叶中总黄酮含量测定效果略3讨论本试验用硝酸铝作为黄酮类比色测定的显色剂,重要是黄酮母核中含有碱性氧原子,一样平常又多带酚羟基,能和铝离子产生黄色络合物,又参加亚硝酸钠和氢氧化钠,使在碱性溶液中显赤色,显色反响在100in内不变1。对样品的提取要领举行观察,超声、加热回流和索氏提取3种提取要领中,接纳索氏提取总黄酮,测得吸光度值最大2。对显色体系和显色体系浓度别离举行观察,效果表白5%亚硝酸钠、10%硝酸铝、4%氢氧化钠溶液显色,吸光度值最大。接纳紫外分光光度法对大乌泡叶中总黄酮的含量举行测定,是一种便利有用